食管癌术后局部复发患者TK1表达及同步放化疗对其影响的探讨

夏明林，杨 林

(安徽医科大学第一附属医院放疗科，安徽合肥 230022)

食管癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，发病率居中国全部恶性肿瘤的第5位，死亡率居中国全部恶性肿瘤死亡率的第4位［1］。目前手术治疗仍是其首选的治疗方法，局部复发是手术治疗失败的主要原因，同步放化疗为术后局部复发的主要治疗方法。胸腺嘧啶核苷激酶(Thymidine kinase，TK)是合成DNA的关键酶之一，它包括两种同工酶:一个是存在于细胞质中的细胞质胸苷激酶(简称TK1)，一个是存在于线粒体中的线粒体胸苷激酶(简称TK2)。其中，TK1与DNA复制呈正相关，正常人血清中TK1含量极低，恶性肿瘤患者由于细胞的过度增殖导致TK1水平升高，TK1的浓度与细胞增殖状态紧密联系。TK1可作为恶性肿瘤诊断、疗效检测、预后判断及评估早期癌性转移风险辅助指标［2－4］。彭春伟等［5］也认为动态监测肿瘤患者的血清TK1可以评价治疗效果，包括手术及放化疗的治疗疗效。本研究采用酶增强化学发光技术检测食管癌根治术后局部复发患者同步放化疗前后的血清TK1水平，探讨其临床相关性。

1 资料与方法

1.1 研究对象 病例选取安徽医科大学第一附属医院放疗科2013年3月—2014年4月65例食管癌根治术后局部复发的患者。治疗组入组标准:所有患者经CT检查提示局部复发或细胞学穿刺提示转移癌;心、肝、肺、肾功能正常;血红蛋白＞90 g·L－1;无感染迹象;无明显放化疗禁忌证。治疗组男性61例，女性4例;中位年龄60岁;术后病理提示鳞癌58例，腺癌7例;高分化11例，中分化35例，低分化19例;胸上段癌18例，胸中段癌32例，胸下段癌15例;按临床TNM分期(2002年AJCC食管癌国际TNM分期标准)Ⅱ期患者38例(其中 T2N0M0 17例，T2N1M0 14例，T3N0M0 7例)，Ⅲ期27例(T3N1M0 27例);术后行瘤床区及淋巴结引流区预防性放疗的患者9例。

1.2 治疗方法 所有入组患者均采用三维适形调强放疗，每次1.8～2 Gy，每周5次，照射总量为60～66 Gy;照射期间同时配合TP方案(紫杉醇135 mg·m－2d1+顺铂30 mg·m－2d1～3)化疗2个周期，28 d为1个周期。

1.3 标本采集 采集所有入组患者治疗前和治疗后的清晨空腹静脉血2mL，采用酶增强化学发光技术检测TK1水平，将TK1≥2 pmol·L－1定为阳性结果。酶增强化学发光法试剂盒和CIS-1化学发光数字成像分析仪由深圳华瑞同康生物技术有限公司提供。同时采集入组患者治疗前清晨空腹静脉血2 mL，采用化学发光法检测患者癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌相关抗原(SCCA)和细胞角化素蛋白片段19(CYFRA21-1)(以下简称肿瘤三项)作为对照组，将CEA≥5μg·L－1、SCCA≥1.5 μg·L－1、CYFRA21-1≥ 3.3 μg·L－1定为阳性，其中任何一项检测结果为阳性定为联合检测阳性。

1.4 统计学方法 所有资料经SPSS17.0软件统计包处理。计量资料均值±标准差(±s)表示，前后比较为配对t检验;阳性率用率表示，组间比较为χ2检验;检验水准 α=0.05。

2 结果

2.1 食管癌术后复发的时间和部位 复发的时间及部位以首次就诊时的时间和部位为准。患者手术到复发就诊的时间为35 d～95月，中位复发时间12.5月。65例食管癌术后复发患者纵隔淋巴结转移28例(43.08%)，锁骨上淋巴结及颈部淋巴结转移19例(29.23%)，腹腔淋巴结转移6例(9.23%)，吻合口复发 6 例(9.23%)，吻合口和淋巴结同时复发4例(6.15%)，纵隔淋巴结和锁骨上淋巴结同时复发2例(3.07%)。

