口蹄疫灭活疫苗与合成肽疫苗免疫效果对比试验

孙鲜刚

（安徽省来安县雷官镇兽医站，安徽来安　239224）

口蹄疫灭活疫苗与合成肽疫苗免疫效果对比试验

孙鲜刚

（安徽省来安县雷官镇兽医站，安徽来安239224）

使用猪O型口蹄疫高效灭活疫苗与猪O型口蹄疫合成肽疫苗免疫28～35日龄商品猪，采用正向间接血凝试验和VP1结构蛋白抗体ELISA检测免疫前和首次免疫后14 d、28 d、35 d、42 d、56 d及二次免疫后7 d、14 d、28 d抗体水平。同时，对接种疫苗的实验猪进行免疫应激观察。结果显示：注射两种疫苗试验猪未出现不良免疫副反应；采用正向间接血凝试验检测，两种疫苗免疫抗体合格率差异不显著；运用VP1结构蛋白抗体ELISA进行检测，注射合成肽疫苗试验猪二免7 d后抗体水平快速上升，抗体检测合格率达到73%～94.12%。O型口蹄疫灭活免疫抗体不适宜用此检测方法。

口蹄疫疫苗免疫效果

口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的偶蹄动物的一种急性、热性和高度接触性的传染病。世界上许多国家和地区都有该病的流行与发生，严重威胁着畜牧业的发展，造成了巨大的经济损失。国际兽疫局（OIE）于2008年1月21日将该病列入多种动物共患病，我国将该病列为一类动物传染病之首。目前，对该病我国主要采取以免疫注射为主的综合性防控措施来预防和控制猪口蹄疫。来安县猪口蹄疫防控过程主要是猪O型口蹄疫灭活疫苗和合成肽O型口蹄疫疫苗，为探明两种疫苗免疫反应情况和免疫抗体变化规律，本试验以商品猪为免疫对象，开展了口蹄疫灭活疫苗与合成肽疫苗免疫效果试验，为临床免疫提供参考。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1试验疫苗

上海某生物制品公司生产的猪O型口蹄疫灭活疫苗，上海某生物制品有限公司生产的合成肽O型口蹄疫苗，以上疫苗均为政府统一采购。

从2个猪场中选择28～35日龄仔猪40头，分成A组、B组、C组、D组，每组10头。按照疫苗说明书免疫剂量，A组、B组注射合成肽疫苗，C组、D组注射O型口蹄疫灭活疫苗。1个月后，C组、D组两组加强免疫一次，分组及免疫情况详见表1。

表1　试验动物分组与处理

1.1.3试剂

O型口蹄疫正向血凝试剂、阴阳性血清（中国农业科学院兰州兽医研究所生产）；口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒（上海优耐生物医药有限公司生产）。

1.2方法

1.2.1注苗的疫苗反应观察

各组在首次免疫后一周内，观察采食情况，每天定时对猪群体温进行测量，以观察疫苗反应情况。

1.2.2血清样品

对首次免疫前、首次免疫后14d、28d及二次免疫后7d、14d、28d、60d，每组采集全血样品，分离血清。

击鼓、击镲、敲锣者服饰相同，均头扎黄头巾、系箍。身穿黄色对襟上衣、蓝或黑色灯笼裤，腰系紫或黑色四喜带，也可系一条红绸子，脚穿白球鞋或黑圆口布鞋。

1.2.3免疫时间及剂量

28日龄首免，58日龄后加强免疫一次。免疫剂量按生产厂家推荐剂量进行，其他疫苗按常规免疫程序进行。

1.2.4检测方法

按试剂盒说明书进行（过程略）。

2　结果

2.1疫苗反应情况

2.1.1体温变化

各组免疫后一周内，猪群体温均呈现不同程度的波动，但波动范围均在猪体正常体温范围之内。使用合成肽疫苗的试验组，免疫后一周内猪群体温在38.54℃～39.86℃之间波动，使用O型口蹄灭活苗的对照组体温变化范围为38.48℃～39.76℃。体温检测结果详见表2。

表2　免疫后一周内猪体温变化情况　单位：℃

2.1.2采食量

各组免疫后3 d内采食量有所下降，第4 d恢复正常，属于正常免疫副反应。

2.1.3过敏反应

用于试验的40头仔猪，仅1头注射O型口蹄疫灭活苗的仔猪出现过敏反应，使用肾上腺激素后恢复正常。

2.2抗体检测结果

2.2.1FMD正向血凝抗体检测结果

各组在免疫前后分别做了FMD正向血凝抗体检测，结果详见表3。

表3　各组免疫后正向血凝抗体检测结果

从表3可以看出，无论是多肽苗还是灭活疫苗，免疫28 d后，免疫抗体均符合农业部要求，加强免疫较一次免疫有明显的抗体上升趋势，且维持时间较长。

2.2.2病毒VP1结构蛋白抗体检测结果

各组在免疫前后分别做了VP1结构蛋白抗体检测，结果详见表4。

表4各组FMD病毒VP1结构蛋白抗体阳性率

组别免疫前第14d第28d第35d第42d第56d A0060%60%70%50% B04.35%35%73.33%86.67%94.12% C000000 D000000

从表4可以看出，使用合成肽疫苗后的各组在免疫后第14 d时可以产生FMD病毒VP1结构蛋白抗体，并且到免疫后第56 d时仍可检测到抗体，加强免疫后的抗体阳性率明显提高。使用O型口蹄疫灭活疫苗的各组无VP1结构蛋白抗体的检出阳性。

3　讨论

（1）从免疫反应情况看，使用口蹄疫合成肽疫苗和O型口蹄疫疫苗后，均无严重的疫苗反应，临床使用副作用小，安全性性较高。

（2）从监测结果来看，使用口蹄疫 O型合成肽疫苗与O型口蹄疫灭活疫苗，均可以产生较高的正向血凝抗体，加强免疫组比较免疫一次的效果好。

（3）由于猪O型口蹄疫合成肽疫苗采用VPl中的一段多肽作为抗原，不含NS蛋白，使用口蹄疫病毒VP1结构蛋白ELISA抗体检测，免疫后第14d时即可检测到FMD病毒VP1结构蛋白抗体，而O型口蹄疫灭活疫苗则不宜用此法检测。

孙鲜刚（1967-），男，助理兽医师。