奶牛隐性乳房炎的快速诊断及用药筛选

陈长生

（新疆塔城地区畜牧科技研究推广中心，新疆 塔城　834700）

奶牛隐性乳房炎的快速诊断及用药筛选

陈长生

（新疆塔城地区畜牧科技研究推广中心，新疆 塔城834700）

从某集约化奶牛养殖场采样200份，应用SMT、NaOH、H2O2、BTB四种诊断法，对奶样进行检测对比，比较各种方法的准确性和各自的优缺点，为临床正确诊断乳房炎打?下基础；通过药敏试验，找出抑菌敏感药物，以期达到最佳治疗效果。快速诊断试验表明，SMT、H2O2的诊断率高；药敏试验结果表明，氨苄西林、红霉素、庆大霉素的抑菌效果最好，治疗效果明显，治愈率达75%。

奶牛；隐性乳房炎；快速诊断；药敏试验；治疗

奶牛隐性乳房炎无明显临床症状，乳汁眼观无异常变化，但乳腺组织已发生病理变化，乳中体细胞数明显增加，泌乳量减少，严重的导致泌乳功能丧失。因此，只有根据本场实际情况，建立一整套确实有效的诊疗程序，才是解决问题的关键。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1乳样采自本地区某集约化奶牛养殖场（200份）。

1.1.2培养基按常规制作方法制成普通琼脂平板。

1.1.3药敏纸片青霉素、氨苄西林、阿莫西林、头孢唑啉、庆大霉素、链霉素、罗红霉素、卡那霉素、红霉素、四环素、痢特灵、环丙沙星（均按标准配制）。

1.1.4主要仪器培养箱、洁净工作台、电子天平、高压灭菌锅、冰箱、试管、检验盘、培养皿、酒精灯、玻璃棒、移液器、尺子等。

1.1.5治疗药物注射用氨苄西林钠、注射用乳糖酸红霉素、硫酸庆大霉素注射液。

1.2方法

1.2.1奶样采集

先用温水将乳房擦洗干净，后用0.2%新洁尔灭擦洗乳房，再用75%的酒精消毒乳头，挤弃头三把奶，然后以无菌操作方法每头奶牛取奶样约10ml，立即注入备好的无菌瓶内，封盖、标号、4℃保存、待用。

1.2.2检验试剂配制

1.2.2.1SMT（上海乳房炎检验法）试剂购于上海光明乳业股份有限公司。

1.2.2.2H2O2（双氧水）试剂取30%H2O2，按1∶2.33～1∶4的比例加入中性蒸馏水，配成6%～9%的H2O2试剂［1］。

1.2.2.3NaOH（苛性钠）试剂4%NaOH溶液［1］。

1.2.2.4BTB（溴麝香草酚蓝/溴百里酚蓝/溴代麝香草酚蓝）试剂47.4%乙醇500ml加BTB1ml，再加5%NaOH溶液1.3～1.5ml，混合均匀成为微带绿色的溶液［1］。

1.2.3快速诊断试验

1.2.3.1SMT检验法将2ml被检乳置于塑料乳房炎检验盘中，再加入试剂2ml，缓慢做同心圆状搅拌后观察。判定标准见表1［1］。

表1　SMT检验法判定标准

1.2.3.2H2O2玻片法将载玻片置于白色衬垫物上，滴被检乳1滴，再加H2O21滴，混合均匀，静置2min观察。判定标准见表2［1］。

表2　H2O2玻片法制定标准

1.2.3.3NaOH凝乳检验法：将载玻片置于黑色衬垫物上，加被检乳5滴，再加4%NaOH溶液2滴，用细玻棒或火柴梗迅速搅拌，使其扩散成直径2.5cm的圆形，并继续搅拌观察（此法不适合检验泌乳初期及接近干乳期的乳）。判定标准见表3［1］。

表3　NaOH凝乳检验法判定标准

1.2.3.4BTB法先取被检乳5ml放入试管内，再加BTB试剂1ml，观察接触面。判定标准见表4［1］。

表4　BTB法判定标准

1.2.4奶样处理

随机抽取乳房炎奶样8份，在无菌条件下，用生理盐水按10%的比例稀释。

1.2.5药敏试验（平板纸片法）

用微量移液器吸取10μl稀释的乳液均匀涂于培养基（平皿使用前在温箱中放置1h，然后在室温下放置一段时间，使表面液体略干燥），再用灭菌镊子将药敏片贴于平皿内，将平皿倒置于37℃的温箱中培养24h，最后用尺子测量抑菌圈直径。

