苓桂术甘合三拗汤止咳、化痰、平喘作用的实验研究*

河北中医学院 (石家庄050091)

温瑞书 宋翠淼 邓国兴 许华洲 吴中秋 王文智 陈小玉△ 侯晓明△

咳嗽哮喘是临床主要疾患之一，中医对之有很好的疗效，苓桂术甘汤和三拗汤均经反复临床实践表明，疗效满意。苓桂术甘汤和三拗汤均可治疗咳嗽哮喘，苓桂术甘汤针对宿病，三拗汤针对新疾，临床多有宿病新发的咳嗽和哮喘，故理论上两个方剂配合应当有协同作用。据此理论，笔者进行了苓桂术甘合三拗汤的止咳、化痰、平喘疗效的动物实验研究，现报告如下。

1 苓桂术甘合三拗汤的止咳、化痰作用

1.1 材料

1.1.1 动物:昆明种小鼠，18～20 g，清洁级，雌雄各半，由河北省实验动物中心提供，合格证号709152 号。

1.1.2 药物:苓桂术甘汤由茯苓、桂枝、白术、炙甘草四味药组成。三拗汤由麻黄、苦杏仁、生甘草三味药物组成，水煎时加生姜3 片。苓桂术甘合三拗汤为苓桂术甘汤和三拗汤等容剂混合液。氯化铵片，天津市力生制药厂，批号0704003;桂龙咳喘宁胶囊(300 mg/粒)，山西桂龙医药有限公司，批号070301，国药准字号:Z20053135。咳必清(25 mg /粒)天津力生制药股份有限公司，批号0703007。

1.1.3 试剂:氨水，石家庄市华迪化工工贸有限公司，批号20070313;0.25%苯酚红，北京化工厂。氢氧化钠(NaOH)，天津市化学试剂三厂。

1.1.4 仪器:721 型分光光度计，上海第三分析仪器厂。

1.1.5 统计学处理:本实验资料数据采用均数±标准差表示，应用SPSS13.0 统计软件，组间比较采用单因素方差分析，检验水准α=0.05。

1.2 方法与结果

1.2.1 止咳作用:昆明种小鼠，雌雄各半，体质量18～22 g，随机分为9 组，每组8 只，分别为模型对照组、苓桂术甘合三拗汤(简称合方组)高、低剂量组、苓桂术甘汤高、低剂量组、三拗汤高、低剂量组、桂龙咳喘宁对照组、咳必清对照组。苓桂术甘汤和三拗汤均水煎，苓桂术甘合三拗汤合方为苓桂术甘汤和三拗汤等容剂混合液。模型对照组灌服等量蒸馏水，其他组灌胃给相应药。连续3 天，末次给药1 h 后，分别将小鼠置于倒置的80 mL 烧杯中，内放一棉球，用1 mL 注射器吸取氨水0.5 mL，注入棉球中，观察和记录小鼠的咳嗽潜伏期。［1］

结果可见，苓桂术甘合三拗汤合方高低剂量组的小鼠咳嗽潜伏期明显延长，与模型对照组比较，差异有显著性，P＜0.05;与三拗汤高、低剂量比较，潜伏期延长，但差异无显著性;与苓桂术甘汤高、低剂量比较，潜伏期明显延长，差异均有显著性，P＜0.05。详见表1。

表1 苓桂术甘合三拗汤对氨水致小鼠咳嗽的止咳作用 (±s)

表1 苓桂术甘合三拗汤对氨水致小鼠咳嗽的止咳作用 (±s)

注:与模型对照组比较，* P＜0.05;与苓桂术甘汤高低剂量组比较，☆P＜0.05;与咳必清对照组比较，◇P＜0.05

组别 动物数(只)剂量(g/kg)咳嗽潜伏期(s)53.88±22.00合方低剂量组 8 5 64.50±26.13＊☆◇合方高剂量组 8 10 76.13±20.75＊☆◇苓桂术甘汤低剂量组 8 6 45.38±18.00◇苓桂术甘汤高剂量组 8 12 52.50±35.00◇三拗汤低剂量组 8 4 56.25±20.75◇三拗汤高剂量组 8 8 64.88±17.63＊☆◇桂龙咳喘宁对照组 8 1.5 64.88±11.88＊☆◇咳必清对照组 8 0.3 32.00±8.73模型对照组8*

1.2.2 祛痰作用:昆明种小鼠，体质量18～22 g，雌雄各半，随机分为9 组，每组8 只，分别为模型对照组、苓桂术甘合三拗汤合方(简称合方组)高、低剂量组、苓桂术甘汤高、低剂量组、三拗汤高、低剂量组、桂龙咳喘宁对照组及氯化铵对照组，各给药组连续3 天灌胃给药，容量为0.2 mL/10 g 体质量，模型对照组给予等量蒸馏水，末次给药1 h 后，腹腔注射酚红0.1 mL (5 mg)/10 g 体质量，0.5 h/L 后处死动物，剥去气管周围组织，剪下自甲状软骨下至气管分支处的一段气管，滤纸擦后，放入盛有2 mL 生理盐水的试管中，再加0.1 mL NaOH (1 mol/L)，用721 型分光光度计(波长546 μm)测OD 值，［2－4］(用OD 值表示酚红排泌量多少，OD 值大表示酚红排泌量多)。

