沙丁胺醇及其常用检测方法

文│孙书刚 李建伟 张富刚 孙书涛 陈国信（河北省沧州市青县农业局）

沙丁胺醇及其常用检测方法

文│孙书刚 李建伟 张富刚 孙书涛 陈国信（河北省沧州市青县农业局）

“瘦肉精”主要包括盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、塞布特罗等，是属于β类兴奋剂的苯乙胺类药物。其中的沙丁胺醇归属于β2类兴奋剂。养殖户喂饲沙丁胺醇后，可达到猪群生长速度提高、瘦肉率增加、卖相好（猪毛色红润光亮等）的目的。饲喂沙丁胺醇的猪只，在屠宰后肉色鲜红、脂肪层薄，往往是皮贴着瘦肉，瘦肉丰满，十分迎合大众消费市场。但是，这严重损害了我国百姓的身体健康，由于误食瘦肉精而产生不良症状的事件层出不穷，例如2005年江西应用技术学院黄金校区75名学生误食含瘦肉精猪肉，集体中毒；2006年上海200余人瘦肉精中毒，广东省惠州市5名工人猪肝中毒，瘦肉精超标1000倍；2008年，浙江嘉兴中茂塑胶实业有限公司70名员工在午饭后开始出现手脚发麻、心率加快、呕吐等症状，医院确认为瘦肉精中毒；2009年，广州市出现瘦肉精恶性中毒事件，共67人发病；2011年双汇瘦肉精事件……瘦肉精给人们带来的危害不仅仅是这些，更多的是对肉品质量安全的恐惧。由于瘦肉精中盐酸克伦特罗、莱克多巴胺已经广为人知，于是“二代瘦肉精”沙丁胺醇正在被不法商户逐渐推广。

一、沙丁胺醇的化学性质

沙丁胺醇，白色结晶状粉末，无臭，味微苦。化学名为1-（4-羟基-3-羟甲基苯基）-2-（叔丁氨基）乙醇，分子式为C13H21NO3，分子量为239.31，易溶于水，能溶于甲醇，微溶于乙醇，不溶于乙醚和三氯甲烷。熔点为154～158℃，在熔融时同时分解。沙丁胺醇易与硫酸形成白色或近白色的结晶性粉末状盐。

二、沙丁胺醇的危害

沙丁胺醇具有很强的热稳定性和生化稳定性，一般烹饪很难使其失活或清除。人体对沙丁胺醇吸收快，排泄慢，极易产生蓄积。沙丁胺醇易蓄积于眼角膜，在毛发、肺、肝、肾、肌肉、尿样、血液中也有残留。食用含有沙丁胺醇的猪肉，对心脏和肝、肾的毒性较大，甚至会引发人体多种不良反应，主要包括震颤、心悸、头痛、恶心、失眠等，还会出现肌肉痉挛、过敏反应等罕见症状。除此之外，沙丁胺醇还会诱发和加重糖尿病、心脑血管病人的病情，严重威胁着人们的身体健康和生命安全。

三、沙丁胺醇常用检测方法

1.感官检测。外观方面，长期饲喂沙丁胺醇的生猪皮肤白里透红、光洁、毛少，臀部结实上翘、匀称呈红亮状。背部驱打后易见伤痕且长久不消退。行走不灵活，易发生跛行，蹄部易受伤并发生感染。一般健康猪肉呈淡红色，肉质弹性好，不会有“渗血”现象。而饲喂沙丁胺醇比较严重的猪屠宰后，肉色异常鲜红透亮，后臀肌肉饱满、脂肪薄，肉皮紧贴瘦肉、瘦肉纤维疏松。对猪屠宰后的感官识别，可以快速简便地作出初步判定。

2.胶体金免疫层析法。胶体金免疫层析法具有方便快捷、操作简单的特点。一般10～15分钟便可完成初步筛查得出结论。相对于其他检测方法而言，其生产成本和检测成本均较低。但是，胶体金免疫层析法只能作为样品的初步筛查方法，仅用来判断样品是否可疑，不能准确定性是否含有沙丁胺醇。

