uPA、uPAR在甲状腺癌中的表达及意义

谢康康，王德杰，吴伟（苍南县人民医院，浙江苍南325804）

uPA、uPAR在甲状腺癌中的表达及意义

谢康康，王德杰*，吴伟
（苍南县人民医院，浙江苍南325804）

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）及其受体（uPAR）在甲状腺癌中的表达及意义。方法 应用免疫组织化学SP法检测腺瘤旁正常甲状腺组织（20例）、良性甲状腺肿瘤（40例）、甲状腺癌（40例）标本中uPA、u-PAR蛋白的表达情况，并探讨其与性别、年龄、肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移、包膜浸润情况和分化程度的关系。结果uPA、uPAR在正常甲状腺组织、良性甲状腺肿瘤及甲状腺癌组织中的表达呈逐渐增高趋势（P＜0．01），并且两者的增长具有相关性（r=0.89，P＜0．01）。甲状腺癌组织中uPA、uPAR蛋白表达与临床分期、淋巴结转移、包膜浸润情况和分化程度有关（均P＜0．01），与年龄、性别和肿瘤大小无关（均P﹥0.05）。结论uPA、uPAR的高表达可能与甲状腺癌的发生、发展及浸润转移有关，抑制uPA、uPAR的高表达可能成为甲状腺癌治疗的新靶点。

甲状腺癌；uPA；uPAR；免疫组化

甲状腺癌是常见的颈部恶性肿瘤，占人体内分泌腺恶性肿瘤的90%以上［1］。近年来，甲状腺癌发病率呈现出逐步上升的趋势［2］，但其发病机制仍无法明确。目前国内外对uPA、uPAR在结肠癌、肺癌、卵巢癌、乳腺癌、肝癌等中的表达及其与肿瘤恶性生物学行为的相关性有较多研究，而uPA、uPAR与甲状腺癌的相关性却报道较少。本文探讨uPA和uPAR蛋白在甲状腺癌中的表达及作用，并与正常甲状腺组织、良性甲状腺肿瘤进行比较，报道如下。

1　材料与方法

1.1材料选择本院病理科2009～2014年归档的甲状腺疾病组织蜡块标本，共100例，所有标本均经病理确诊。其中腺瘤旁正常甲状腺组织20例，良性甲状腺肿瘤40例，甲状腺癌40例。纳入标准：（1）所有标本均由病理结果和临床资料证实；（2）既往无放、化疗和甲状腺手术史；（3）既往均无其他部位肿瘤病史；（4）术前未行溶栓处理。

1.2方法兔抗人多克隆抗体uPA；兔抗人多克隆抗体uPAR；免疫组化染色试剂盒。取存档蜡块进行常规切片，厚度约4μm。检测uPA、uPAR在三种甲状腺组织中的表达。运用SP免疫组织化学方法，染色步骤严格根据试剂盒说明书操作。阳性结果用已知甲状腺癌阳性片作对照，采用PBS代替一抗作为空白阴性对照。uPA蛋白阳性结果表达为肿瘤细胞浆内呈现出棕黄色颗粒；uPAR蛋白阳性结果主要表达为肿瘤细胞膜上呈现出棕黄色颗粒；采用医学数字图像分析系统进行灰度测量分析，每张片随机选择5个高倍镜视野（×400），以阳性区平均灰度值作为切片的测定结果。

1.3统计学处理采用SPSS 17.0软件进行统计学处理，实验数据以（x±s）表示，多组均数间比较采用随机区组设计资料单因素方差分析；相关性分析采用Spearman法。

2　结果

2.1uPA、uPAR在不同甲状腺组织中的表达uPA、uPAR蛋白在腺瘤旁正常组织、良性甲状腺肿瘤、甲状腺癌中的表达呈逐渐增高的趋势，差异有统计学意义（F=72.43，P＜0．01；F=61.40，P＜0．01），并且两者呈正相关趋势增长（r=0.89，P＜0.01）。uPA和uPAR在良性甲状腺肿瘤组、甲状腺癌组与正常甲状腺组比较差异均有统计学意义（P＜0.01）；uPA和uPAR在甲状腺癌组与良性甲状腺肿瘤组比较，差异也有统计学意义（P＜0.01）。详见表1。

表1　三组uPA、uPAR蛋白的表达情况比较（±s）

表1　三组uPA、uPAR蛋白的表达情况比较（±s）

与正常甲状腺组比较**P＜0.01，与良性甲状腺肿瘤组比较△△P＜0.01

组别　n　uPA　uPAR正常甲状腺组　20　116.98±7.82　112.37±7.61良性甲状腺肿瘤组　40　134.86±10.05**　125.39±9.91**甲状腺癌组　40　151.66±12.48**△△　143.76±13.04**△△