结果可见，各给药组气管酚红排泌量均高于模型对照组，苓桂术甘合三拗汤合方高、低剂量组、苓桂术甘汤高、低剂量组、三拗汤高、低剂量组的气管酚红排泌量均高于模型对照组，差异有显著性，P＜0.05。说明苓桂术甘合三拗汤合方高、低剂量组、苓桂术甘汤高、低剂量组、三拗汤高、低剂量组均显示气管酚红排泌增加，而以苓桂术甘合三拗汤合方高剂量组为更佳。详见表2。

2 苓桂术甘合三拗汤的平喘作用

表2 苓桂术甘合三拗汤对小白鼠气管段酚红排泌量的影响 (±s)

表2 苓桂术甘合三拗汤对小白鼠气管段酚红排泌量的影响 (±s)

注:动物数减为7 只，是因为取气管段时有不成功的。与模型对照组比较，* P＜0.05;与苓桂术甘汤高低剂量组比较，☆P＜0.05;与桂龙咳喘宁对照组比较，◇P＜0.05;与氯化铵对照组比较，△P＜0.05

组别 动物数(只) 剂量(g/kg) 气管酚红排泌量(OD 值)0.036 88±0.003合方高剂量组 8 10 0.077 75±0.024＊☆◇△合方低剂量组 8 5 0.062 88±0.034＊◇△苓桂术甘汤高剂量组 7 12 0.054 00±0.041*苓桂术甘汤低剂量组 7 6 0.051 71±0.024*三拗汤高剂量组 8 8 0.072 25±0.027＊☆◇△三拗汤低剂量组 7 4 0.059 00±0.040*桂龙咳喘宁对照组 8 1.5 0.042 25±0.013氯化铵对照组模型对照组7 0.5 0.042 25±0.012 8

2.1 材料和方法

2.1.1 药物:苓桂术甘汤(伏苓12 g，桂枝9 g，白术6 g，炙甘草6 g)三拗汤(麻黄、苦杏仁各9 g，生甘草3 g，水煎时加生姜3 片)。氨茶碱(100 mg/片)石家庄欧意药业有限公司，批号040070401，国药准字号:H13021033。

2.1.2 动物:DH 豚鼠，清洁级，体质量200～250 g，雌雄兼用，由河北省实验动物中心提供，合格证号710096 号。

2.1.3 试剂:磷酸组织胺，上海楷洋生物技术有限公司，批号0703131;氯化乙酰胆碱，上海楷洋生物技术有限公司，批号0703151。

2.1.4 仪器:超声雾化器，Yc—Y800 型，亚都科技有限公司;喷雾装置，自制。

2.1.5 敏感动物的选择:取豚鼠分别置入4 L玻璃杯中，以最大恒压气雾喷入0.1%磷酸组织胺和2%氯化乙酰胆碱等容积混合液5 s，吸入10 s，打开风门，观察豚鼠哮喘发作的潜伏期(哮喘发作的时间以喷雾开始至豚鼠出现抽倒起计算)，引喘潜伏期小于150 s 为敏感。

2.1.6 敏感动物的分组与给药:取预选合格的豚鼠(引喘潜伏期小于150 s)，按体质量随机分为5 组，每组8 只，分别为模型对照组、苓桂术甘合三拗汤组(简称合方组)、氨茶碱组、三拗汤组、苓桂术甘汤组。氨茶碱组给予氨茶碱腹腔注射(0.1 g/kg)，其他各给药组连续3 天喷吸相应中药15 min，模型组喷吸蒸馏水15 min，末次给药1 h后将豚鼠放入喷雾装置内，喷入2%氯化乙酰胆碱和0.1%磷酸组织胺等容积混合液10 s，闻吸60 s，打开风门，记录豚鼠哮喘潜伏期(喷雾开始至出现抽搐或跌倒时间)，如潜伏期超过6 min，按360 s 计算，［1－3］分别比较各给药组与模型对照组间的差异情况。

2.1.7 统计学处理:本实验资料数据采用均数±标准差表示，应用SPSS13.0 统计软件，组间比较采用单因素方差分析，检验水准α=0.05。

2.2 结果 苓桂术甘汤组、三拗汤组及合方组的哮喘潜伏期均较模型组延长，与模型组比较，三拗汤组差异有显著性(P＜0.05)，合方组差异有显著性(P＜0.05);与苓桂术甘汤组比较，合方组差异有显著性(P＜0.05);与三拗汤组比较，合方组差异有显著性(P＜0.05)。以合方组的哮喘潜伏期最长，详见表3。

表3 苓桂术甘合三拗汤防治实验性哮喘统计表 (±s)

表3 苓桂术甘合三拗汤防治实验性哮喘统计表 (±s)

