气相色谱法测定混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量

林章秀　厦门惠盈动物科技有限公司　福建厦门　361008

气相色谱法测定混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量

林章秀厦门惠盈动物科技有限公司福建厦门361008

目的建立气相色谱测定混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量的方法。方法样品采用乙醇提取，以毛细管色谱柱分离，采用氢火焰离子化检测器检测。结果 薄荷脑在0.0356～1.780 mg/m L范围内具有良好的线性关系，线性方程为Y= 139 286×X-3 452，相关系数R为0.9998，方法的定量限（LOQ）为0.1 g/kg。样品添加回收试验的平均回收率在98.2.8%～99.2%，相对标准偏差（RSD）为1.06%～1.96%（n=6）。结论 本方法简便、快速，结果准确、可靠，适用于混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量的测定。

薄荷脑薄荷素油气相色谱法无水乙醇

薄荷素油（薄荷油）为唇形科植物薄荷（Menthahaplocalyx Briq.）的新鲜茎和叶经水蒸汽蒸馏、冷冻、部分洗脑加工提取的挥发油。薄荷素油为无色或淡黄色的澄清液体，有一种特有的薄荷样香气，香气新鲜、强烈透发，有清凉、醒脑作用，是芳香药、调味药及驱风药。在鸡上应用具有缓解呼吸道黏膜肿胀的问题，对鸡只因饮水不足、饲料积存嗉囊、接种疫苗后出现呼吸问题等诱发的呼吸道积痰症状有特效，通过刺激呼吸道绒毛活动来化痰；也可作为调味剂和香味剂在饲料添加剂中使用。目前薄荷素油的测定依据方法：GB/T 12652-2002亚洲薄荷素油、GB 8319-2003食品添加剂亚洲薄荷素油，《中华人民共和国药典》一部，以上检测方法均不适合检测混合型饲料添加剂薄荷素油，因此，建立一种测定混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量快速、可靠、灵敏的分析方法具有重要的实际意义［1-3］。

1　材料与方法

1.1仪器与试剂Shimadzu GC-2010气相色谱仪（配氢火焰离子化检测器：日本岛津公司，KYOTO）；涡旋混合器（江苏健康医药公司）；分析天平（感量为0.1mg，德国赛多利斯公司）；微量进样器：10μL（瑞士Hamilton公司）；无水乙醇 （分析纯，国药集团）；薄荷脑标准品（纯度≥98.0%，美国Supelco公司）。

1.2试验方法

1.2.1标准溶液配制薄荷脑标准储备液：准确称取薄荷脑标准品0.1000 g于25mL容量瓶中，用无水乙醇溶解、定容，摇匀。

标准工作液配制：分别移取标准储备液0.10mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL置于6个10 mL容量瓶中，用无水乙醇定容，摇匀备用。或根据样品实际含量配制适当浓度的标准工作液。

1.2.2样品预处理称取试样1 g（精确至0.0 001 g），置于25mL容量瓶中，用无水乙醇溶解定容，摇匀。供气相色谱分析。

1.2.3色谱条件柱箱温度：100℃，保持10min，以20℃/min速率升到220℃，保持4min；进样口温度：230℃；检测器温度：260℃；气体：载气，氮气（纯度不小于 99.999%）；燃气，氢气 （纯度不小于99.99%）；空气 （压缩空气）；气体流量：柱流量，1.85 mL/min；氢气46 mL/min；空气480 mL/min；尾吹气，30mL/min；进样量：1μL；分流比为30:1。薄荷脑标准品、样品的气相色谱图见图1-图2。

2　结果与讨论

2.1线性及线性范围用无水乙醇对标准储备液逐步稀释，配制标准系列浓度，进样测定，绘制工作曲线，并计算相关系数。薄荷脑的线性范围和线性相关系数结果如表1所示，结果表明，在线性范围内线性关系良好，符合标准定量要求。

图1　薄荷脑标样色谱图

图2　薄荷脑样品色谱图

2.2方法定量限于混合型饲料添加剂薄荷素油样品基质中加入一定量的薄荷脑标准溶液，按前处理方法处理后，用10倍信噪比（S/N）计算出定量限（LOQ），结果见表1。

2.3方法回收率和精密度对混合型饲料添加剂薄荷素油样品中分别进行高、低加标回收率试验，每种加标样品平行制备6份，按照本方法建立的样品预处理方法处理，经GC分析检测，计算加标回收率和RSD值，结果如表2所示。结果表明，混合型饲料添加剂薄荷素油样品中薄荷脑加标回收率在98.2% ～99.2%之间，多次平行测定结果RSD在1.06%～1.96%；结果表明该方法具有良好的精密度和准确度。

2.4供试品含量测定准确称取3批试样1 g（精确至0.0001 g），分别置于25 mL容量瓶中，用无水乙醇溶解定容，摇匀。分别量取上述溶液各1μL，注入气相色谱仪，记录峰面积，计算混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量，见表3。

表1　薄荷脑样品标准曲线和线性范围

表2　混合型饲料添加剂薄荷素油样品中薄荷脑加标回收率和精密度（n=6）

表3　混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量

4　结　论

混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量测定方法为毛细管气相色谱法，以无水乙醇溶解定容，采用外标法计算含量，结果准确、可靠，方法简便、快速，该方法经过方法学验证，适合于混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑的质量控制。

［1］程爱平，沈春燕，章展煌.毛细管气相色谱法测定薄荷素油中（-）-薄荷酮和薄荷脑含量［J］.西北药学杂志，2010，25（1）：11-12.

［2］胡青，张甦，王柯，等.气相色谱法测定薄荷药材及饮片中的薄荷脑［J］.中国卫生检验杂志，2011（7）：1624-1625.

［3］陈硕.气相色谱法测定薄荷素油中薄荷脑、薄荷酮、薄荷脑乙酸脂、柠檬稀的含量［J］.海峡药学，2012，24（12）：41-42.

Determ ination ofmenthol in feed additive blender pepperm int oil by gas chromatography

Lin Zhangxiu
（Ximen Huiying Animal Science Tech.Co.，Ltd，Xiamen 361008）

Objective A method for the determination ofmenthol in feed additive blender Peppermint oil by gas chromatography was established.Methods The sample was firstly extracted by alcohol，and then was separated by capillary chromatogram column，and finally was determinate by flame ionization detector.Results The linear relation ofmenthol in 0.0356 to 1.780mg/mL showed good linearity（R=0.9998）.The linear equation was Y=139 286×X-3 452.The limit of quantization（LOQ）was 0.1 g/kg.The average recovery rate of recovery testwas 98.8%to 99.2%.The relative standard deviation（RSD）was 1.06%to 1.96%（n=6）.Conclusion Thismethod was simple，rapid and accurate.It can be used as amethod for the determination ofmenthol in feed additive blender PeppermintOil.

Menthol Peppermintoil Gas chromatography Dehydrated alcohol

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1003-4331（2015）03-0001-02