介入热化疗栓塞对肝癌患者的疗效及血清血管内皮细胞生长因子和基质金属蛋白酶水平的影响

肖金成，李靖，黎海亮，郭晨阳

（郑州大学附属肿瘤医院介入科，河南 郑州 450000）

介入热化疗栓塞对肝癌患者的疗效及血清血管内皮细胞生长因子和基质金属蛋白酶水平的影响

肖金成，李靖，黎海亮，郭晨阳

（郑州大学附属肿瘤医院介入科，河南 郑州 450000）

目的分析介入热化疗栓塞对肝癌患者血清血管内皮细胞生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶（MMP）水平的影响及其临床价值。方法选择在该院接受治疗的肝癌患者作为研究对象，随机分为接受常规介入治疗的对照组，以及接受介入热化疗栓塞治疗的观察组。比较两组患者的血清VEGF和MMP水平，血清缺氧诱导因子及炎症因子水平等差异。结果观察组患者接受介入热化疗栓塞治疗后各个时期的血清VEGF含量明显低于对照组（P＜0.05）。观察组患者接受介入热化疗栓塞治疗后的MMP-2、MMP-9和MMP-13水平均明显低于对照组（P＜0.05）。观察组患者接受介入热化疗栓塞治疗后的血清低氧诱导因子（HIF）、干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平均明显低于对照组（P＜0.05）。结论介入热化疗栓塞治疗可以明显降低肝癌患者血清VEGF和MMP含量，减少缺氧诱导因子表达，减轻全身炎症状态。

肝癌；介入热化疗栓塞；血管内皮细胞生长因子；基质金属蛋白酶

中晚期肝癌患者手术治疗效果不佳，姑息性治疗介入化疗栓塞是目前临床最常用且治疗效果明确的方式。介入化疗栓塞可以大幅杀灭肿瘤细胞，但是肿瘤血管栓塞过程中可出现末梢小血管因缺氧出现的暂时性闭合，导致栓塞不充分、残留肿瘤细胞多，且残留细胞可分泌一系列细胞因子促使肿瘤复发转移，直接降低治疗效果[1]。热疗为目前诸多学者推崇了可以与介入化疗栓塞相结合的治疗方式，通过在治疗过程中扩张微血管、增加肿瘤细胞通透性、增加细胞内化疗药物浓度等途径，增强肿瘤细胞杀灭效果。本研究主要分析介入热化疗栓塞对肝癌患者血清血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）含量的影响及其临床价值。具体报道如下：

1 资料与方法

1.1一般资料

选择于2012年7月-2014年1月在本院接受住院治疗的首次确诊的中晚期肝癌患者96例作为研究对象，均经临床病理证实，所有入组患者及家属在了解研究过程后均签署知情同意书。按照随机数表法将所有入组患者分为观察组和对照组，各48例。观察组采用介入热化疗栓塞治疗，对照组患者接受常规介入化疗栓塞治疗。观察组患者中，男27例，女21例；年龄57～82岁，平均（68.63±8.21）岁；观察组患者中，男28例，女20例；年龄58～83岁，平均（69.07±8.21）岁。两组患者的一般资料比较差异不具有统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2治疗方法

对照组患者接受介入化疗栓塞治疗，具体如下：患者全身麻醉气管插管，常规消毒铺巾后穿刺股动脉，行腹腔干造影、肿瘤供血动脉选择性插管。经导管注入丝裂霉素8 mg、替加氟注射液1.0 g，将吡柔比星20 mg与碘化油5～20 ml混合成乳化物，用明胶海绵栓塞动脉血管近端。观察组在介入化疗栓塞治疗基础上，加入热疗，具体如下：奥沙利铂100 mg+5%葡萄糖溶液500 ml，加至热疗机的高压注射筒中进行热疗，稳定设置为46～55℃，流速0.3 ml/s，灌注时间30 min。丝裂霉素8 mg、替加氟注射液1.0 g，吡柔比星20 mg与碘化油5～20 ml混合成的乳化物均经导管灌注，用明胶海绵栓塞动脉血管近端。

1.3观察指标

1.3.1血清VEGF水平在患者接受治疗前、治疗后1 d、1周、1个月时，分别抽取晨起空腹外周静脉血，3 000 r/min离心后取上清待测，采用ELISA法测定患者VEGF含量。

1.3.2血清MMP水平在患者接受治疗前后，抽取晨起空腹外周静脉血，采用ELISA法测定其中MMP-2、MMP-9及MMP-13水平。

1.3.3血清缺氧诱导因子及炎症因子水平在患者接受治疗前后，抽取晨起空腹外周静脉血，采用ELISA法测定血清缺氧诱导因子（hypoxia inducible factor，HIF）及炎症因子包括干扰素γ（Interferon-γ，IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平。

