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刺五加注射液大分子物质的研究

2015-10-21李刚王艳梅

健康之路(医药研究) 2015年2期
关键词:分子量胸腺肽凝胶

李刚 王艳梅

【摘要】目的:确定刺五加注射液所含物质的分子量范围。方法:采用高效液相凝胶色谱法,分别用细胞色素(分子量13000)、胸腺肽(分子量为3108)和人胰岛素(分子量5805)标准品作为对照,确定刺五加注射液所含物质的分子量范围。结果:刺五加注射液中各成分分子量均小于3108。

【关键词】刺五加注射液分子量范围细胞色素胸腺肽人胰岛素

【中图分类号】R-0 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801(2015)02-0327-01

刺五加注射液是由五加科植物刺五加提取加工精制而成的灭菌水溶液,具有平补肝肾、益精壮骨的作用。临床上主要用于治疗各种心脑血管疾病。刺五加注射液质量标准被《卫生部药品标准收载》。刺五加成分复杂,主要含有刺五加皂苷、黄酮苷类、异嗪皮啶及其苷类、丁香苷及多糖等。本文根据物质成分由于分子量大小的不同,在凝胶色谱柱中的行为不同,分子量小的物质,会进入色谱柱空隙中,分子量大的无法进入空隙,所以在洗脱过程中,分子量大的物质行程短,较分子量小的成分先出峰的原理,采用高效液相色谱法,用不同分子量的标准品做对照,根据不同成分的洗脱时间,确定刺五加注射液所含成分的分子量范围。

1仪器和试药

1.1 仪器安捷伦1100液相色谱仪型号凝胶色谱柱(TSK GEL2000SWx17.8mm×300mm,5μm) XX紫外检测器

1.2 试药乙腈色譜纯,三氟醋酸为分析纯。对照品:细胞色素C,分子量13000;胸腺肽,分子量3108;人胰岛素,分子量5805。

2 方法与结果

2.1大分子物质的确定

照高效液相色谱法(《中国药典》2010版二部附录V D)测定。

2.1.1色谱条件及系统适用性用凝胶色谱柱(TSK GEL2000SWx17.8mm×300mm,5μm;以三氟醋酸-乙腈-水(0.05:10:90)为流动相;检测波长214nm。理论板数按细胞色素C计算应不低于2000.

2.1.2对照品溶液制备取细胞色素C(分子量为13000)适量,加流动相制成每1ml中约含1mg的溶液,作为对照品溶液。

2.1.3供试品取刺五加注射液三批。

2.1.4测定法取对照品溶液与供试品溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。

2.1.5结果对照色谱图中各成分的保留时间,检验结果见下表。

2.2分子量范围的确定

2.2.1色谱条件及系统适用性用凝胶色谱柱(TSK GEL2000SWx17.8mm×300mm,5μm);以三氟醋酸-乙腈-水(0.05:10:90)为流动相;流速为每分钟0.5ml;检测波长214nm。

2.2.2对照品溶液制备取胸腺肽(分子量为3108)和人胰岛素(分子量5805)适量,分别加流动相制成每1ml中约含1mg的溶液,作为对照品溶液。

2.2.3供试品取刺五加注射液三批。

2.2.4测定法分取对照品溶液与供试品溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。

2.2.5结果对照色谱图中各成分的保留时间,检测结果记录于下表

3 结果分析

通过在相同的试验条件下对照色谱图中各成分的保留时间分析,可以知道分子量的相对大小。

实验方法1表明,检测三批刺五加注射液样品各成分峰的保留时间均大于细胞色素C的保留时间,可以认为三批刺五加注射液中成分的分子量都小于细胞色素C的分子量。

实验方法2表明,检测三批刺五加注射液样品所有成分峰的保留时间都大于人胰岛素、胸腺肽的保留时间,可以认为三批刺五加注射液中主要成分的分子量都小于人胰岛素、胸腺肽的分子量。

4 结论

刺五加注射液中成分分子量均小于13000,不含有大分子物质;人胰岛素分子量为5808、胸腺肽分子量为3108,确认刺五加注射液中各成分分子量均小于3108。

参考文献:

[1]《中华人民共和国药典》2010版一部

[2]《中华人民共和国药典》2010版二部

[3]《卫生部药品标准》

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