不同炮制方法对决明子中蒽醌类成分含量的影响

赖日明

【摘要】目的：分析不同炮制方法对决明子中蒽醌类成分含量的影响。方法：采用分光光度法对决明子生品、清炒炮制品、微波炮制品中蒽醌类含量进行测定。结果：微波炮制法浸出物得率和游离蒽醌含量最高，该方法比传统炒制法效果更佳，在微波炉中以中火加热6min、铺设厚度0.5cm能取得最好效果；决明子生品结合蒽醌含量最高；传统炒制法在180℃下炒制6min，可取得最佳效果。结论：决明子有多种炮制方法，对其中蒽醌类成分含量有不同的影响。

【关键词】炮制；决明子；微波法；清炒法；蒽醌类含量

【中图分类号】R284.2【文献标志码】A【文章编号】1007-8517（2015）20-0005-02

决明子又叫草决明、马蹄决明，其性微寒，味苦、甘、咸，具有清肝明目、利水通便的功效[1]。研究发现，决明子中含有大黄素、大黄酚等蒽醌类衍生物，具有降脂降压、保肝、调节脂肪代谢的作用[2]。蒽醌类在止血、泻下、抗菌、利尿等方面颇具优势，而决明子炮制法方法较多，如炒制、醋制、酒制、微波制等，每种炮制方法都会对决明子中蒽醌类成分产生不同影响[3]。为进一步提高决明子炮制工艺，为其饮片质量评价提供科学依据，研究采用分光光度法对几种不同炮制品中蒽醌类成分的含量进行测定，现报告如下。

1仪器与材料

1.1仪器BSA623S-CW准微量天平（苏州金钻电子衡器有限公司）；紫外可见分光光度计（上海奥析科学仪器有限公司）；微波炉（广东美的微波炉制造有限公司）；烘箱（江苏高皓工业炉有限公司）；SDHS21-210电磁炉（浙江苏泊尔股份有限公司）。

1.2材料1，8-二羟基蒽醌对照品（中国药品生物制品鉴定所）；决明子药材采自浙江宁波，经鉴定为豆科植物决明的干燥成熟种子。所用试剂均为分析纯。

2方法

2.1清炒炮制分别称取A、B、C3份决明子，每份300g。A份在150℃下加热清炒12min，B份在180℃下加热清炒6min，C份在200℃下加热清炒3min。炒后粉碎，过60目筛，备用。

2.2微波炉炮制选取加热程度Ⅰ、加热时间Ⅱ、决明子在微波炉内铺设厚度Ⅲ为因素（见表1），进行L9（34）正交实验。

表1正交实验因素水平表

2.3总蒽醌的制备取3g筛过后的粉末和3g决明子生品放于索氏提取器，加100ml80%乙醇进行回流，直至提取到无色将提取液合并，定容100ml；然后从中吸取1ml滴入烧瓶，并添加20ml1mol/L盐酸溶液进行回流水解3h；以氯仿分为20、20、10、10ml依次进行回流萃取，合并氯仿萃取液，再用混合碱溶液萃取，直至蒽醌反应结束，合并碱液定容至100ml，以混合碱液为空白，测定样品中蒽醌的含量。

2.4游离蒽醌的制备从样品溶液制备项下提取液中取1ml，并将之置于蒸馏水20ml中，从“氯仿回流萃取”起即采用“2.3”中相同的方法，对各样品中游离蒽醌的含量进行检测。结合蒽醌含量=总蒽醌含量-游离蒽醌含量。

2.5测定波长取适量的样品溶液和对照品溶液，蒸干后加0.5%醋酸镁-甲醇溶液溶解并定容至10ml量瓶中，以相应试剂作空白，在400nm-800nm范围内进行波长扫描，结果最大吸收波长为493.5nm。

3结果

3.1清炒决明子对蒽醌含量的影响由表2可知，清炒品浸出物得率高于生品；清炒后总蒽醌含量无较大差异，游离蒽醌呈上升趋势，结合蒽醌下降。综合考虑下，清炒最佳方案为温度180℃，时间为6min。

