阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者T淋巴细胞亚群 CRP及IMT变化

曹达魁　姚扬伟★　王海琴

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者T淋巴细胞亚群 CRP及IMT变化

曹达魁姚扬伟★王海琴

目的 检测阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者血清T淋巴细胞亚群、C反应蛋白（CRP）及颈动脉内膜中层厚度（IMT）变化，旨在探讨OSAHS发病机制。方法 观察对象分为正常对照组和轻、中、重度OSAHS组，根据多导睡眠仪检测结果抽取观察对象进入相应观察组，每组各15例，ELIAS法检测CRP、流式细胞仪测定淋巴细胞亚群、超声测定IMT，对比各组相关数据变化情况，并分析各组数据之间的相关性，并对部分OSAHS患者进行持续正压通气（CPAP）治疗了解各数据变化情况。结果 OSAHS患者CD4+T细胞比例较正常对照组水平低，CD8+T细胞比例、CRP及IMT较正常对照组水平高，伴随OSAHS严重程度加重，CD4+T细胞比例下降，CD8+T细胞比例、CRP及IMT上升，各组数据比较具有明显差异性（P均＜0.05）。CD4+T细胞比例与OSAHS严重程度呈负相关（r=-0.924，P＜0.01），CD8+T细胞比例、CRP及IMT与OSAHS严重程度呈正相关（r值分别为0.930、0.948、0.569，P均＜0.01）。经CPAP治疗前后IMT轻中重度三组均无明显变化，轻度组OSAHS患者T淋巴细胞亚群、CRP治疗前后无明显变化，中重度组OSAHS患者经治疗后CD4+T细胞比例上升，CD8+T细胞比例及CRP下降。结论 免疫细胞特别是T淋巴细胞及炎症反应参与了OSAHS发生发展过程，并且随疾病进展，可导致心血管疾病发生率增加，CPAP可作为OSAHS患者临床有效治疗手段之一，并可相应增加提高免疫力及抗炎方面治疗手段。

T淋巴细胞 C反应蛋白 颈动脉内膜中层厚度

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）是指在每晚睡眠过程中，呼吸暂停反复发作＞30次或睡眠呼吸暂停低通气指数（AHI）≥5次/h，并伴有嗜睡等临床症状。OSAHS病具体病因尚不明确，目前有关炎症因子在OSAHS发病机制中的作用备受关注［1］。C反应蛋白（CRP）是一项重要的炎症标志物，可预测心血管疾病的危险度［2］。颈动脉内膜中层厚度（IMT）的增加是早期动脉硬化的标志，且与心血管危险因素显著相关［3］。本资料通过检测OSAHS患者及健康人群T淋巴细胞亚群、CRP及IMT变化情况及其与OSAHS严重程度相关性，以期提高对OSAHS临床认识，为进一步认识和更好防治OSAHS提供理论依据。

1　临床资料

1.1一般资料 经多导睡眠仪监测诊断为OSAHS的45例患者，其中男38例，女7例；平均年龄（43.63±13.48）岁。根据AHI将OSAHS组进一步分为轻度组（5次/h≤AHI＜20次/h）15例，中度组（20次/h≤AHI＜40次/h）15例，重度组（AHI≥40次/ h）15例，对OSAHS组中19例（轻度6例、中度7例、重度6例）进行无创持续正压通气治疗（CPAP）3个月。正常对照组15例，男13例，女2例；平均年龄（44.12±10.84）岁。入选标准：同期临床不符合OSAHS且经多导睡眠仪检查AHI＜5次/h；年龄、体质指数及吸烟情况与OSAHS组相匹配。两组均排除高血压病、冠心病、心力衰竭、糖尿病、急性感染、创伤、手术者，无全身性疾病如恶性肿瘤者，无长期服用非甾体抗炎药及抗凝药病史者。

1.2观察指标 （1）多导睡眠监测：所有受试者当日禁止饮酒、咖啡、浓茶，禁服用镇静及影响睡眠药物。采用美国Embla多导睡眠监测仪进行整夜多导睡眠图监测，记录时间＞7h，内容包括胸口鼻气流、胸式呼吸、腹式呼吸、动脉血氧饱和度、脑电图、心电图、眼电图、体位活动等。OSAHS诊断标准参考2002年中华医学会呼吸病学分会睡眠呼吸疾病学组的《阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊治指南草案》［4］。（2）IMT测定：由本院SIEMENS最新的SEQUOIA512彩色多普勒超声诊断仪完成，患者仰卧位，平静休息5min后进行，分别测量各组患者颈动脉膨大处、近端1cm及远端1cm处IMT，测量3次取其平均值计数。（3）炎症指标及淋巴细胞亚群测定：入院后第2天清晨空腹采取肘静脉血5ml，血清CRP由本院西门子Dimension RXLmax全自动生化分析仪完成，T淋巴细胞亚群测定由本院美国Beckman公司EPICS-XL4型流式细胞分析仪完成。（4）统计分析：OSAHS组治疗3个月后T淋巴细胞亚群、CRP及IMT治疗前后数据变化情况。