注:与模型对照组比较，* P＜0.05;与苓桂术甘汤组比较，△P＜0.05;与三拗汤组比较，☆P＜0.05

组别 动物数(只) 给药方法 剂量(g/kg)致喘潜伏期(s)15 min 128±31合方组 8 喷雾15 min 4.1 256±90＊△☆苓桂术甘汤组 8 喷雾15 min 5.0 151±35三拗汤组 8 喷雾15 min 3.2 184±81*氨茶碱组 8 腹腔注射 0.1 195±31模型对照组 8 喷雾*

3 讨论

目前，临床治疗哮喘，中医和西医都有许多方法，西医有药物口服、皮下注射、静脉注射、舌下含药、灌肠等;中医有内服中药、中药雾化吸入、皮肤敷帖、直肠给药、注射给药及针灸疗法。虽然对其急性哮喘无论中医、西医都有许多方法使其缓解，但疗效短暂，屡愈屡发，为了阻止本病的再次发作，医疗工作者们采取了许多方法，在众多有效方剂的运用中，有宣肺平喘作用的三拗汤在实践中以重复性好为其显著性特点。其组方药物在近10年来出现在发作期哮喘证治方剂中占哮喘组方的42%，［4］成为一个具有典型意义的哮喘发作期方剂的组成部分。

三拗汤原名“还魂汤”，出自《金匮要略》，由麻黄、苦杏仁、甘草三味药物组成，系由《伤寒论》麻黄汤(麻黄去节三两、桂枝二两、苦杏仁去皮尖七十个、甘草炙一两)去桂枝加生姜而成主治鼻塞声重、咳嗽痰多、头痛目眩等外感风寒咳嗽证。在《太平惠民和剂局方》中首次出现以“三拗汤”为名的成方，采用连节麻黄、连皮杏仁、连梢甘草，与常规炮制加工方法相拗，故名三拗汤。

咳嗽是临床常见的病症，中医认为，系肺气不宣所致，哮喘也是临床常见的病症，多为宿病新发所致。即内有伏饮，复有诱因引起，使痰气搏结于气道，这是哮喘发作的基本病理。而痰饮形成，又与肺脾肾三脏密切相关，故有“脾为生痰之源，肺为贮痰之器，肾为痰之本”之说。其中以肾气最为重要，盖肺主气，而脾阳的运行必得肾气的温煦濡养。本病患者体质多弱，哮喘均因小有不慎即发，加之冬寒之袭损阳，故用苓桂术甘汤温化痰饮，以杜痰源，乃“病痰饮者，当以温药和之”的代表方剂。

苓桂术甘汤出自张仲景《伤寒杂病论》，由茯苓、桂枝、白术、甘草四味药组成，具有温阳化气、健脾利水的作用，适应于脾阳不足、气不化水、聚湿成饮的痰饮病。方中茯苓健脾利湿，桂枝温阳化气，白术补益脾气，运化水湿，炙甘草调和诸药，配合茯苓、白术兼能健脾，配合桂枝甘温补阳。四药共奏健脾渗湿、温化痰饮之功。

现代临床对三拗汤的应用主要集中在主症为咳嗽和哮喘的应用上。据报道采用辨证与辨病相结合的方法，以三拗汤为主方，治疗感冒、支气管炎、支气管哮喘等上呼吸道疾病可取得稳定的良好临床疗效。治疗以咳嗽为主的病症，主要用于咳嗽变异性哮喘，痰吐白沫状，苔薄白的风寒型患者;或经治疗表证不复存在，而咳嗽缠绵不愈者;或表证未解，入里久郁化热等各种咳嗽;邪郁肺经的喉源性咳嗽;各种疾病引起的咳嗽，报道疗效在90%以上。治疗以哮喘为主的病症，主要用于支气管哮喘、急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作。从近年报道来看三拗汤被作为平喘止咳的基础方，用于各种咳喘病。对咳喘、哮鸣音、排痰、呼吸功能等具有显著效应，对IgE 等变态反应性指标有较为明确的影响。本动物实验表明，苓桂术甘合三拗汤组对氨水致小鼠咳嗽有明显镇咳作用，可增加小鼠气管段酚红排泌量，说明有明显化痰作用。对2%氯化乙酰胆碱和0.1%磷酸组织胺等容积混合液所致豚鼠哮喘，苓桂术甘汤和三拗汤均可使哮喘潜伏期延长，而以三拗汤效果为佳，将两方合用的苓桂术甘合三拗汤，则更好地增强了两方的平喘作用，说明将两方相合的苓桂术甘合三拗汤更能明显抑制豚鼠哮喘反应，这为临床应用提供了药效学依据。

［1］中华人民共和国卫生部药政管理局·中药新药研究指南(药学·药理学·毒理学)［S］.卫生部，1994.133－134

［2］陈奇.中药药理实验［M］.北京:人民卫生出版社，1988.158

［3］宋翠淼，牛丽颖，李乾，等.小儿清肺止咳口服液的镇咳、祛痰及平喘作用的实验研究［J］.河北中医药学报，1998，13 (2):1－3

［4］童黄锦，许惠琴.三拗汤类方治疗支气管哮喘的作用机制研究进展［J］.辽宁中医药大学学报，2008 (10)4:45－47