1.2.6治疗

随机抽取患病牛24头，8头/组，分别用以下药物治疗。

经乳腺导管向乳房内注入注射用氨苄西林钠，一次量，200mg/乳室，每天1次，连用3～5d，重症用量加倍。经乳腺导管向乳房内注入注射用乳糖酸红霉素，一次量，200mg/乳室，每天1次，连用3～5d。经乳腺导管向乳房内注入硫酸庆大霉素注射液，一次量，200mg/乳室，每天2次，连用2～3d。

乳房内注入时，将乳头管口用酒精棉球擦拭消毒，注入后乳头轻揉几下，有利于药物吸收。

1.2.7治疗效果评定

治疗5d后，采患畜奶样，采用SMT检验法，判定治疗效果。

2　结果

2.1快速诊断试验结果（见表5）

表5　快速诊断试验结果

2.2药敏试验结果（见表6）

表6　药敏试验结果　（单位：mm）

2.3治疗结果（见表7）

表7 治疗结果

3　分析与讨论

3.1阳性检验调查结果（见表8）

表8　阳性检验调查结果

通过几种诊断方法比较，SMT、H2O2阳性率较高，NaOH、BTB较低，但是SMT诊断液相对昂贵，建议在检测奶牛乳房炎时用H2O2法。

乳房炎是当今世界奶牛业中最常见和造成损失最大的一种疾病。隐性型乳房炎发病率高且不易发现，因此及时准确地做出早期诊断意义重大。所以，只有根据本场的实际情况，建立一整套确实有效的诊断程序，才是解决问题的关键。

3.2药敏试验结果

8个病例中的病原菌对氨苄西林、红霉素、庆大霉素敏感；对环丙沙星、卡那霉素中敏；对其他药物相对不敏感。药敏试验结果同殷波等［2］报道结果一致，病原菌对氨苄西林敏感。

3.3治疗试验结果

分别使用氨苄西林、红霉素、庆大霉素这3种药物治疗乳房炎，氨苄西林的治疗效果最好，治愈率达75%。该牛场治疗乳房炎有效药物为氨苄西林。

乳房炎的治疗方法很多，但临床上长期使用抗生素，致使耐药菌株不断增多，细菌对常用抗生素的耐药性愈来愈强。这不仅给奶牛乳房炎治疗选择用药带来很大困难，而且这些存在于质粒染色体的耐药基因是可以以结合方式在各菌种、动物以及人类之间传播，这就意味着当这些动物和人类发病时，很多抗菌药物将无效。目前开发一种新的抗生素需要十年左右的时间，而一代耐药菌的产生只要两年时间，即抗生素的研制速度远远赶不上耐药菌的繁殖速度，如此下去，相当多的由耐药菌引起的疾病将无药可治。因此临床用药时一定要注意避免耐药菌株产生（如采用交替用药和轮换用药）。

对奶牛乳房炎应采取综合预防，以防为主，防治结合，加强饲养管理、畜舍卫生。根据本场实际建立一整套的预防程序，加强技术人员的培训，减少乳房炎的感染几率；对牛群要进行定期检查，详细记录检查结果，根据实际情况及时治疗。

［1］赵兴绪.兽医产科学实习指导［M］.中国农业出版社，2002.

［2］殷波，熊焰.临床型奶牛乳房炎病原分离鉴定及药敏试验［J］.黑龙江畜牧兽医，2006，（2）：61-62.

［3］蒋春茂，周新民，周广生，等.奶牛乳房炎研究进展［J］.中国畜牧兽医，2004，31（5）：36-37.

［4］何振华，欧阳昌勇，何德肆.新建奶牛场乳房炎调查［J］.湖南畜牧兽医，2005，（5）：29-30.

［5］陆承平.兽医微生物学实验指导［M］.中国农业出版社，2001.

S858.23

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1004-5090（2015）04-0007-03

2015-03-20）