1.4统计学方法

本研究所有数据均采用SPSS 18.0软件进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（±s），两两比较采用t检验，检验水准为α=0.05。

2 结果

2.1血清VEGF水平

治疗前两组患者的血清VEGF水平差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受介入热化疗栓塞治疗后各个时期的血清VEGF含量明显低于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 两组患者接受不同治疗后的血清VEGF水平比较（pg/ml±s）

表1 两组患者接受不同治疗后的血清VEGF水平比较（pg/ml±s）

组别治疗前治疗后1 d治疗后1周治疗后1个月观察组342.09±86.22298.17±73.18178.33±53.1293.27±11.05对照组339.67±83.81319.36±79.41301.72±71.33329.36±78.32 t值0.385.287.339.63 P值0.1870.0200.0050.001

2.2血清MMP水平

治疗前两组患者的血清MMP水平差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受介入热化疗栓塞治疗后的MMP-2、MMP-9和MMP-13水平均明显低于对照组（P＜0.05）。见表2。

2.3血清缺氧诱导因子及炎症因子水平

治疗前两组患者的血清缺氧诱导因子及炎症因子水平差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受介入热化疗栓塞治疗后的血清HIF、IFN-γ和TNF-α水平均明显低于对照组（P＜0.05）。具体见表3。

表2 两组患者接受不同治疗后的血清MMP水平比较（ng/L±s）

表2 两组患者接受不同治疗后的血清MMP水平比较（ng/L±s）

组别治疗前治疗后MMP-2MMP-9MMP-2MMP-9MMP-13观察组126.93±11.37127.38±11.7698.26±9.2734.28±4.3335.28±5.0243.18±5.38 MMP-13对照组t值128.07±12.53 0.39 129.04±13.52 0.47 97.26±8.79 0.39 75.09±7.38 6.27 77.37±8.13 8.36 86.02±9.73 9.73 P值0.2830.2530.2830.0190.0130.011

表3 两组患者接受不同治疗后的血清缺氧诱导因子及炎症因子水平比较（±s）

表3 两组患者接受不同治疗后的血清缺氧诱导因子及炎症因子水平比较（±s）

组别治疗前治疗后HIF/（pg/ml）IFN-γ/（ng/L）HIF/（pg/ml）IFN-γ/（ng/L）TNF-α/（ng/L）观察组174.93±32.750.55±0.073.02±0.53112.84±20.260.41±0.032.13±0.38 TNF-α/（ng/L）对照组t值176.33±34.82 0.48 0.56±0.09 0.39 3.01±0.62 0.33 193.28±39.26 6.63 0.57±0.08 5.08 2.97±0.52 6.28 P值0.2210.2780.2830.0160.0210.019

3 讨论

中晚期肝癌由于失去最佳的根治性手术治疗时机，保守治疗为理想方式，其中介入化疗栓塞为最常见方式。单纯介入栓塞治疗目前在临床中应用广泛，已经取得了明确的治疗效果，但是术后残留肿瘤细胞可分泌大量血管生长因子，导致肿瘤血管新生及肿瘤复发，需反复进行介入治疗[2]。多次介入治疗科引起肿瘤细胞产生耐药性，致后期治疗效果骤降，且患者免疫功能逐步降低，对残余肿瘤细胞的抵抗力降低，整体治疗效果欠佳且反复治疗给患者带来巨大不良心理暗示。介入下热疗联合化疗栓塞是近年来学者较为推崇的整合治疗方案，有望更为彻底地杀灭肿瘤细胞，减少肿瘤复发[3]。

肝癌为富含血管的恶性实体瘤，其生长快、易发生肝内播散及血行转移，以上特性均依赖于肿瘤内血管生成。细胞因子中VEGF是目前已知的特异性作用于血管内皮的唯一生长因子，可以直接参与肿瘤血管生成[4]。诸多文献中已经证实肿瘤患者血清VEGF水平明显高于正常人群，其升高程度更是与肿瘤恶性程度呈正相关，可见VEGF是肿瘤恶性行为的始动因素之一。上述研究显示观察组患者在接受介入热化疗栓塞治疗后各个时间点的血清VEGF水平低于对照组，可能与介入热疗促使肿瘤供血微血管扩张，增加癌细胞膜流动性，增加了对化疗药物的吸收及渗透，使细胞内化疗药物浓度大幅上升，显著增强了肿瘤细胞杀灭效果，进一步抑制其相关细胞因子表达活性及肿瘤血管新生能力，VEGF水平顺势降低[5-6]。

