酶抑制法速测技术在农药残留检测中的应用

杨静++王欢++谢伟强++刘丽萍

摘要 介绍了农药残留速测技术，重点介绍了酶抑制法速测技术以及其所依据的速测方法标准，并对基于酶抑制法的农药残留快速检测技术在检测过程中的注意事项作了阐述，以期为今后的农残速测提供了参考依据。

关键词 农药残留；速测技术；酶抑制法；速测仪

中图分类号 S481.8；TS207.53 文献标识码 B 文章编号 1007-5739（2015）17-0161-01

农产品质量安全逐渐成为社会关注的热点问题，由于我国农产品市场为 “小农户、大市场”的生产销售模式，要求农产品的残留检验结果必须在较短时间内准确完成，但是采用传统的实验室定量检测往往不能满足这一要求。因此，发展高效、快速的农药残留检测技术是解决这个问题的最好途径。

1 农药残留速测技术

现有的农药大致可分为氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、有机氯类、有机磷类等。由于农药的品种繁多、化学结构复杂，给农药残留检测技术提出了更高的要求。农药残留速测技术可分为生物检测、化学检测和生化检测三大类，目前研究较多的有生物传感器法、酶抑制法、仪器分析法、活体检测法等。其中，酶抑制法是相对成熟的一种对特定农药进行残留速测的技术，也是目前使用最为广泛的农药残留速测技术。

2 酶抑制法速测技术

酶抑制法的工作原理是基于有机磷及氨基甲酸酯可特异性地抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶（AchE）的活性的原理，在乙酰胆碱酶及乙酰胆碱共存的体系下，加入待测农产品提取液和指示剂，根据反应体系中乙酰胆碱酶活性受到抑制的情况（由指示剂指示），判断出产品中有机磷和氨基甲酸酯类农药是否超标。该法适用于有机磷和氨基甲酸酯类农药的检测。

3 酶抑制法所依据的农药残留快速检测方法标准

目前，农药残留检测不同速测方法均制定成相关的国家标准或行业标准，仪器设备也都是基于这些标准开发，其原理和操作要点可按标准要求执行，在此不作重复，为了方便使用，下面列出现有的农药残留速测国家标准方法供选用参考。NY/T 448《蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法》、GB/T 18625《茶叶中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的简易检验方法——酶抑制法》、GB/T 18630《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的简易检验方法——酶抑制法》、GB/T 5009.199《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》。

4 基于酶抑制法开发的农药残留速测仪器

国内一些仪器生产企业以相关国标为基础建立检测方法，并生产了速测仪器进行推广应用，例如上海博纳新技术研究所生产的CL-BⅢ残留农药测定仪、深圳市安鑫宝科技发展有限公司生产的WT-R01智能数码型农残速测仪等。

5 农药残留快速检测仪检测过程注意事项

5.1 试剂保存与配制

按照使用说明的要求，缓冲液和显色剂可在室温下进行保存，酶试剂和底物要求在0～4 ℃下进行冷藏保存；底物和冻干酶粉用缓冲液进行配制，显色剂和缓冲液用纯净水或蒸馏水稀释，稀释时应注意各种试剂对应的稀释液，同时注意用量[1]。试剂切勿冷冻至结冰，使用前摇匀，用一瓶取一瓶，防止其他物质的污染。并且遵循“只出不进”的原则，每次检测时，吸出的试剂不管使用与否都不能放回试剂瓶中。所有用于转移试剂或样品的器具都要专用并贴上标识[2]。

5.2 培养温度与时间

在关于培养温度与时间的问题上，关键要保证样品测试与对照测试保持相同的条件，检测结果才有一致性。不同厂家生产的酶因灵敏度和稳定性不同，其对培养温度要求也有所不同，另外培养时间也不同[3]。

5.3 样品处理

对于一些叶绿素较高的蔬菜，为减少色素的干扰，可采取整株浸提的方法。有些农作物会产生对酶有影响的植物次生物，这些次生物容易导致检测结果呈假阳性，比如葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、蘑菇、茭白及番茄等，处理这类样品时，可采用整株浸提或采用表面测定法[4]。待测样品大小为1 cm×1 cm比较适宜，太大或太小都会影响提取。另外，由于同一样品不同部位农药含量也不同，因此如果采用重复性检测时，最好为同一待测液，否则可能出现重复性不好的情况[5]。

5.4 样品提取

对样品进行振荡提取时，可采用振荡器，如果手动振摇，尽量注意幅度不要大，以免影响结果。

5.5 仪器操作

在检测的过程中，操作的速度应尽量快，即加入底物和上机测试的时间一定要快，且底物的量要一致，否则也会带来误差。

5.6 结果判断

抑制率在40%～50%之间的样品为可疑超标样，>50%为超标样，≥40%的样品需重复检验2次以上，超标样品应用气相色谱仪或液相色谱仪进行精确定量检测确认。

6 结语

就目前发展来看，农产品安全检测要体现快速和准确，因为农产品在生产、运输及销售的各个环节，都可能受到污染，都需要控制安全质量，以上介绍的检测技术已经广泛在我国食用农产品生产流通领域、质量监督检验部门和科研院所使用，是农产品质量安全监管一项重要的内容。文章所提出的关于速测技术中的一些注意事项，可以作为农产品快速检验的重要依据，有助于相关部门农药残留检测工作的顺利开展。

7 参考文献

[1] 马爱国.农产品质量安全检测技术实务[M].北京：中国农业出版社，2011.

[2] 王晓飞，周启星.蔬菜中农药残留检测技术研究进展[J].生态科学，2004，23（4）：356-361.

[3] 纪淑娟，赵丽丽.快速检测果菜类蔬菜有机磷农药残留结果分析[J].沈阳农业大学学报，2002，33（1）：14-16.

[4] 李艳莉.蔬菜中有机磷与氨基甲酸酯类农药残留酶抑制法快速检测技术[J].现代农业科技，2015（11）：148.

[5] 刘丰茂.农药质量与残留实用检测技术[M].北京：化学工业出版社，2011.endprint