非小细胞肺癌患者血清叶酸、同型半胱氨酸和维生素B12的检测及其临床意义

于秀艳，王文龙，吴雪峰，刘晓峰

(吉林省肿瘤医院检验科，吉林 长春 130012)

非小细胞肺癌患者血清叶酸、同型半胱氨酸和维生素B12的检测及其临床意义

于秀艳，王文龙，吴雪峰，刘晓峰

(吉林省肿瘤医院检验科，吉林 长春 130012)

目的：检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中叶酸、同型半胱氨酸(Hcy)和维生素B12水平，阐明叶酸、Hcy和维生素B12水平用于NSCLC诊断及预后评估的临床意义。方法：选取35例NSCLC患者作为NSCLC组，另选30名健康体检者作为对照组，排除高血压、贫血和家族病史等相关影响因素，采用循环酶法和电化学发光法检测2组受试者血清叶酸、Hcy及维生素B12水平。采用Pearson检验分析2组受试者血清中叶酸、Hcy及维生素B12水平的相关性。结果：NSCLC组患者Hcy水平明显高于对照组(P<0.01)；NSCLC组患者叶酸水平明显低于对照组(P<0.01)；而2组间维生素B12水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析，NSCLC组患者血清Hcy水平与叶酸水平呈负相关关系(r=-0.505，P=0.002)，与维生素B12水平无关联(r=-0.084，P=0.633)，叶酸水平与维生素B12水平无关联(r=-0.039，P=0.826)。结论：NSCLC患者血清Hcy水平显著升高，其对NSCLC患者诊断及评估预后有预测价值。

非小细胞肺癌；叶酸；同型半胱氨酸；维生素B12

目前肺癌是世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤[1]，在肺癌的各种类型中，上皮细胞来源的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC) 占肺癌的80%以上[2]。早期诊断和治疗对于提高肺癌、尤其是NSCLC患者生存率至关重要，血清同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy) 是人体内的一种含硫非必需氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物，其代谢过程依赖于B族维生素12(vitamin B12)以及叶酸。国内外有研究[3-6]表明：血浆Hcy水平升高可增加心脑血管疾病发生的风险，且Hcy水平升高与肾病代谢综合征和神经退行性疾病等密切相关。近年来国内外研究[7]发现：血清Hcy升高与肿瘤细胞的快速增殖密切相关，与健康人比较，血清Hcy水平在肺癌患者中升高具有显著性。叶酸及维生素B12在DNA甲基化过程具有传递一碳基团和维持合成DNA所需的叶酸池的作用，其与细胞癌变的关系是临床研究热点之一[8]，DNA甲基化从分子生物学角度揭示了细胞癌变的发生发展，对于癌症的早期诊断、预后评估及其治疗具有重大意义[9]。目前国内关于NSCLC患者血清叶酸、Hcy和维生素B12的关联性研究报道较少。本研究检测NSCLC患者血清中叶酸、Hcy和维生素B12水平，旨在探讨叶酸、Hcy及维生素B12水平作用于NSCLC诊断及预后评估的可能性。

1　资料与方法

1.1研究对象和分组情况选取吉林省肿瘤医院内科2014年1月—2015年1月期间住院治疗的35例NSCLC患者(NSCLC组)，均经影像学及病理学检查确诊。其中男性21例，女性14例，年龄20～75岁，中位年龄57岁，同时排除并发有影响Hcy代谢的因素与疾病。排除标准：心血管系统病变(心脏彩超和超声心动图等)；原发或继发高血压[收缩压≥140 mmHg和(或)舒张压≥90 mmHg][10]；恶性贫血；肾脏疾病；肝脏疾病；糖尿病；外源性补充叶酸和维生素B12；长期口服避孕药者；吸烟、饮酒者；甲状腺功能低下者[11-12]；患有其他恶性肿瘤者；未使用氨甲喋呤、苯妥英钠、速尿等影响Hcy代谢的药物。另选取本院体检中心30名健康体检者作为对照组，其中男性16例，女性14例，年龄29～65岁，中位年龄55.5岁。

1.2方法NSCLC患者在入院后第2天清晨空腹采集左臂肘静脉血，注入含促凝胶的生化试管中，3 000 r·min-1离心5 min，取上清，血清Hcy水平测定应用贝克曼DXC800C型全自动生化分析仪，采用循环酶法检测，试剂由北京九强公司生物科技公司提供；血清叶酸和维生素B12水平测定应用德国罗氏COBAS E601型全自动免疫分析仪，采用电化学发光法检测，试剂由罗氏试剂公司提供。各项操作严格按照说明书进行，所有室内质控均在控，于采集后4 h内检测完毕，对照组体检时采取空腹静脉血立即按上述方法分离并检测。测试项目的参考值：Hcy 10～22 μmol·L-1，叶酸10.4～42.4 nmol·L-1，维生素B12156～698 pmol·L-1。

2　结　果

2.12组受试者血清叶酸、Hcy和维生素 B12水平NSCLC组患者Hcy水平明显高于对照组(t=14.629，P=0.000)；NSCLC组患者血清叶酸明显低于对照组(t=-6.194，P=0.000)；而2组受试者血清维生素 B12水平比较差异无统计学意义(t=-1.640，P=0.106)。见表1。

2.22组受试者血清叶酸、Hcy和维生素B12水平相关性分析35例NSCLC患者血清叶酸、Hcy及维生素B12水平行Pearson相关分析结果显示：血清Hcy水平与叶酸水平呈负相关关系(r=-0.505，P=0.002)，与维生素B12无关联(r=-0.084，P=0.633)，血清叶酸水平与维生素B12水平无关联(r=-0.039，P=0.826)。对照组血清Hcy水平与叶酸水平呈负相关关系(r=-0.781，P=0.000)，与维生素B12水平无关联(r=-0.293，P=0.116)；血清叶酸水平与维生素B12水平无关联(r=-0.205，P=0.277)。见表2。

表1　NSCLC组与对照组受试者血清Hcy、叶酸及维生素B12水平

*P<0.01 compared with control group.