越来越多的研究证实，MMP家族在恶性肿瘤的发生发展过程中扮演着重要角色，MMP是由多种锌离子依赖性酶组成的酶系家族，通过降解细胞外基质、促进肿瘤血管生成等生理过程而发挥促进肿瘤生长、转移的作用[7]。MMP家族亚型众多，其中MMP-2、MMP-9和MMP-13是研究较为热点的基因。MMP-2是MMP家族中与肿瘤关系最为密切的因子之一，可以特异性降解基底膜主要成分Ⅳ型胶原，同时对细胞外基质进行改建，促进肿瘤新生血管的形成[8]。MMP-9属于明胶酶，可以降解变性胶原蛋白，通过在酶链的解除域上插入3个纤维连接蛋白域，分别结合胶原酶、明胶酶及层粘连蛋白。MMP-13属于胶原酶，可以也一下分解胶原蛋白。OSAWA等[9]的研究证实在肝癌患者中MMP各亚型均高表达，且转移性肝癌中表达量高于非转移性肝癌。上述研究显示观察组患者在接受介入热化疗栓塞治疗后的血清MMP-2、MMP-9和MMP-13蛋白表达水平明显降低，可见在常规介入化疗栓塞时加入热疗，可以打开栓塞后肿瘤末梢因低氧而暂时关闭的血管，使得栓塞更为充分，对残存肿瘤细胞的刺激小，肿瘤的侵袭转移能力大幅降低，在指标上直接表现为MMP家族因子水平的降低。

HIF是人体缺氧状态下调节细胞内氧代谢的关键因子之一，可以诱导血管生长因子表达及新生血管形成、促进肿瘤生长。以上讨论的VEGF及MMP均部分受HIF调控，其变化可能早于VEGF及MMP表达的变化，故HIF水平的变化成为准确预测肿瘤治疗效果及远期复发可能性的因子之一。肝癌患者存在一定的免疫功能障碍，这与多种细胞因子及其受体相关，其中促炎因子IFN-γ和TNF-α等发挥重要作用。IFN-γ是肝细胞再生始动因子，TNF-α可作用于成纤维细胞及肿瘤基质细胞，诱导分泌包括VEGF在内的大量因子，促进全身炎症反应及肿瘤血管再生。上述研究显示观察组患者接受介入热化疗栓塞治疗后的血清HIF表达量大幅降低，血清IFN-γ和TNF-α水平亦明显降低。这与以上VEGF及MMP表达降低的结果相一致，更加说明了介入化疗栓塞中加入热疗可以更彻底杀灭肿瘤细胞，有助于减轻患者全身炎症状态，且减少参与肿瘤细胞的血管新生及转移的活性，有利于减少后期肿瘤复发，延长患者生存时间。

综上所述，介入热化疗栓塞治疗可以明显降低肝癌患者血清VEGF和MMP含量，减少缺氧诱导因子表达，减轻全身炎症状态。

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（王荣兵 编辑）

Effect of interventional heated chemotherapy on patients with hepatocarcinoma and clinical value of serum VEGF and MMP levels

Jin-cheng XIAO,Jing LI,Hai-liang LI,Chen-yang GUO
(Department of Intervention,the Affiliated Cancer Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou,Henan 450000,P.R.China)

【Objective】To analyze the effect of interventional heated chemotherapy on hepatocarcinoma patients' serum VEGF,MMP levels and its clinical value.【Methods】The patients with hepatocarcinoma in our hospital were chosen as research objects,and randomly divided into control group with routine interventional treatment,observation group with interventional heated chemotherapy.The serum VEGF,MMP levels,serum levels of hypoxia inducing factors and inflammatory factors in two groups were compared.【Results】Serum VEGF levels of observation group patients was significantly lower than those of control group patients(P<0.05).Serum MMP-2,MMP-9,MMP-13 levels of observation group patients were significantly lower than those of control group patients(P<0.05).Serum HIF,IFN-γ,TNF-α levels of observation group patients were significantly lower than those of control group patients (P<0.05).【Conclusion】Interventional heated chemotherapy could obviously reduce hepatocarcinoma patients' serum VEGF,MMP,reduce hypoxia inducing factor expression,and relieve systemic inflammation.

hepatocarcinoma;interventional heated chemotherapy;VEGF;MMP

R735.7

B

1005-8982（2015）25-0087-04

2015-01-11