产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

2015-10-26黄海燕

实验与检验医学 2015年5期

关键词：广谱内酰胺酶克雷伯

黄海燕

（广州市番禺区石碁人民医院检验科，广东广州511450）

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

黄海燕

（广州市番禺区石碁人民医院检验科，广东广州511450）

目的了解本院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的菌株分布及耐药特点，指导临床合理用药和控制医院感染。方法对我院2012年1月至2014年4月临床各类标本分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测和抗菌药物敏感性试验，用WHONET5.6系统分别对两种菌产酶株和非产酶株进行耐药性数据统计分析。结果216株大肠埃希菌产ESBLs118株，检出率为54.63%；85株肺炎克雷伯菌产ESBLs34株，检出率为40%，总检出率为50.5%（152/301）。ESBLs大肠埃希菌在尿液标本和普外科检出率最高，分别占33.9%和41.4%，ESBLs肺炎克雷伯菌在痰液标本和呼吸内科检出率最高，分别占70.6%和50%。产ESBLs菌株对青霉素类和一、二代头孢菌素高度耐药，对阿莫西林/克拉维酸、哌啦西林/他唑巴坦、阿米卡星耐药率较低，对亚胺培南、美罗培南100%敏感。结论本院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs普遍，且呈现多重耐药，治疗产ESBLs菌株严重感染可首选碳青霉烯类药物。

超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）；大肠埃希菌；肺炎克雷伯菌；耐药性

近年来，随着三代头孢菌素的广泛应用，产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）菌株日益增多。自1983年在德国首次发现ESBLs以来，国内众多学者对其进行了深入研究和报道，产ESBLs菌株在全国各地引起广泛感染、传播和流行，给临床治疗带来极大困难。为了解本院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药情况，指导临床合理用药和控制医院感染，现报告如下。

1　材料与方法

1.1菌株来源为我院2012年1月至2014年4月临床各类标本分离菌株，剔除同一患者同一部位重复菌株，其中大肠埃希菌216株，肺炎克雷伯菌85株。

1.2细菌鉴定药敏仪器采用ATB Expression细菌鉴定仪，鉴定试条为ID 32 E，药敏试条为ATB G-5，均为法国生物梅里埃公司生产。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603。

1.3方法对临床各类标本分离鉴定出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ATB G-5的药敏试验，对ATB专家系统提示产ESBLs菌株再进行CLSI推荐［1］的头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸确认试验确认，用WHONET5.6系统分别对两种菌产酶株和非产酶株进行耐药性分析。

2　结果

2.1ESBLs的检出率产ESBLs大肠埃希菌检出率为54.6%，产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为40.0%，总检出率为50.5%。见表1。

表1　ESBLs的检出率（%）

2.2产ESBLs菌株在各类标本和病区的检出率产ESBLs大肠埃希菌在不同标本中检出率居前三位分别为尿液（33.9%）、痰液（14.4%）、伤口分泌物（14.4%），在不同病区检出率居前三位分别为普外科（41.4%）、呼吸内科（26.3%）、重症监护病房（15.3%），产ESBLs肺炎克雷伯菌主要在痰液标本（70.6%）和呼吸内科（50%）检出最高。

2.3大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对20种抗菌药物的耐药率见表2。

3　讨论

ESBLs是由质粒介导的能水解青霉素类、头孢菌素类、单环酰胺类抗菌药物的耐药酶，其作用底物广泛，并可在菌株间转移和传播。ESBLs主要由革兰阴性杆菌产生，是肠杆菌科细菌呈现多药耐药的机制之一［2］，多见于肠杆菌科中的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，此两种菌一直是引起医院感染的重要病原菌。本结果显示ESBLs大肠埃希菌检出率为54.6%，ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为40%，与植志全［3］报道的广州三甲医院平均检出率45.7%和41.1%较接近，说明ESBLs菌株在基层医院的流行亦不容忽视。

表2　大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对20种抗菌药物的耐药率（%）

从标本和病区检出情况来看，产ESBLs大肠埃希菌在尿液居多，产ESBLs肺炎克雷伯菌在痰液标本检出最多，与相关报道［3-6］标本分布基本一致，表明ESBLs菌株主要引起呼吸道感染和泌尿道感染，提示临床医生应关注患者这些易感部位，以便及时发现，控制医院感染［7］。在普外科、呼吸内科和重症监护病房检出较多，可能与普外科病区手术等各种开放性操作较多，预防性或治疗性广谱抗菌药物应用机会较多有关，呼吸内科大多为老年患者，有基础慢性疾病，住院时间长，重症监护病房各种侵入性操作较多，如气管插管、机械通气、留置静脉管和导尿管等，有报道［8，9］研究发现，年龄≥60岁、住院时间长、侵袭性操作、使用广谱抗生素是感染产ESBLs细菌的危险因素。

由表2看出，产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对绝大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产酶株，且对磺胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类呈现多重耐药。据研究［10］，产ESBLs菌的耐药性与整合子密切相关。产ESBLs菌株对青霉素类和一、二代头孢菌素的耐药率高达100%，对三、四代头孢菌素亦有不同程度的耐药，但在临床治疗上均应视为耐药［11］。产ESBLs大肠埃希菌对阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低（5.1%～14.4%），而产ESBLs肺炎克雷伯菌对上述相同药物耐药率在29.4%～52.9%之间，耐药程度较大肠埃希菌高，可能与菌株结构不同和产酶量多少有关，提示应根据不同菌种和药敏试验选择用药。值得注意的是，两种克拉维酸酶抑制剂复方制剂中，阿莫西林/克拉维酸对产酶株有较高的敏感性，耐药率在5.1%～29.4%，与相关报道［4，5］的高耐药率（73.6%～100%）不同，替卡西林/克拉维酸耐药率在78%～97.1%，而近年来本院这两种抗菌药物只有口服剂型，并没有注射剂型，而且临床使用率并不高，这两种含相同酶抑制剂的β-内酰胺类抗菌药物的耐药率差异明显，究其原因，可能与药物本身化学结构的差异导致对酶稳定性的不同等有关。本院未检出对亚胺培南、美罗培南耐药菌株，因此碳青霉烯类可作为治疗产ESBLs菌株严重感染的首选药物。但目前耐碳青霉烯类的肠杆菌科细菌在各大医院已经出现，总耐药率≤7.0%［12］，所以应严格掌握感染指征。从耐药谱看出，产ESBLs菌株对三代头孢菌素头孢噻肟的耐药率70.6%～89.8%明显高于头孢他啶42.4%～58.8%，与谢清莲等［13］报道的耐药率接近，说明ESBLs对头孢噻肟有较高的水解活性，提示ESBLs的基因分型以CTX-M居多［14］，亦可能与本院治疗肠杆菌科细菌感染时头孢噻肟比头孢他啶应用较多有关。不同地区ESBLs基因型差异较大，即使同一地区，不同时间段基因型的分布也有变化［15］。头孢西丁作为头霉素类药物对产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药率分别为30.5%和52.9%，显著高于非产酶株，提示可能合并产AmpC酶或膜蛋白的缺失［11］。

ESBLs引起的细菌耐药可导致患者的住院时间延长，治疗费用增加，病死率升高［11］。因此，我们应加强ESBLs菌株的检测，合理使用抗菌药物，加强消毒和隔离，控制耐药菌株的流行和传播。

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