紫外可见分光光度法测量菊苣药材中菊苣多糖含量分析
2015-11-07胡艳
胡艳
紫外可见分光光度法测量菊苣药材中菊苣多糖含量分析
胡艳
目的 探讨紫外可见分光光度法测量菊苣药材中菊苣多糖含量。方法 采用紫外可见分光光度法测量定菊苣总糖、菊苣还原糖含量,而后分析、计算菊苣多糖含量。结果 经过测定,发现菊苣总糖、菊苣还原糖含量范围分别为:0.006-0.016mg/mL、0.06-0.11mg/mL,均能够城乡良好的线性关系。结论 紫外可见分光光度法能够比较准确、简便的测量菊苣多糖含量,从而进一步完善菊苣药材的质量标准。
紫外可见分光光度法;菊苣药材;菊苣多糖含量
菊苣药材属菊科植物,主要药用价值为:清肝利胆、健胃消脾、降血糖、抗过敏等功效,具有很好的生物活性和药用价值[1,2]。很多学者对其进行药物鉴定研究,分析菊苣中的化学成分,但是对于菊苣中的多糖成分含量测定方法的报道比较少,其成分含量与药物疗效和稳定性有密切的关系,本次研究主要分析利用紫外可见分光光度法测定多其糖含量,从而为其质量标准提供可靠的依据。
1 仪器与方法
1.1 仪器选择 分光光度计采用BECKMAN DU800紫外可见分光光度计,超声波清洗机选择北京天海双龙公司生产的CX-250型号器械;天平采用德国梅特勒公司生产的AE160型分析天平。果糖选择由中国药品生物制品所提供的批号为100231-200303;苯酚、硫酸分别采用批号为:20081120、20081002;菊苣药材选用北京化学试剂公司提供。
1.2 菊苣多糖含量测定方法 菊苣中菊苣多糖的含量=菊苣总糖含量-菊苣还原糖含量,所以这里我们首先测量菊苣总糖的含量,然后测量菊苣还原糖的含量,随后计算出菊苣总糖含量。
1.2.1 总糖含量测定 首先取果糖对照品0.1g,加水溶解,然后将其放在100mL量瓶中,摇匀;而后称取菊苣药材粗粉1g,利用脱脂棉过滤,将滤汁和滤液分离,滤渣进行重复提取1此,合并滤液后进行浓缩,将溶液移入500ml量瓶中,加水摇匀,再将溶液减压干燥成粉末状。分别选取江苏东台、山东寿光、山东淄博3个产地的菊苣药材,样品n=3,采样量=1kg,供试品溶液=9,显色分析后利用回归方程计算药材总糖含量。
1.2.2 菊苣糖含量测定 首先测定样品吸收峰的波长为510mm,再利用显色液用量测量法,将此容易加热5min,冷却室温后在510nm处测定吸光度值。然后进行线性关系考核,将不同含量的果糖分别置于试管中进行加热测量,以果糖的用量为横坐标进行标准曲线的绘制,其回归方程为为Y=1.152X-58.9(r=0.992)。进行不同溶液密度和稳定性分析,进行还原糖含量的测定,利用不同的溶液的供试品进行显色后,于510nm处测定吸光度值,利用回归方程计算还原糖含量。
1.2.3 菊苣多糖含量测定 菊苣多糖含量的测定建立在菊苣总糖和菊苣还原糖含量基础之上,根据(糖的含量=菊苣总糖含量-菊苣还原糖含量)公式计算菊苣多糖含量。
2 结果
2.1 菊苣总糖含量 菊苣药材含量测定结果,如表1所示。
表1 菊苣总糖含量测定表
2.2 菊苣药材还原糖含量分析 菊苣药材还原糖含量测定结果,如表2所示。
表2 菊苣药材还原糖含量测定表
2.3 菊苣多糖含量计算 菊苣多糖含量是菊苣总糖含量和菊苣还原糖含量之间的差值,根据以上计算可以推算出,本次实验菊苣多糖含量为53.82%。
作者单位:550025贵州省贵阳市贵州医科大学
3 讨论
菊苣药材中对菊苣糖含量的测定能够为临床治疗各种疾病提供有效的参考依据,提高菊苣药材药物应用价值。过去临床上对菊苣糖类研究比较少,本次研究主要liy9ong紫外可见分光光度法测量菊苣多糖含量[3,4]。
首先测量菊苣总糖含量,多糖成分在硫酸作用下会被水分解成单糖,然后在苯酚的作用下合成有色化合物,然后利用分光光度计测定吸光度,再根据标准工作曲线计算菊苣多糖含量。这种测定方法操作简便,稳定性好、灵敏度高,而且具有很好的重复性。在还原糖豆额测定中将生成的氨基化合物在沸水中处理,实验过程中要注意把握好显色时间、波长的选择等,这些对测定结果均有一定的影响[5]。本次实验采用的测定方法快速、简便、准确、高效。最后利用不同地区的菊苣药材进行结果测定,以便提高测定准确率。
本次试验中利用江苏东台、山东寿光、山东淄博3地的菊苣药材进行计算、分析,发现菊苣药材总糖行亮不低于50.552%,菊苣还原糖含量不低于7.496%,经计算发现菊苣多糖含量不低于43.056%。这个结果表明多糖在菊苣药材中含量较高,能够应用于药材的评价和质量控制。
[1]李爱武,佟婕,韩正洲等.紫外分光光度法测定菊苣药材总有机酸含量的研究[J].西部医学,2010,22(12):2320-2322.
[2]庄红艳,张冰,刘小青等.菊苣药材中菊苣多糖的含量测定研究[J].中成药,2011,33(1):114-117.
[3]朱海霞,石瑛张庆娜,等.3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定马铃薯还原糖含量的研究[J].中国马铃薯,2005,19(5):266-269.
[4]孙芸,刘杰,刘佳佳,等.苯酚-硫酸法测定菊盖根中总糖的含量[J].中国民族民间医药杂志,2008,17(4):12-13.
[5]周香珍.紫外-可见分光光度法及近红外光谱技术在甘草质量快速分析中的应用研究[D].北京中医药大学,2012.
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