表2决明子清炒后蒽醌类成分的含量

（%）

3.2微波炮制法正交试验结果分别称取300g决明子放于微波炉中加热，最终得到9个编号的样品，粉碎后同样过60目筛留以备用，经对比，实验号6组浸出物、游离蒽醌测出量最高，结合蒽醌测出量最低，可见正交实验中，采用中火、加热时间6min、决明子在微炉内铺设厚度Ⅲ为0.5cm测得的浸出物及游离蒽醌在微波炮制中检出量最高。见表3。

表3微波炮制后蒽醌类成分的含量

（%）

3.3炒制法和微波法对比清炒决明子最佳方案的浸出物得率为5.346%，低于最佳微波炮制品中最佳值5.580%；结合蒽醌含量为0.319%，高于最佳微波炮制品的0.192%；游离蒽醌含量为0.076%，低于微波炮制品的0.082%。浸出物及游离蒽醌增加意味着疗效更佳，所以微波法整体效果要高于炒制法。结合3.2的结果可知，利用微波炮制法，并将其条件设定为：中火、加热时间6min、决明子在微波炉内铺设厚度Ⅲ为0.5cm测得的浸出物及游离蒽醌检出量最高。

3.4方法学考察①线性关系考察：分别吸取2μl、4μl、6μl、8μl、10μl对照品溶液进样，对色谱图加以记录，纵坐标为峰面积，横坐标为进样量进行标准曲线绘制。②精密度试验：吸取对照品溶液10μl进样，连续进样6次，对对照品峰面积进行测定。③稳定性试验：吸取对照品溶液在0h、4h、6h、8h及12h进样10μl，对对照品峰面积进行测定。④重现性试验：取6份决明子样品（每份量为0.5g）并精密成定，跟游离蒽醌供试品溶液制备方法进行样品制备，展开测定。经检测，采用中火、加热时间6min、决明子在微波炉内铺设厚度Ⅲ为0.5cm的工艺条件，方法学考察相关系数高于0.9998，精密度试验、稳定性试验、重现性试验结果均良好。

4讨论

决明子生品较硬难以粉碎，导致有效成分的溶出有限，直接影响到药效。炒制后变得酥脆，粉碎后也增加有效成分的溶出，能够缓和其寒泻之性。研究[4]表明，不同炮制方法对其应用效果有着不同影响。研究对决明子生品、传统炒制品、微波炉炮制品三种样品进行比较，考察不同因素，如加热时间、温度等，对浸出物得率和蒽醌含量的影响[5]。研究结果发现，在浸出物得率方面，微波炮制品>清炒品>决明子生品；在结合蒽醌含量方面，决明子生品最高，其次是清炒品，微波炮制品最低；在游离蒽醌含量方面，微波炮制品最高，清炒品次之，决明子生品再次之。因决明子生品效果有限，炮制时可选择清炒法或微波法，清炒最佳工艺是在180℃下炒制6min，微波炮制法最佳工艺则是在中火条件下微波炉张加热6min，而且微波法效果要优于炒制法。实际操作中微波炮制法虽然决明子铺设厚度影响较小，但也要适中[6]，如果太厚或太薄都会影响到均匀性；而炒制过程中需勤加翻动，以防局部过热。参考文献

[1]曹群.炮制方法对决明子中蒽醌类成分含量的影响[J].西部中医药，2012，25（6）：21-22.

[2]蒋亚莉，舒志明，王建.不同炮制方法对决明子中蒽醌含量的影响[J].军事医学科学院院刊，2010，34（4）：389-391.

[3]方艳夕，毛斌斌，时维静，等.炮制方法对决明子中蒽醌和多糖含量的影响[J].宜春学院学报，2012，34（4）：102-105.

[4]王莹.决明子蒽醌类成分的含量测定方法研究及其在药代动力学中的应用[D].陕西中医学院，2013.

[5]沈云士.中药决明子蒽醌类成分含量测定的探析[J].医药前沿，2014，2（5）：379-380.

[6]刘斌，巩鸿霞，肖学凤，等.决明子化学成分及药理作用研究进展[J].药物评价研究，2010，33（4）：312-315.

（收稿日期：2015.08.06）