龙葵中澳洲茄碱含量的动态规律△

单会娇，王冰，张建逵，许亮

(1.葫芦岛市食品药品检验检测中心 中药室，辽宁 葫芦岛 125000； 2.辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600)

·中药农业·

龙葵中澳洲茄碱含量的动态规律△

单会娇1，王冰2*，张建逵2，许亮2

(1.葫芦岛市食品药品检验检测中心 中药室，辽宁 葫芦岛 125000； 2.辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600)

目的：通过研究龙葵不同产地、生长周期及药用部位中澳洲茄碱的动态规律，为进一步优化龙葵的采收期、药用部位及栽培提供依据。方法：采用HPLC，AgilentTC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm)；以乙腈-0.5%磷酸水溶液作为流动相，梯度洗脱；检测波长为203 nm；体积流量：0.9 mL·min-1；柱温为30 ℃。结果：龙葵药材中澳洲茄碱含量因产地不同差异很大。龙葵地上部分澳洲茄碱含量的高低主要取决于所结果实的多少，以盛果期含量最高；不同成熟程度果实中澳洲茄碱含量的规律为：成熟果实<青果<幼果。结论：在龙葵的生长过程中，龙葵中澳洲茄碱的含量随着其生长发育进程而发生变化。根据龙葵不同生长阶段所含澳洲茄碱在各器官中的含量变化，龙葵的最佳采收期为盛果期，最佳药用部位为幼果和青果。

龙葵；澳洲茄碱；HPLC；药用部位；生长周期；成熟程度

龙葵是茄科植物龙葵SolanumnigrumL.的干燥地上部分，曾被1977年版《中华人民共和国药典》收载。龙葵性寒、味苦、微甘、有小毒，有清热解毒、消肿散结、消炎利尿等功效[1]。龙葵不仅在传统医学上有着广泛应用，在现代临床医学上也有很多新用途。龙葵具有很好的抗肿瘤活性，其药理活性物质是甾体生物碱类成分，主要包括澳洲茄碱(solasonine)、澳洲茄边碱(solamargine)等，研究表明澳洲茄碱在体外抗肿瘤实验中表现出很好的抗肿瘤活性[2]。但目前对于澳洲茄碱含量测定方面的文献较少[3-4]，且尚未见龙葵中澳洲茄碱含量动态规律的报道。本研究旨在通过对龙葵不同产地、生长周期及药用部位中澳洲茄碱的含量研究，了解澳洲茄碱在龙葵的不同生长周期及各器官中的转化及发展过程，在优化龙葵药用部位及最佳采收期的同时，采取合理的肥水和栽培管理措施，为龙葵的合理栽培提供参考依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

Agilent1100高效液相色谱仪(美国Agilent公司)，包括四元泵，柱温箱，紫外检测器及chemstation 色谱工作站，KQ3200B型超声波清洗仪(昆山超声仪器有限公司)。

1.2 材料

10批龙葵采自不同产地，由辽宁中医药大学药用植物教研室王冰教授鉴定为茄科茄属龙葵SolanumnigrumL.的干燥地上部分及果实。样品产地信息见表1。

1.3 试剂

澳洲茄碱对照品(安徽芜湖甙尔塔医药科技有限公司，纯度>99%)，乙腈(TEDIA公司，HPLC)，磷酸(天津市科密欧化学试剂有限公司，HPLC)，超级纯水系统(密理博中国有限公司)，乙醇(沈阳市华东试剂厂，AR)。

表1 龙葵产地信息

2 方法与结果

2.1 色谱条件

AgilentTC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm)；流动相：乙腈(A)，0.5%磷酸溶液(B)，梯度洗脱条件为：0～7 min，A：22%，B：78%；7～20 min；A：22%～25%，B：78%～75%；体积流量：0.9 mL·min-1；柱温：30 ℃；地上部分进样量为：20 μL，果实进样量为10 μL；检测波长：203 nm[5]。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取澳洲茄碱对照品10.46 mg，置于10 mL量瓶中，用色谱甲醇溶解至刻度，摇匀，制成1.046 mg·mL-1的对照品溶液作为储备液。

2.3 供试品溶液的制备

精密称取龙葵药材2.0 g置于50 mL具塞锥形瓶中，加入10倍体积的60%乙醇溶液，60 ℃下超声提取2次，每次30 min，滤过，合并滤液，滤液水浴加热，浓缩至近干，用60%乙醇溶解并转移至25 mL量瓶中，稀释至刻度，摇匀，0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品液[6]。

