黄丹胶囊对糖尿病肾病模型大鼠的治疗作用

田涛，邓丽，王红宇

（1.中国人民解放军成都军区78491部队业务处，四川成都610017；2.中国人民解放军成都军区成都药材供应站，四川成都610017；3.中国人民解放军成都军区联勤部药检所，四川成都610017）

黄丹胶囊对糖尿病肾病模型大鼠的治疗作用

田涛1，邓丽2，王红宇3

（1.中国人民解放军成都军区78491部队业务处，四川成都610017；2.中国人民解放军成都军区成都药材供应站，四川成都610017；3.中国人民解放军成都军区联勤部药检所，四川成都610017）

目的探讨黄丹胶囊对糖尿病肾病（DN）模型大鼠血糖和肾功能的影响。方法采用高脂饲料加注射STZ法制备的DN大鼠模型，按血糖水平将模型大鼠随机分为模型组（A组），安博维组（B组），黄丹胶囊高、中、低剂量组（C1，C2，C3组）和正常对照组（D组），每组10只。D组与A组给予等量蒸馏水，均灌胃给药，连续30 d。末次给药后，收集大鼠24 h尿液并检测24 h尿蛋白定量（Upro），采血测定空腹血糖、血尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr），并取肾脏称重并计算肾脏系数。结果C1，C2，C3组肾脏系数、24 h Upro、血糖水平和BUN较A组显著降低（P<0.05）。C1及C2组24 h尿量较A组显著降低（P<0.05）。C1组24 h Upro较A组显著降低（P<0.05）。结论黄丹胶囊对DN大鼠有较好的治疗作用，黄丹胶囊能显著降低模型大鼠血糖、肾脏系数、尿量、尿蛋白、BUN及Scr水平。

黄丹胶囊；糖尿病肾病；肾功能；大鼠

糖尿病肾病（DN）是糖尿病严重的并发症，已成为影响患者寿命及生活质量的主要原因。现代医学治疗DN疗效不够理想，而中医药多靶点治疗的特点在DN的治疗上得到了充分的发挥。笔者观察了我院自制制剂黄丹胶囊对实验性DN大鼠血糖和肾功能的影响，为该药的进一步开发和利用提供可靠的试验及理论依据。现报道如下。

1　材料与方法

1.1动物、试药及仪器

清洁级雄性SD大鼠90只，体重250 g（上海斯莱克实验动物有限责任公司，合格证号为SCXK<沪>2007-0005）。均以高脂饲料配方饲养：基础饲料84.5%、蛋黄粉10%、猪油5%、胆酸钠0.5%。黄丹胶囊（自制制剂，由黄芪、丹参、白术、茯苓、山药、川芎、熟地黄、泽泻、山茱萸组方，批号为20150212）；链脲佐菌素（STZ，美国Sigma公司，批号为2014/08）；安博维（赛诺菲<杭州>制药有限公司，批号为20141102）。血糖测试盒（四川迈克科技股份有限责任公司，批号为20141027）；考马斯亮蓝试剂盒（南京建成科技有限公司，批号为20140924）；血尿素氮试剂盒（BUN，南京建成科技有限公司，批号为20150126）；肌酐试剂盒（南京建成科技有限公司，批号为20141216）。UV-2204型紫外可见分光光度计（上海普析仪器有限公司）；强生血糖仪稳豪倍易型（美国强生公司）；Olympus-2000型全自动生化分析仪（日本Olympus公司）。

1.2方法

DN模型的建立：大鼠适应性饲养1周，D组10只，其余80只大鼠均以高脂饲料配方饲养［1］：6周后，腹腔注射STZ（35mg/kg）制备的DN大鼠模型。血糖≥16.0 mmol/L，24 h尿量≥80 mL， 24 h尿蛋白定量（Upro）≥30mg视为造模成功。

分组：选择造模成功大鼠50只，按血糖水平随机分为A组，B组（30mg/kg），C1，C2，C3组（生药30，15，7.5 g/kg），D组与A组给予等量蒸馏水，灌胃给药，连续30 d。

检测指标：灌胃期间，观察各组体毛、呼吸，每周称体重，并根据体重调整给药量。末次给药后1 d，将动物放入代谢笼中，收集大鼠24 h尿量，用考马斯亮蓝G-250法检测Upro，并计算24 h Upro。心脏采血后，测定空腹血糖、血尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr）。采血后，处死大鼠，取肾脏称重并计算脏器系数。

1.3统计学处理

2　结果

结果见表1。

表1　各组大鼠观察指标比较（±s，n=10）

表1　各组大鼠观察指标比较（±s，n=10）

注：与A组比较，*P<0.05，△P<0.01。

组别A组B维C1组C2组C3组D组给药剂量30mg/kg 30 g/kg 15 g/kg 7.5 g/kg体重（g）207.02±38.81 220.23±25.87 230.39±35.44 233.79±43.24 220.23±52.31 368.52±27.43△肾脏系数（g/100 g）1.37±0.21 0.86±0.13△0.84±0.11△0.92±0.14△1.07±0.17*0.51±0.08△24 h尿量（mL）138.98±29.76 101.32±23.57△103.90±21.05△109.39±18.68*117.56±23.84 21.55±6.28△24 h Upro（mg）25.45±7.12 18.74±3.82*19.30±4.58*20.57±8.37 23.45±7.89 18.07±1.18△血糖（mmol/L）24.52±0.77 20.30±1.10△17.45±1.15△17.95±1.02△18.20±2.24△4.85±0.16△Scr（μmol/L）178.21±12.77 152.35±6.31△141.93±10.05△148.56±13.05△164.53±8.22*79.45±4.21△BUN（mmol/L）16.64±1.65 12.37±1.04△10.00±0.68△9.86±1.45△13.03±1.54△7.73±0.37△