表2NSCLC组和对照组受试者血清Hcy、叶酸和维生素 B12水平的相关性

3　讨　论

肺癌发病率和死亡率居癌症首位，但肺癌的发生、发展分子机制研究仍未完全阐明[13]，人体内Hcy为甲硫氨酸代谢的中间产物，甲硫氨酸发生脱甲基等一系列反应后产生Hcy，而Hcy又以维生素B12为辅因子，以N5-甲基四氢叶酸为甲基供体，并在甲硫氨酸合成酶的催化下再次合成为甲硫氨酸，当维生素B12和叶酸水平较低时会造成Hcy不能再次合成甲硫氨酸,大量Hcy在血液循环中蓄积,引起神经细胞毒性，细胞增殖异常出现癌性病变。近年来的研究[14-15]显示：Hcy与多种恶性肿瘤的发生密切相关，在叶酸水平较低、Hcy水平较高的女性患乳腺癌的风险增加，晚期转移性乳腺癌患者Hcy水平显著增高。在结直肠癌、卵巢癌、急性淋巴细胞白血病、恶性淋巴瘤和头颈部肿瘤患者血浆中Hcy水平升高，这种升高可能是由于叶酸等相关维生素缺乏或Hcy代谢中相关酶的缺陷引起的。

本研究结果显示：NSCLC患者血清Hcy水平显著高于健康体检者，叶酸水平显著低于健康体检者，与黄慧[16]和于平等[17]的研究结果一致。本研究中35例NSCLC患者血清Hcy水平显著升高，叶酸水平显著下降，提示Hcy、叶酸与NSCLC有密切联系，可能的原因：叶酸缺乏，可影响DNA的甲基化整合及损伤修复,原癌基因和抑癌基因之间的平衡被打破，激活原癌基因导致肿瘤发生；肿瘤细胞增殖过快，叶酸相对缺乏，蛋氨酸循环速度降低导致Hcy水平升高；Hcy可改变患者的凝血、抗凝血和纤溶系统的功能状态，进一步促进肿瘤的生长和浸润；甲基四氢叶酸还原酶基因多态性也会导致叶酸循环障碍或代谢相关酶的缺乏而致Hcy水平升高。国外文献[18]报道：饮食缺少叶酸或者叶酸代谢相关基因异常可能会增加患肺癌的风险，提高血清叶酸水平可以对肺癌有一定的预防作用。本研究中，NSCLC组和对照组受试者血清患者维生素B12水平比较差异无统计学意义,表明维生素B12与NSCLC的发生无明显关联，这个结果可能与样本量少有关，还需进一步验证。也有相关文献[19-22]报道：多种常见肿瘤血浆Hcy水平明显升高而叶酸和维生素B12水平的变化呈多样性。

综上所述，NSCLC 患者血清Hcy水平显著升高，Hcy与NSCLC 有着密切的联系，其与传统指标联合应用可提高NSCLC诊断的敏感度和特异度，对NSCLC的诊断及改善预后具有一定的指导意义。NSCLC发病与多种潜在因素相关，Hcy和叶酸只是影响NSCLC病情进展的部分原因，Hcy 的升高是NSCLC 的发病原因还是其表现有待进一步研究探讨。

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Detection of serum folate, homocysteine and vitamin B12in patients with non-small cell lung cancer and its clinical significance

YU Xiuyan，WANG Wenlong，WU Xuefeng，LIU Xiaofeng

(Department of Laboratory,Tumor Hospital of Jilin Province, Changchun 130012,China)

Objective To detect the serum levels of folate, homocysteine (Hcy) and vitamin B12in the patients with non-small cell lung cancer(NSCLC), and to clarify the clinical significance of folate,Hcy and vitamin B12in the diagnosis and prognosis assessment of NSCLC. Methods 35 patients with NSCLC were chosen as NSCLC group,and 30 healthy people were selected as control group, excluding hypertension, anemia, family disease history and other related factors. The expression levels of serum folate,Hcy and vitamin B12were examined by circulating enzymatic method and electrochemical luminescence method.The correlations between the levels of serum folate,Hcy and vitamin B12of the objects in two groups were analyzed by Pearson test.ResultsThe serum Hcy level of the patients in NSCLC group was significantly higher than that in control group(P<0.01).The serum folate level of the patients in NSCLC group was significantly lower than that in control group(P<0.01),while there was no significant difference in vitamin B12levels between two groups(P>0.05).The serum Hcy level was negatively correlated with folate level(r=-0.505，P=0.002), but was not correlated with vitamin B12(r=-0.084，P=0.633). The serum folate level was not correlated with vitamin B12(r=-0.039，P=0.826).Conclusion The serum Hcy level of NSCLC patient is significantly increased and it has diagnostic and prognostic values in the NSCLC patients.

non-small cell lung cancer;folate; homocysteine; vitamin B12

1671-587Ⅹ(2015)06-1235-04

10.13481/j.1671-587x.20150626

2015-08-19

国家高技术研究发展计划(863计划)项目资助课题(2011AA02A111)

于秀艳(1968-)，女，吉林省长春市人，主任技师，医学硕士，主要从事临床分子免疫学方面的研究。

刘晓峰，副主任医师(Tel: 0431-85871048，E-mail：liuyang7406@sohu.com)

R446

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