三种小鼠实验性高脂血症模型效果的比较分析

哈建利 张明军 夏涛

摘 要 目的：筛选出一种理想的小鼠高脂血症动物模型造模方法。方法：参考相关文献选取三种小鼠高脂血症动物模型配方并略作调整，制成乳剂给小鼠灌胃，分别在2w、4w、6w时取尾静脉血，测定血清中TG、TC、LDL和HDL含量。结果：三种高脂配方均可不同程度地导致小鼠血清中脂代谢紊乱，形成高血脂动物模型。结论：在20%三磷酸甘油酯和10%胆固醇的基础上加入3%胆酸钠，灌胃4w就可形成理想的小鼠高脂血症动物模型。

关键词 高脂血症 小鼠 模型 分析

中图分类号：R589   文献标识码：A   DOI：10.16400/j.cnki.kjdkz.2015.09.078

Comparative Analysis of Three Experimental Rats Hyperlipidemia Models

HA Jianli[1]， ZHANG Mingjun[1]， XIA Tao[2]

（[1]Nursing School， Hubei Polytechnic Institute， Xiaogan， Hubei 432000;

[2]Teaching & Research Section of Environmental Hygiene，

Tongji Medical School， Huazhong University of Science & Technology， Wuhan， Hubei 430030）

Abstract Objective： To choose an ideally modeling method of rats hyperlipidemia model. Methods： By referring to relevant documents， choose three experimental rats hyperlipidemia models， make into emulsions to perfuse rats' stomachs， and sample tail vein blood after 2 weeks， 4 weeks and 6 weeks separately， to measure TG， TC， LDL and HDL contents in blood serum. Results： The three models result in rat lipid metabolic disorder in different degrees， to form hyperlipidemia models. Conclusions： By adding 3% sodium cholate liquor into 20% triglycerol phosphate and 10% cholesterol， perfuse rats' stomachs for 4 weeks to form an ideal rats hyperlipidemia model.

Key words Hyperlipidemia; rat; model; analysis

随着我国经济的不断发展，人们生活水平不断提高，高脂血症（hyperlipidemia）的发病率在我国已呈逐年上升趋势。高脂血症是机体脂代谢紊乱的重要标志，也是动脉粥样硬化、心脏病、脑血管意外和脂肪肝的主要危害因素之一，①主要表现为血清中甘油三酯（triglyceride，TG）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）含量增高和高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）含量降低。目前寻找安全高效的降血脂药物已成为广大医药卫生工作者研究的热点之一，而实验动物模型是进行上述研究的必备材料。为筛选出效果理想的高脂血症动物模型造模方法，在前人研究②③④⑤的基础上，本研究拟用三种不同方法对小鼠进行高脂血症造模，观察不同时间小鼠血脂的变化情况，以期筛选出一种既经济稳定又省时省力的高脂血症小鼠动物模型的造模方法，为后续研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器

三磷酸甘油酯、胆固醇、胆酸钠均为国产试剂（分析纯）;甘油三酯、胆固醇和高密度脂蛋白试剂盒由中生北控生物试剂公司提供;AUl000 全自动生化分析仪为OLYMPUS 公司产品。

1.2 实验动物

昆明种小鼠40只（湖北省实验动物中心提供），雌雄各半，体重20～25g。

1.3 高脂饲料配方与制备

配方1： 20%三磷酸甘油酯+ 10%胆固醇;配方2：20%三磷酸甘油酯+10%胆固醇+1%胆酸钠;配方3：20%三磷酸甘油酯+ 10%胆固醇+3%胆酸钠。分别按上述配方、比例称取相应的高脂试剂，用约50ml的热生理盐水搅拌成悬浊液，并定容至100ml备用。

1.4 动物模型制备

随机将动物分为4组，分别为对照组、模型1组、模型2组和模型3组。对照组用生理盐水灌胃，模型1、2、3组分别对应用配方1、配方2和配方3高脂饲料灌胃。各组小鼠均以0.4ml溶液灌胃，每天1次。所有小鼠均自由摄食与饮水，分别于灌胃2周、4周和6周后取尾静脉血，测定其血清中TG、TC、LDL和HDL含量。

