硝碘酚腈注射液的初步安全性评价

林永乐　福建省漳州市动物疫病预防控制中心　363000

硝碘酚腈注射液的初步安全性评价

林永乐福建省漳州市动物疫病预防控制中心363000

为评价硝碘酚腈注射液的安全性，对硝碘酚腈注射液进行急性毒性试验和蓄积毒性试验，结果显示硝碘酚腈注射液的LD50为68.37mg/kg，硝碘酚静注射液为中等毒性并有明显的蓄积毒性。

硝碘酚腈肝片吸虫安全性

肝片吸虫是一种能够危害人和动物的寄生虫，其中以牛、羊等反刍动物最为普遍，每年均引起重大的经济损失。硝碘酚腈是由法国罗纳梅里厄研究所研制开发的一种有效的、新型的驱除肝片吸虫的合成药物，其市场销售类型为硝碘酚腈与甲基或乙基葡萄糖氨的灭菌水针剂。硝碘酚腈对牛羊肝片吸虫、大盘吸虫成虫有100%驱杀效果，对牛羊捻转血矛虫、猪肝片吸虫和犬钩虫也有一定的驱除作用，但对未成熟虫体效果较差。硝碘酚腈与左旋咪唑联合用药对山羊肝片吸虫和线虫的驱除有理想效果。对牛羊皮下注射硝碘酚睛，30 min后可以达到血浆高峰浓度，药物被迅速吸收。硝碘酚腈对大鼠肝细胞线粒体功能的影响研究中表明，硝碘酚腈是一种氧化磷酸化作用的解偶联剂，它能够阻断虫体的氧化碳酸化作用，降低ATP浓度，减少细胞分裂所需能量而导致虫体死亡。本试验通过急性毒性试验和蓄积毒性试验对硝碘酚腈注射液的安全性做一个初步评价。

1　材料与方法

1.1试验动物昆明系小白鼠：雄性、体重20±2 g。

1.2试验制剂硝碘酚腈注射液：暗黄色透明液体，浓度为340mg/mL，生产批号为130408，重庆方通动物药业有限公司。

1.3试验方法

1.3.2急性毒性试验

1.3.2.1预试验按1.3.1方法将硝碘酚腈注射液用纯化水稀释成 50 mg/kg、60 mg/kg、70 mg/kg、80mg/kg、90mg/kg 5个浓度梯度的溶液。取10只小鼠，随机分成5组，按0.2 mL/10 g一次性腹腔注射给药，给药后连续饲养观察7 d。观察小白鼠中毒现象及时间顺序，记录每组小鼠死亡只数。并解剖死亡小白鼠，观察内脏病变情况，并记录其结果。

1.3.3蓄积毒性试验采用20 d剂量递增蓄积系数法，取20只雄性小白鼠，称量，标记。同时腹腔注射给药：一期按每只每天0.l*LD50的量给药，连续给药4 d。二、三、四期按顺序递增50%至动物死亡一半 （10只），或继续给药至累计剂量达 5.0*LD50（20 d）为止。观察小鼠中毒现象，记录小鼠死亡情况并解剖死亡小白鼠。

2　试验结果

2.1预试验预试验分组与试验结果见表1。

表1　预试验分组与试验结果

最小致死剂量a=50 mg/kg，最大致死剂量b= 80mg/kg。

2.2急性毒性试验试验组小白鼠在注射硝碘酚腈几分钟后活动量明显减少，均出现呼吸次数增加，呼吸困难，出现不同程度的精神萎靡，反应迟钝现象，注射浓度越高，反应越明显。低浓度受试组在3 h后恢复正常。小白鼠开始死亡时间是给药后5min，集中死亡时间是给药后20～30min，最后死亡时间是给药后4 h。小白鼠死亡前现象是亢奋并不断游走，喜欢扎堆，出现抽搐后几秒钟内死亡，四肢拉直。解剖死亡的小鼠，腹腔被硝碘酚腈染成黄色，小鼠肝脏有淤血，呈暗黑色。见表2。

表2　急性毒性试验小鼠死亡结果

计算：

LD5095%可信区间为61.94～75.47mg/kg。

2.3蓄积毒性试验第一期试验四次给药都未出现小鼠死亡。第二期试验第四次给药后3号小鼠死亡。第三期试验第一次给药后4号小鼠死亡，第二次给药后6、7号小鼠死亡，第三次给药后8、9号小鼠死亡，第四次给药后2、15、16号小鼠死亡。第四期第一次给药后1、10、11号小鼠死亡。此时小鼠死亡超过一半（10只）。每次给药前后称量小白鼠重量，发现小鼠重量变化不明显。每次给药时小鼠都会出现呼吸困难、呼吸次数增加、精神萎靡等现象。但在一段时间后会恢复正常，随着给药次数的增加，每次恢复的时间也随之增加。解剖死亡的小白鼠，发现腹腔黄染，肝脏呈暗黄色。结果见表3。

表3　蓄积毒性试验小鼠死亡结果

计算蓄积系数：

K=LD50（n）/LD50（1）=2.6875。1＜K＜3，表明硝碘酚腈注射液有明显蓄积毒性。

3　分析与讨论

硝碘酚腈是目前临床上有效的抗肝片吸虫药之一，具有作用剂量小（10～20 mg/kg）、使用方便、高效且安全等优点。硝碘酚腈注射液为硝碘酚腈与甲基或乙基葡萄糖氨的灭菌水溶液针剂，在试验前应该排除其溶剂对试验结果的影响。影响硝碘酚腈注射液的毒理作用的外界因素有气候、光照、温度和湿度。预试验旨在确定硝碘酚腈注射液对小鼠的最小与最大致死量范围，为后期准确测定硝碘酚腈注射液对小鼠的半数致死量提供数据。解剖死亡的小白鼠发现有些小鼠内脏无明显病变现象，也有死亡小白鼠肝脏淤血，呈暗红色，表明硝碘酚腈的主要作用靶器官是肝脏。有研究表明硝碘酚腈在血液中与血浆蛋白高度结合（结合率97%），具有缓释作用，能在宿主体内存留很长时间，这使得硝碘酚腈具有很强的驱虫效果，但也因此有较明显的蓄积毒性，蓄积毒性强，药物残留在动物体内供给每组小鼠腹腔注射用的硝碘酚腈应按剂量比例稀释成一系列浓度的溶液，小鼠腹腔注射给药标准为0.2 mL/10 g，这样给药毫升数与按体重一致，避免给药毫升数过大而导致小鼠非药物致死性死亡，影响试验结果。

4　结　论

硝碘酚腈注射液的急性毒性试验测定的LD50为 68.37 mg/kg，LD5095%可 信 区 间 为 61.94～75.47mg/kg。按我国急性毒性分级硝碘酚腈毒性为中等毒性。其蓄积毒性试验表明硝碘酚腈注射液有明显蓄积毒性。

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A primary evaluation for the safety of nitroxynil injection

Lin Yongle
（Zhangzhou animal disease prevention and control center，Zhangzhou Fujian 363000）

To assess the safety of nitroxynil injection，test the acute toxicity and cumulation toxicity of nitroxynil injection，The results showed that the LD50is 68.37mg/kg，the Conclusion showed that the nitroxynil injection possessmoderate toxicity and obvious cumulation toxicity.

nitroxynil fasciola hepatica safety

A

1003-4331（2015）02-0032-03