3.酶联免疫吸附法。即竞争性酶联免疫吸附法。目前，在我国这种技术已经非常成熟，市场上有很多商品化的检测试剂盒，只要按照试剂盒中的说明书即可完成

检测，操作简单快捷，准确率较高。但是需要注意的是：在分子结构方面，沙丁胺醇和克伦特罗较为相似，因此克伦特罗抗体和沙丁胺醇反应具有一定的交叉性，这就会导致同一个样品用沙丁胺醇试剂盒和克伦特罗试剂盒检测，如果是阳性样品就会显示两项都是阳性，不易区分此样品含有哪一种瘦肉精。因此，酶联免疫吸附法也常常用于大批量样品的筛选工作，不能作为最后科学准确定性的依据，必须使用其他方法来进行确证。

4.气相色谱法。气相色谱法检测动物组织和尿液中沙丁胺醇的含量已经比较成熟，例如高效气相色谱法、气相质谱联用法等。气相质谱联用法检测样品，常常需要将样品进行前处理，然后净化，最后衍生化后于气相质谱联用分析仪进行分析。样品进行前处理常使用酶解法。这是因为水解法，反应非常强烈，且通常使用盐酸或高氯酸。而酶解法则比较温和，但是缺点为反应时间较长，常使用的试剂是β-葡萄糖苷酸酶／芳基硫酸酯酶。净化时使用固相萃取法，多数实验人员选择使用MCX或SCX固相萃取小柱。净化后使用氮、氧-双三甲基硅烷三氟乙酰胺（BSTFA）进行衍生化，衍生完成后，于气相质谱联用分析仪上进行测定。气质联用检测法测定沙丁胺醇具有检出限较低、稳定性好、准确性高、灵敏度高的特点，通过萃取净化大大降低了样品中杂质的干扰。但是由于气相质谱联用分析仪仪器设备昂贵，很难在基层普及，检测操作环节较为复杂，对实验要求较高，且检测耗时较长，不适用于一线检测。

5.液相色谱法。液相色谱法不需要对提取液进行柱前衍生，样品处理较为简单，例如高效液相色谱法、超高效液相色谱法、液相质谱联用法等。秦永平等创建了反相高效液相色谱-紫外法，用以测定血浆中沙丁胺醇含量，该法的最低检测限0.3微克/升，回收率在98%～109%之间，相对标准偏差（RSD）＜8%。金雁等使用高效液相色谱-二极管阵列检测器可以检测出动物组织中沙丁胺醇的含量。尚红霞等利用该方法检测饲料中的沙丁胺醇的含量，并利用Amberlite XAD-2大孔吸附树脂进行固相萃取，有效解决了萃取过程中的乳化问题。二级阵列管检测器的使用，不仅增加了沙丁胺醇检测定性的准确性，且该方法的分析成本较低，易于操作及推广。Ram N.Gupta

等创建了沙丁胺醇检测的反相柱液相色谱-荧光法，荧光检测器的激发波长和发射波长为275纳米和310纳米，沙丁胺醇的最低检测限0.2微克／升。赵善贞等利用高效液相色谱-串联质谱法，测定猪肝中沙丁胺醇的最低检出限0.1微克／千克，回收率为76.8%～82.8%，RSD小于5.8%。该法具有灵敏度高、检测准确的特点，但质谱仪操作复杂，价格昂贵，不适于基层使用。超高效液相色谱能获得更高的柱效，在更宽的线性范围内保持柱效恒定，在峰容量、分析效率、灵敏度等方面较高效液相色谱有很大提高。

四、小结与展望

虽然沙丁胺醇残留检测的方法非常多，但是目前我国行业标准和国家标准使用的方法为液相质谱联用法和气相质谱法，此两种方法都能够得到较准确的检测沙丁胺醇的含量，但是样品预处理过程都非常复杂且耗时较长。酶联免疫法处理样品预处理过程操作简便，可同时检测多个样品，很大程度上缩短了分析时间，但是仅可以作为快速筛选手段，不能作为定性确证依据。因此，对液相质谱联用法和气相质谱法的进行简化，对现有复杂、繁琐、耗时长的样品预处理方法的进行改进是非常必要的。这就需要我们监察工作者不断探索新的方法，使得沙丁胺醇的检测工作更加方便、快捷、准确，为老百姓食用放心肉提供可靠保障。