1.5 统计学处理

数据均以 眘 形式表示，用SPSS18.0统计软件进行单因素方差分析（one-way-ANOVA），组间比较用LSD法。

2 结果

2.1 2周后小鼠血清中各指标变化

与对照组相比，模型1组中LDL含量明显升高（P<0.05），模型2组TC和LDL含量明显升高（P<0.01）;模型3组中TG、TC和LDL含量明显升高（P<0.05或P<0.01）;各模型组中HDL含量与对照组差异无统计学意义（P>0.05）;模型2、3组中TC含量明显高于模型1組（P<0.05），结果见表1。

2.2 4周后小鼠血清中各指标变化

从表2可以看出，与对照组相比，模型1组中LDL含量明显升高（P<0.05），模型2组中TG、TC和LDL含量明显升高（P<0.05或P<0.01），而模型3组不仅TG、TC和LDL含量明显升高（P<0.05或P<0.01），而且HDL水平则明显下降（P<0.05）;同时模型2、3组中TC含量明显高于模型1组（P<0.01）。

2.3 6周后小鼠血清中各指标变化

与对照组相比，模型1组中TG、TC和LDL含量明显升高（P<0.05或P<0.01）;模型2组中TG、TC和LDL含量也明显高于对照组（P<0.01）;而模型3组不仅TG、TC和LDL含量明显高于对照组（P<0.01），而且其HDL水平则明显低于其他三组（P<0.05或P<0.01），具体结果见表3。

3 讨论

高血脂症动物模型主要来源于先天性、转基因和化学物质诱导三个方面。前两种获取方式因其来源极为有限或价格过于昂贵，故其应用大为受限，而通过化学物质诱导获得的实验动物模型目前在国内被广泛采用。⑥

本研究结果显示，模型1组小鼠灌胃2w后仅LDL水平升高，模型2组TC和LDL水平明显升高;而模型3组则是TG、TC和LDL三项指标的水平明显升高;4w后模型1组依然是仅LDL水平升高，而模型2、3组则是TG、TC和LDL三项指标的水平进一步升高，同时模型3组的HDL水平明显下降;随着灌胃时间继续延长至6w，各模型组的TG、TC和LDL的水平逐渐升高，但除模型3组的HDL水平明显降低外，其余2个模型组的HDL水平未见明显降低（P>0.05）。本实验还发现，在实验小鼠灌胃2、4W后，模型2、3组的TC含量上升较快，不仅高于对照组，而且还明显高于模型1组;而灌胃6w后，模型3组的HDL水平下降明显，已达到明显低于模型1、2组的水平。综合来看，模型1、2、3组均出现脂代谢紊乱，能形成高脂血症，但从4项评价指标是否出现明显变化及其变化幅度来看，模型3组优于另外2个模型组，这可能与适量的胆酸钠能有效促进实验动物吸收甘油三脂和胆固醇，并迅速形成稳定的高脂血症模型有关。⑦

此外，通过对模型3组灌胃2、4、6w后各指标的变化幅度进行比较，发现2w即能形成高脂血症模型，但HDL这项指标未见明显下降;而4w后各项指标均继续升高或降低，其中HDL含量已明显低于对照组（P<0.05）;随着灌胃时间继续延长至6w，4项指标的变化幅度与第4w相比已无显现变化，提示按配方3给小鼠灌胃4w即可获得比较稳定的高脂血症动物模型。

基金项目：湖北职业技术学院重点项目“魔芋发酵液对实验性高脂血症小鼠血脂的影响”（项目编号：2008 A13）的阶段性研究成果之一

注释

① 徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学（第3版）[M].北京：人民卫生出版社，2001：1201-1206.

② 赵水平，吴洁.非诺贝特对高脂血症兔血清及脂肪细胞分泌肿瘤坏死因子a的影响[J].中国药理学通报，2005.21（2）：157-161.

③ 倪鸿昌，李俊，金涌，等.小鼠实验性高脂血症和高脂血症性脂肪肝模型研究[J].中国药理学通报，2004.20（6）：703-706.

④ 张秋华，孙文静.益气活血方对小鼠的调脂作用与NO水平的影响[J].中国实验方剂学杂志，2003.9（1）：19-21.

⑤ 王志勇，王玲，潘振伟，等.胺碘酮对大鼠心肌梗死后重构心肌细胞钾电流的作用[J].中国药理学通报，2005.21（12）：1451-1454.

⑥ 张东，武海军，陈士萍，等.大鼠实验性高脂血症五种造模方法的比较[J].中国药理学通报，2007.23（9）：1254-1256.

⑦ 张智，闪增郁，向丽华，等.大鼠实验性高脂血症两种造模方法的比较[J].中国中医基础医学杂志，2004.10（2）：33-34，24.