1.3统计学方法 采用SPSS18.0统计软件。计量资料以（x±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，如方差不齐采用多组间Kruskal-Wallis H法的非参数检验；两变量相关分析采用Pearson相关系数及直线相关分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1四组CD4+T细胞比例、CD8+T细胞比例、CRP及IMT之间比较 见表1。

表1　四组CD4+T、CD8+T、CRP及IMT结果比较（x±s）

2.2CD4+T细胞比例、CD8+T细胞比例、CRP及IMT与OSAHS组别相关性分析 相关性分析显示，CD4+T细胞比例与OSAHS严重程度呈负相关（r=-0.924，P＜0.01）。CD8+T细胞比例、CRP及IMT与OSAHS严重程度呈正相关（r值分别为0.930、0.948、0.569，P均＜0.01）。

2.3部分OSAHS组患者经CPAP治疗前后CD4+T细胞比例、CD8+T细胞比例、CRP及IMT变化情况 见表2。

表2　OSASH患者经CPAP治疗前后CD4+T、CD8+T、CRP及IMT变化情况（x±s）

3　讨论

T淋巴细胞是机体免疫系统功能最重要的一群细胞，由CD4+T细胞和CD8+T细胞两个亚群组成。Kreger［5］等研究证实OSAHS患者免疫细胞及免疫功能有异常，T淋巴细胞的数量以及CD4+T/CD8+T的比值均有改变，CD4+T细胞较正常减少，而CD8+T细胞高于正常，表明OSAHS患者免疫功能降低。本资料结果显示OSAHS患者CD4+T细胞比例较正常对照组下降，且CD4+T细胞比例与OSAHS严重程度成反比；而CD8+T细胞比例较正常对照组上升，CD8+T细胞比例与OSAHS严重程度成正比，差异具有统计学意义（P＜0.05），表明OSAHS患者机体免疫功能下降，且下降程度与病情严重程度呈正比。

本资料显示经CPAP治疗后，中重度OSAHS患者CD4+T淋巴细胞比例上升，CD8+T淋巴细胞比例下降，说明经CPAP治疗后淋巴细胞的失衡状态得到缓解，因此CPAP治疗可防治OSAHS患者启动免疫反应。免疫细胞特别是T淋巴细胞已参与OSAHS的发生发展过程，但具体OSAHS患者的睡眠结构紊乱、慢性炎症感染、局部损伤等因素与T淋巴细胞免疫功能降低的关系则需进一步有待研究。

炎症在OSAHS及其并发症的发生中起重要作用，CRP是炎症过程中的重要标志，主要在肝脏合成和分泌，正常情况下CRP以微量形式存在于健康人血清中，CRP升高反映了机体的炎症状态。本资料结果显示OSAHS患者血清CRP水平显著高于健康对照人群，血清CRP的水平与OSAHS的严重程度呈正相关，提示OSAHS严重程度加重，机体伴随炎症反应水平增加。有研究报道OSAHS患者CRP升高与反复的血氧不足和睡眠障碍引起的组织炎症有关［6］。考虑OSAHS存在一个慢性炎症过程，这个过程可能增加口咽部吸气肌的功能障碍，从而增加上气道狭窄，使其塌陷，加重睡眠中呼吸暂停的次数和持续时间［7］，而且OSAHS患者夜间睡眠时反复发生呼吸暂停、间断缺氧有关，通过缺血再灌注损伤引起氧自由基产生，导致氧化应激，局部和全身炎症反应增强，从而促使机体CRP水平升高。本资料结果提示经CPAP治疗后，中重度OSAHS患者CRP下降，治疗前后结果有显著性差异。

CRP不仅是全身炎症的一个重要标志，而且还是动脉粥样硬化进程中的危险标志，并且是一个动脉粥样硬化的致病因素［8］。动脉粥样硬化是多种心脑血管疾病发生发展的病理学基础，IMT是动脉粥样硬化的早期表现，并且与全身动脉粥样硬化严重程度平行。IMT是能够反映早期动脉粥样硬化的良好无创性指标［9］，能预测心脑血管事件发生。流行病学证实OSAHS是高血压、冠心病、肺心病和脑卒中等心脑血管疾病的独立危险因素［10］。国外研究报道OSAHS严重程度与IMT增厚有关［11］。本资料结果提示OSAHS患者IMT增厚，且IMT厚度与OSAHS严重程度呈正相关，与上述报道结果一致。原因考虑OSAHS患者睡眠中由于反复上气道阻塞，出现间断缺氧和再氧合，这种缺氧/再氧合类似于缺血/再灌注过程会产生过多的活性氧，从而引起机体氧化应激状态，而氧化应激是导致血管内皮功能损伤的重要因素之一，血管内皮功能损伤使血管内膜平滑肌细胞增殖和组织损伤，由此引起一系列细胞因子的释放，这些细胞因子释放的瀑布效应触发动脉粥样硬化的形成，同时也是动脉粥样硬化的始动因素。