3　讨论

DN以肾小球弥漫性硬化为临床特征，发病机制尚未完全阐明，一般认为与糖、脂代谢紊乱、肾脏局部炎症介质表达、组织损伤等因素有关。肾脏周围血管血流动力学及血液流变学发生改变，局部肾素-血管紧张素-醛固酮系统异常兴奋，引起血管活性物质的水平升高，肾小球基底膜增厚，系膜扩张，加重肾间质炎症反应，导致肾小球硬化，蛋白尿形成。

高血糖是糖尿病逐渐恶化为DN的前提，本实验采用高脂喂养6周后腹腔注射STZ 35mg/kg制备的DN大鼠模型，80%以上的造模动物成功，达到血糖≥16.0 mmol/L、24 h尿量≥80 mL，24 h Upro≥30mg的建模标准。

传统医学将DN归属于“消肾”范畴，病机以“肾气受伤”为主；病久生瘀，“血瘀”的病机贯穿于糖尿病慢性并发症的始终；“肾虚血瘀”是DN的基本病机。黄丹胶囊由黄芪、丹参、白术、茯苓、山药、川芎、熟地黄、泽泻、山茱萸组方。其中黄芪大补元气、利水消肿，功补三焦，利营卫之气，为君药；丹参功擅活血祛瘀、凉血消痈；白术健脾益气、燥湿利水；茯苓健脾渗湿、利水消肿；山药健脾胃、益肺肾、化痰涎；川芎活血化瘀；熟地黄补血滋阴，健脾益肾、气阴双补；泽泻利水、清湿热和泄热；山茱萸滋阴补肾，培元固本；全方共奏扶正固本、益气养阴、活血通络、化瘀解毒、利水益肾之功。现代药理研究表明，黄芪具有调节血糖、增强免疫、抗氧化、减少尿蛋白、保护肾脏等作用［2］；丹参具有改善血液黏度，保护心、肝、肾等作用［3］；白术具有抗衰老、免疫调节等作用［4］；茯苓具有保护胰岛β细胞降低血糖、增强免疫、抗炎等作用［5］；山药具有增加胰岛素分泌、改善受损的胰岛β细胞功能、改善胰岛素抵抗，降低血糖等作用［6］；川芎具有降低血液黏度、保护心脑细胞等作用［7］；熟地黄具有增强造血机能、镇静催眠、调节免疫等作用［8］；泽泻具有降血糖、调血脂及抗动脉粥样硬化、抗肾结石形成、抗肾炎、利尿、免疫调节等作用［9］；山茱萸具有降血糖、抑制血小板聚集、调节免疫、抗炎等作用［10］。

本试验结果显示，模型组血糖上升，肾脏系数、尿量、尿蛋白、BUN及Scr均非常显著的升高，表明模型动物的肾脏受到损伤，为典型的DN。黄丹胶囊能显著降低模型组血糖、肾脏系数、尿量、尿蛋白、BUN及Scr水平，为治疗DN提供了理论和试验和依据。

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Huangdan Capsules for Treating Diabetic Nephropathy M odel in Rats

Tian Tao1，Deng Li2，Wang Hongyu3
（1.Operation Office，78491 Troop of PLA Chengdu Military Area Command，Chengdu，Sichuan，China 610017；2.Chengdu Medicinal Plant，PLA
Chengdu Military Area Command，Chengdu Sichuan，China 610017；3.Medicine Inspecting Institute of the Joint Logistics Department，PLA Chengdu Military Area Command，Chengdu Sichuan，China 610017）

Objective To investigate the influence of Huangdan Capsules on the blood glucose and renal function of diabetic nephropathy（DN）model rats.M ethods Using high fat feed plus STZ injection prepared DN rat model，the rats were random ly divided into groups according to the blood glucose levels：model group（group A），Aprovel group（group B），high，medium and low dose groups of Huangdan Capsules（group C1，C2，C3），and normal control group（group D），10 rats in each group.Group D and group A were given the same amount of distilled water，all gavaged for 30 d.After the last administration，the 24 h urine of rats were collected and the urine protein concentration was detected；the fasting blood glucose，blood urea nitrogen（BUN）and serum creatinine（Scr）were tested by the blood sampling；the kidney was weighted to calculate the viscera coefficient.Results The kidney coefficient index，24 h Upro，blood glucose and BUN levels of group C1，C2，C3were significantly lower than group A（P<0.05）.The 24 h urine volumes of group C1and C2were significantly reduced compared with group A（P<0.05）.The 24 h Upro of group C1was significantly reduced compared with group A（P<0.05）.Conclusion Huangdan Capsule has good therapeutic effect on diabetic nephropathy rats，can significantly reduce the levels of blood glucose，kidney coefficient index，urine volume，Upro，BUN and Src.

Huangdan Capsules；diabetic nephropathy；renal function；rats

R285.5；R286

A

1006-4931（2015）24-0122-02

2015-05-13）