2.2 血清TK1阳性率和肿瘤三项联合检测阳性率比较见表1。

表1 血清TK1阳性率和肿瘤三项联合检测阳性率比较

2.3 血清TK1水平与食管癌术后复发患者T、N分期、临床分期及分化程度的相关性分析 分别对比T2分期患者和T3分期患者、N0分期患者和N1分期患者、治疗前血清TK1水平，结果显示T3分期患者的血清TK1水平明显高于T2分期患者的血清TK1水平，差异有显著统计学意义(P=0.010);N1分期患者的治疗前血清 TK1水平(6.59±6.31)pmol·L－1平均高于N0分期患者的血清TK1水平(3.23±3.28)pmol·L－1，差异有显著统计学意义(P=0.006);Ⅱa期患者(24例)、Ⅱb期患者(14例)、Ⅲ期患者(27例)的血清 TK1水平分别为(3.23 ±3.28)、(4.59 ±4.62)和(7.62±6.88)pmol·L－1，两两比较差异均有统计学意义;但高分化、中分化和低分化患者的血清TK1水平各组之间两两比较差异无统计学意义。各组间两两比较详见表2。

表2 血清TK1水平与食管癌术后复发患者T、N分期、临床分期及分化程度的相关性分析

2.4 同步放化疗前后血清TK1水平比较 食管癌术后复发患者放化疗前后血清TK1水平分别为(5.35±5.60)和(3.39 ±4.18)pmol·L－1，治疗后较治疗前血清 TK1 水平明显下降，差异有显著统计学意义(P=0.000)。

3 讨论

早期诊断和早期手术治疗是根治食管癌和获得长期生存最有效的方法，但由于术后局部复发成为治疗失败的主要原因，因此，患者在接受食管癌根治术后应定期复查，一旦有局部复发争取早期治疗，尽最大可能延长患者的生存期。颈、胸、腹部CT、彩超、食道吞钡射片等辅助检查可以用于辅助诊断食管癌根治术后局部复发及淋巴结转移，但当复发的病灶较小时不出现任何临床症状，这些辅助检查出现阳性结果时病情较晚，而血清学检测能够较早的预测肿瘤复发风险。

胸腺嘧啶核苷激酶参与DNA合成的补救合成，它存在两种同工酶，分别是TK1和TK2，增殖周期中的TK1在细胞分裂的G1期含量较低，因此释放到血液中的TK1含量很低，而在S期到M期，大量细胞死亡，高浓度的TK1释放到外周血中，血清TK1逐渐升高，至G2期达到最高。TK1的表达水平与细胞增殖有关，在非增殖细胞及健康人群的血清中，TK1的水平极低，通常很难检测出来，而肿瘤细胞处于恶性增殖状态，血清中TK1显著增高，可通过检测肿瘤患者血清TK1水平为临床诊断和治疗提供依据［6－7］。

食管癌术后局部复发以纵膈淋巴结转移最多见，其次为颈部及锁骨上淋巴结转移，腹腔淋巴结及吻合口复发相对较少，与张明霞等［8］研究一致。目前用于食管癌的血清肿瘤标志物较少，如癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌相关抗原(SCCA)、细胞角化素蛋白片段19(CYFRA21-1)和P53蛋白抗体(P53-Ab)等。食管癌根治术后患者术后1周血清TK1水平上升，术后1个月后明显回落，术后连续监测并对比患者血清TK1水平有助于预测患者复发风险，早期发现患者局部复发［9－10］。本研究显示血清TK1诊断食管癌术后局部复发的阳性率(75.38%)显著高于CEA、SCCA及CYFRA21-1联合检测的阳性率(13.85%)，差异有统计学意义。因此血清TK1有助于食管癌术后局部复发的早期诊断。多项研究［11－13］亦显示食管癌患者的血清TK1水平明显高于健康人群及良性疾病患者，并与患者的临床分期、有无淋巴结转移存在有意义的相关性，血清TK1水平为食管癌的早期诊断、治疗疗效、预后判断及复发风险的评估提供重要的指导意义。食管癌术后局部复发患者血清TK1水平与患者的T分期、N分期、临床分期存在有意义的相关性，检测患者的血清TK1水平可以判断患者的预后，为评价患者的复发风险提供参考依据。本文中患者治疗后血清TK1均值较治疗前有明显下降，差异有统计学意义。本文所收集的病例均得到局部控制，与患者的血清TK1水平总体下降吻合，因此，血清TK1水平可以评估食管癌术后局部复发患者的治疗疗效。与文献［9－10］报道相符。

综述所述，对于食管癌术后患者，可于术后连续监测血清TK1水平，通常术后1周有所升高，1周后逐渐下降，下降后血清TK1再次出现升高现象，其原因可能是细胞增殖活性逐步增强，此时应警惕肿瘤复发和转移的风险，密切随访，判断患者的预后，如有复发，尽早治疗，尽最大可能延长患者的生存期。对于有局部复发接受治疗的患者，监测血清TK1可以为评价患者的治疗疗效提供依据。

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