总之，免疫细胞特别是T淋巴细胞及炎症反应参与了OSAHS发生发展过程，并且随疾病进展，可导致心血管疾病发生率增加。临床治疗OSAHS过程中，CPAP可作为有效治疗手段之一，并且可相应增加提高免疫力及抗炎方面治疗手段。本项目不足之处在于所选病例持续正压通气治疗及结果未长期随访，可进一步行抗炎治疗并观察结果变化。研究样本有限，涉及范围局限（细胞免疫其他项目及细胞因子），需多中心、多范围、大样本研究。

1 Ye J， Liu H， Li Y，et al. Increased serum levels of C-reactive protein and matrix metalloproteinase-9 in obstructive sleep apnea syndrome. Chin Med J，2007，120（17），1482～1486.

2 Yokoe T， Minoguchi K， Matsuo H ，et al. Elevated levels of C-reactive protein and interleukin-6 in patients with obstructive sleep apnea syndrome are decreased by nasal continuous positive airway pressure.Cir culation，2003，107（8）：1129～1134.

3 Pipitone S， Corrado E， Muratori I， et al. Extra coronary atherosclerosis in patients with chronic ischemic heart disease：relationship with risk factors and the severity of coronary artery disease. International Angiology，2007，26（4）：346～353.

4 中华医学会呼吸病学分会睡眠呼吸病学组.阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊治指南（草案）.中华结核和呼吸杂志，2002，25（4）：195～198.

5 Kreger J，Laks L，Wilcox I，et al .Atrial natriuretic peptide release during sleep in patients with obstructive sleep apnea before and during treatment with nasal continuous positive airway pressure. Clin Sci，1999，77（4）：407～411.

6 Sharma SK，Mishra HK， Shrama H， et al. Obesity and not obstructive sleep apnea is responsible for increased serum hs-CRP levels in patients with sleep-disordered breathing in Delhi.Sleep Med， 2008，9（2）：149～156.

7 Hatipoglu U，Rubinstein I.Inflammation and obstructive sleep apnea syndrome pathogenesis，a working hypothesis. Respiration，2003，70（6）：665～671.

8 Libby P，Ridker PM，Maseri A.Inflammation and atherosclerosis. Circulation， 2002，105（9）：1135～1143.

9 Ghiadoni L，Taddei S，Virdis A，et al. Endothelial function and common carotid artery wall thickening in patients with essential hypertension .Hypertension，1998，32（1）：25～32.

10 McNicholas WT， Bonsigore MR. Sleep apnea as an independent risk factor for cardiovascular disease： current evidence ，basic mechanisms and research priorities.Eur Respir J，2007，29（1）：156～178.

11 Drager LF， Bortolotto LA， Maki-Nunes C， et al. The incremental role of obstructive sleep apnea on markers of atherosclerosis in patients with metabolic syndrome . Atherosclerosis，2010，208（2）：334.

Objective To detect changes in T-lymphocyte subsets，C-reactive protein and intima-media thickness in patients with obstructive sleep apnea hypopnea syndrome，to investigate the pathogenesis of OSAHS. Methods Study subjects were divided into normal control group and mild，moderate and severe OSAHS group，observed objects drawn into the corresponding research groups of 15 cases according to polysomnography test Results，detect CRP by the method of ELIAS，lymphocyte subpopulations by fl ow cytometry，IMT measurement with ultrasound，compare the related data changes of each group，and analyze the correlation between each set of data while treat part of OSAHS patients with continuous positive airway pressure（continuous positive airway pressure，CPAP）to understand the data changes. Results The percentage of CD4+T cells decreased while the percentage of CD8+ T cells、CRP and IMT increased with OSAHS patients in comparison with the control group，moreover，these changes became more signifi cant with the development of OSAHS（P＜0.05）. The percentage of CD4+T cells was correlated negatively with the development of OSAHS（r=-0.924，P＜0.01）. The percentage of CD8+T cells、CRP and IMT were correlated positively with the development of OSAHS（r=0.930、0.948、0.569，P＜0.01）. IMT mild，moderate and severe three groups did not change significantly after treatment by CPAP，and no significant changes in the T lymphocyte subsets and CRP of patients with mild OSAHS group after treatment. The percentage of CD4+T cells increased while the percentage of CD8+T cells、CRP decreased in the moderate and severe group. Conclusions Immune cells，particularly T lymphocytes，and infl ammatory involved in the development and progression of OSAHS，and with the development of OSAHS，They could increase the incidence of cardiovascular disease. It's an effective clinical treatment to the patients with OSAHS by CPAP，So we can improve immunity and anti-infl ammatory in the clinical treatment of OSAHS.

T-lymphocyte CRP IMT

314000 浙江省嘉兴市第二医院呼吸科