2.4 测定结果与分析

精密称取不同产地、生境及不同生长期的龙葵地上部分及果实粉末(过60目筛)2.0 g，按供试品制备项下的方法制备，地上部分进样20 μL，果实进样10 μL，测定色谱峰面积，根据外标法计算龙葵中澳洲茄碱的含量，结果见表2、3。

表2 龙葵不同生长期地上部分澳洲茄碱含量测定结果 /mg·g-1

表3 龙葵果实中澳洲茄碱含量测定结果 /mg·g-1

3 讨论与结论

药材质量除了遗传因素外，最为关键的问题是药材生长的地点、环境，以及药材采收的时间。不同的生态环境、生理周期对药材的有效成分含量有着直接的关系，同一物种表现出不同形态生态型的同时，也表现出不同的化学生态型，这是物种多样性的体现。物种多样性直接影响着中药材的质量，导致中药质量的不均一、不稳定，使中药质量难以控制，是目前中药现代化最难解决和迫切要解决的问题之一。

本实验对不同产地、不同药用部位及不同生长期的龙葵地上部分及果实中澳洲茄碱的含量进行测定，结果表明龙葵药材中澳洲茄碱含量因产地、药用部位及生长期不同差异很大。实验证明辽西地区所产龙葵中的澳洲茄碱含量较高，可能是因为当地比较干旱，龙葵的结实率较高。龙葵地上部分澳洲茄碱含量的高低主要取决于所结果实的多少，苗期、花期、成熟后期以及摘除龙葵果实的龙葵地上部分澳洲茄碱的含量极低，甚至未检出，而以盛果期的龙葵地上部分澳洲茄碱含量最高。而在龙葵的果实中澳洲茄碱含量基本满足如下规律：成熟果实<青果<幼果，尤以幼果和青果中含量最高。

在龙葵的生长过程中，龙葵中澳洲茄碱的含量随着其生长发育进程而发生变化。根据龙葵不同生长阶段所含澳洲茄碱在各器官中的含量变化，在优化龙葵药用部位及最佳采收期的同时，可以采取合理的肥水措施，以促进龙葵的优质。由于所采样本有限，本实验的不足之处在于未对同一产地摘除果实前后的龙葵地上部分进行比较。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S]，北京：化学工业出版社，1977：154.

[2] 罗文娟，王光辉，周新兰，等.螺甾皂苷类化合物的体外抗人肝细胞增殖作用[J].现代肿瘤医学，2007，15(3)：307-308.

[3] 袁海建，安益强，陈彦，等.高效液相色谱法测定龙葵中澳洲茄碱的含量[J].中华中医药杂志，2009，24(1)：96-97.

[4] 李明慧，丁冈，孟兆青，等.龙葵药材中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量测定[J].中国天然药物，2007，5(5)：360-362.

[5] 单会娇，张建逵，许亮，等.24个产地龙葵中澳洲茄碱的含量测定[J].中成药，2011，33(3)：483-485.

[6] 汤丹灵，林朝仙，杨快儿，等.龙葵有效成分的提取方法及定量[J].中华医学研究杂志，2006，6(5)：573-574.

Dynamic Change of Solasonine Content inSolanumnigrum

SHAN Huijiao1，WANG Bing2*，ZHANG Jiankui2，XU Liang2

(1.Huludao Institute for drug and food control Traditional Chinese Medicine Laboratory Liaoning Huludao 125000；2.The Liaoning University of Traditional Chinese Medicine College of medicine Liaoning，Dalian 116600)

Objective：To the dynamic accumulation of solasonine inSolanumnigrumfrom different origin growth cycle and medicinal parts，and provide scientific basis for harvest time，standardized cultivation and medicinal parts ofS.nigrum.Methods：The content of solasonine was determined by using HPLC，Agilent TC-C18column (250 mm×4.6 mm) with acetonitrile-0.5% phosphoric acid solution as mobile phase，detection wavelength was 203 nm；flow rate was 0.9 mL·min-1；column temperature was 30 ℃.Results：Solasonine content ofS.nigrumin great difference by different origin.The content of solasonine inS.nigrumdepended on the number of the fruits.The highest content was in full fruit period.The solasonine content in fruits of different maturity was following：mature fruit

Solanumnigrum；solasonine；HPLC；medicinal parts；growth cycle；maturity

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.9.012

2014-12-29)

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王冰，教授，博士生导师，研究方向；药用植物种质资源及质量评价；Tel：(0411-87586003)，E-mail：wangbing1616@163.com