2.2uPA、uPAR表达与临床病理的关系甲状腺癌组织中uPA、uPAR的表达与临床分期、淋巴结转移、包膜浸润和分化程度有关系（P＜0.01），而与性别、年龄、肿瘤大小无显著关系（P＞0.05）。详见表2。

3　讨论

恶性肿瘤的发生、发展及浸润转移涉及到肿瘤与宿主细胞之间有着非常复杂的关系，多种相关基因对其进行调控。uPA是多功能丝氨酸蛋白酶，最初以无活性的形式分泌，可被纤溶酶、组织蛋白酶激活，活化后的uPA能降解细胞外基质和层粘连蛋白、纤维连接蛋白、蛋白多糖、板层素等基膜成分。uPA要发挥其功能，需与细胞膜表面的uPAR结合。uPAR是富含半胱氨酸的糖基化的单链蛋白，uPAR存在于体内多种正常细胞膜上，uPAR与uPA特异性结合后具有细胞局部纤溶功能，能介导细胞内的信号转导，进而对细胞的增殖、趋化、粘附、迁移等造成影响［3-4］。

表2　甲状腺癌组织中uPA、uPAR的表达与临床病理关系（±s）

表2　甲状腺癌组织中uPA、uPAR的表达与临床病理关系（±s）

uPA　P　uPAR　P性别男女16　150.61±13.83　﹥0.05　141.44±14.43　﹥0.05 24　152.36±11.76　145.31±12.09年龄（岁）＜45 ≥45 19　150.59±11.07　﹥0.05　141.68±10.68　﹥0.05 21　152.63±13.84　145.64±14.87肿瘤大小（cm）≤2 ＞2 23　149.98±12.00　﹥0.05　142.09±13.05　﹥0.05 17　153.94±13.12　146.02±13.07临床分期I～II期III～IV期30　148.50±11.73　＜0.01　140.13±12.22　＜0.01 10　160.74±10.48　153.67±10.67淋巴结转移有无13　161.21±9.72　＜0.01　153.13±10.18　＜0.01 27　147.52±11.03　139.69±11.93包膜浸润有无12　160.71±9.98　＜0.01　153.12±10.63　＜0.01 28　147.78±11.51　139.75±11.99分化程度低中高8 159.59±12.10　＜0.05　156.89±9.31　＜0.01 32　149.68±11.95　140.48±11.78临床病理参数　n

本文结果提示，甲状腺癌中uPA、uPAR表达显著高于腺瘤旁正常甲状腺组织、良性甲状腺肿瘤，并且甲状腺癌的uPA和uPAR表达显著高于良性甲状腺肿瘤。由此推测uPA、uPAR蛋白表达随着甲状腺正常组织、良性肿瘤到癌变，逐渐增高，提示uPA、uPAR蛋白可能参与甲状腺癌的发生、发展。uPA需要与细胞膜表面的uPAR结合才能发挥其功能，与实验结果中uPA、uPAR表达呈显著的正相关符合。表2提示，甲状腺癌组织中uPA、uPAR的阳性表达与临床分期、淋巴结转移、包膜侵犯、分化程度有关，而与性别、年龄和肿瘤大小无关。乔雷等［5-7］对结肠癌、宫颈癌和肝癌进行研究，发现uPA及uPAR对这些癌症的发生、发展或者浸润、转移都有促进作用，与本文有相似的结果。

综上所述，uPA及uPAR在甲状腺癌的发生、发展及浸润转移的过程中起着重要的作用，检测甲状腺癌组织中uPA、uPAR含量可以了解肿瘤的浸润程度和淋巴结转移等情况，为临床患者的复发、转移和预后判断提供一定的参考。

［1］Reis EM，Ojopi E P，Alberto FL，et al.Large-scale transcrip-tome analyses reveal new genetic marker candidates of head neck，and thyroid cancer.Cancer Res，2005，65:1693

［2］关海霞，单忠艳，米小轶，等．普通食盐碘化前后甲状腺癌发病变化的11年病理资料分析．中国医科大学学报，2006，35（3）：284

［3］Duffy MJ，Maguim TM，McDermott EW，et al.Urokinase plasminogen activator:A prognosticmaker in multiple types of cancer.J Surg Oncol，1999，71（2）：130

［4］ Behrendt N，Plouy M，Patthy L，et a1.The ligand binding domain of the cell surface receptor for urokinase-type plasminogen activator.Biol Chem，1991.266（12）:7842

［5］乔雷，陈春生．uPA、uPAR及PAI-1在结肠癌侵袭和转移中的作用及其相关性．现代肿瘤医学，2012，20（9）：1876

［6］张鹏，孔红霞．宫颈鳞癌组织中uPA、uPAR的表达变化及意义．山东医药，2010，50（6）：38

［7］范建，杨华英，孙冬霞，等．uPA和FAK在肝癌组织中的表达及相关性研究．现代中西医结合杂志，2013，22（6）：589

*为通讯作者，E-mail：172198901@qq.com