芦笋皮中黄酮类化物丙酮提取方法研究

2015-10-16邹春文

福建轻纺 2015年9期

关键词：皮中水浴锅芦笋

邹春文

（福建省连城县农业局，福建龙岩 364000）

芦笋皮中黄酮类化物丙酮提取方法研究

邹春文

（福建省连城县农业局，福建龙岩 364000）

通过正交试验设计,探讨了丙酮提取法对芦笋皮中黄酮类物质提取量的影响,实验结果表明：试验中对芦笋皮中黄酮类化合物提取率的影响依料液比和提取温度、提取时间、提取溶剂浓度的不同提取2次而改变。其中料液比具有较大的影响，提取的温度和提取溶剂浓度具有同等的影响，而提取的时间影响不大。结果表明，料液比1：40，提取温度50℃，提取2h，提取溶液浓度60%，提取率最佳。

芦笋皮；黄酮类化合物；提取

芦笋（Aspanagus officinalls linn）学名石刁柏，系百合科天门冬属宿根性草本植物，是一种食药两用的保健食品，它不仅对全身倦怠、食欲不振、心悸、心力衰竭、糖尿病、结石症及膀胱炎等多种病症有一定的治疗效果，而且具有抗肿瘤、抗衰老、耐疲劳、耐缺氧、降血脂、升白细胞、保肝解毒及免疫调节的作用。而芦笋皮中的黄酮类化合物是一类低分子天然植物成分，具有消炎、消肿、降压、降血脂、以及清除自由基等多种重要的生物活性，是植物经过光合作用产生的一大类化合物，是以黄酮（2—苯基色原酮）为母核的一类黄色素，其中包括黄酮的同分异构体（异黄酮）及其原产物（黄烷酮）。许多黄酮类物质已在食品、药品、化妆品等产品中得到应用，但目前尚未见以芦笋皮为原料提取天然黄酮类物质的报道。

文章以芦笋皮为原料，从绿色保健以及经济价值等方面考虑，以正交试验设计的方法考察了提取条件对黄酮类物质提取率的影响，旨在为天然黄酮类物质的最优提取工艺条件提供一些有益的参数。

1 材料与方法

1.1 仪器和设备

高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）；100目标准分样筛；A型电子天平（常熟市百灵天平仪器有限公司）；电热恒温水浴锅（上海跃进医疗器械厂）；SHB—Ⅲ循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；80-2离心机（上海浦东物理光学仪器厂）。

1.2 材料和试剂

芦笋原料（漳州市农贸市场）；实验所用试剂均为分析纯试剂：丙酮、95%乙醇（汕头市达濠精细化学品公司），Al(NO3)3（广东西陇化工厂），NaOH（浙江省温州市精细化工公司）。实验用水由蒸馏水经纯化器纯化所得。

40%(60%、80%)丙酮溶液；5%NaNO2溶液；10%Al(NO3)3溶液；4%NaOH溶液；30%乙醇溶液。

1.3 实验流程

芦笋皮干燥样→粉碎→过筛→浸提（依条件）→抽滤→定容→离心→取2ml上清液→加1ml5%NaNO2→静置6min加1ml10%Al(NO3)3→静置6min加10ml5%NaOH再用30%乙醇定容至25ml→静置10min后于510nm处测吸光度

1.4 实验方法

取干燥粉碎后已过100目筛的芦笋皮粉末0.5000±0.0002g置于比色管中，根据不同浸提条件提取，再用循环水式多用真空泵抽滤，取其滤液于50ml容量瓶中定容，摇均。再取出部分于离心管中在离心机3000转10min离心。取其上清夜2ml于比色管中，加入1ml5%NaNO2静置6min，加1ml10%Al(NO3)3再静置6min，之后加入10ml5%NaOH再用30%乙醇定容至25ml，置10min后于510nm处测吸光度，得出结果。

2 结果与讨论

2.1 适当浸提条件的确定

2.1.1 料液比的确定

根据料液比1：10、1：20、1：30、1：40的量加入100%丙酮混均，于40℃恒温水浴锅中1h浸提，结果于510nm处测吸光度，同时做2份平行样，所得数据如表1，实验表明料液比1：40的吸光度最高。

表1 不同料液比的吸光度情况

2.1.2 温度的确定

根据料液比1：40的量加入100%丙酮，分别于40℃和20℃的恒温水浴锅中1h浸提，结果于510nm处测吸光度，同时做2份平行样，所得数据如表2，实验表明40℃条件下的吸光度最高。

表2 不同温度的吸光度情况

2.1.3 时间的确定

根据料液比1：40的量加入100%丙酮，于40℃的恒温水浴锅中静置30、60、90、120min浸提，结果于510nm处测吸光度，同时做2份平行样，所得数据如表3, 实验表明90min条件下的吸光度最高。

表3 不同时间的吸光度情况

2.1.4 丙酮浓度的确定

根据料液比1：40的量分别加入浓度为40%、60%、80%、100%丙酮混均，于40℃的恒温水浴锅中静置90min浸提，结果于510nm处测吸光度，同时做2份平行样，所得数据如表4，实验表明100%丙酮溶液中吸光度最高。

表4 不同溶剂浓度的吸光度情况

2.2 正交实验

为了进一步优化丙酮提取芦笋中黄酮类化合物的实验条件，按 L934正交表安排实验，影响因素为料液比、浸提温度、浸提时间和浸提溶液丙酮浓度如表5。

表5 正交实验因素水平表

相同实验条件同一批次，同一批次平行处理2份样品，以测得的吸光度值为指标，实验结果经过统计学分析，结果如表6。其中k1j、k2j和k3j分别为每个因素中水平1、水平2和水平3的吸光度之和；R为k1j、k2j和k3j中每个因素中最大值与最小值之差。根据各因素中k1j、k2j和k3j的大小来确定它们的最优水平，根据R的大小来确定因素的主次。

3 结论

通过实验所获得的数据在表6中可得知，芦笋皮中用丙酮提取法提取黄酮类化合物的较优水平为A2即料液比为1：40；由于温度B中k1j和k3j所得结果相等,但根据B1与B3各自的吸光度相对来说B3＞B1,因此初步确定B中的较优水平为B3，而由于结果也受料液比、浸提时间、浸提溶液丙酮浓度的影响，所以在温度较优水平的确定上有袋进一步的研究。时间的较优水平选择上虽k2j和k3j相等，但根据生产效率方面考虑，最好时间越短越好，因此时间的较优水平为C2；丙酮浓度的较优水平为D1，在成本上损失的也小。整个方案的较优水平为A2B3C2D1。

所得结果对进一步改进丙酮提取法的浸提条件以提高芦笋皮中黄酮类化合物的提取率具有一定的参考价值。