抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体在麸质敏感性肠病诊断中的应用

易浔飞　张静兰　刘飞　江裕

抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体在麸质敏感性肠病诊断中的应用

易浔飞张静兰刘飞江裕

作者单位：350025福州市，南京军区福州总医院全军临床检验医学研究所（易浔飞张静兰刘飞）350007福州市，福州市第二医院检验科（江裕）

目的评价抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体IgG、IgA检测在诊断麸质敏感性肠病（gluten sensitive enterpathy，GSE）中的应用价值。方法选择2012年8月至2014年9月我院门诊及住院的GSE患者35例作为GSE组；同时期健康体检者50例作为健康对照组。采用ELISA法和间接免疫荧光法检测所有受试者的抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体，并对实验数据进行统计学分析。结果GSE组中抗麦胶蛋白抗体IgG、抗麦胶蛋白抗体IgA、抗肌内膜抗体IgG和抗肌内膜抗体IgA的阳性率分别为25.7%（9/35）、25.7%（9/35）、14.3%（5/35）和28.6%（10/35），均显著高于健康对照组，且差异均有统计学意义（P均＜0.05）。抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体联合检测的阳性率分别为45.7%（抗麦胶蛋白抗体IgG+抗麦胶蛋白抗体IgA）、37.1%（抗肌内膜抗体IgG+抗肌内膜抗体IgA）和48.6%（抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA+抗肌内膜抗体IgG、IgA），均显著高于健康对照组，且差异均有统计学意义（P均＜0.05）。抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体单独诊断GSE的特异性和阳性预测值较高，可达100.0%（抗肌内膜抗体IgG、IgA），而敏感性均较低。抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体联合检测诊断GSE的敏感性有所提高，其中最高的为48.6%（抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA+抗肌内膜抗体IgG、IgA）。结论抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体联合检测可提高诊断GSE的敏感性，减少漏诊。对GSE高危人群应检测抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体进行筛查和诊断。

麸质敏感性肠病；谷胶病；抗麦胶蛋白抗体；抗肌内膜抗体；免疫球蛋白

doi：10.3969/j.issn.1674-7151.2015.01.006

麸质敏感性肠病 （gluten sensitive enterpathy，GSE）又称谷胶病，是一类因食用含有麸质的谷类物质引起的具有个体倾向的自身免疫性疾病。GSE在西方人群中的发病率为0.5%～1.0%［1，2］，而国内对此病的认识、相关病理机理的研究还刚起步，中国人群中的发病率还未见报道，相关自身抗体的研究报道也很少。GSE可发生在任何年龄段，以成人相对多见，最常见的临床表现为腹痛、腹泻和便秘等。GSE传统的诊断方法主要涉及诊断小肠吸收不良综合征的各种检查方法，如粪便苏丹Ⅲ染色、72 h粪脂定量检查、脂肪吸收试验、小肠黏膜活检等，但特异性和敏感性均较低，而小肠黏膜活检为有创检查，操作困难，且不能检测到所有GSE的肠道表现。目前，诊断GSE的金标准为肠道活检结合血清学检测阳性结果；另外对于儿童相关自身抗体阳性，且具有GSE临床症状、接受无麸质饮食后症状改善、抗体滴度下降或接受无麸质饮食后生长发育改善，也可确诊［3］。因此，血清学检测GSE相关自身抗体是一种简单、准确性较高的非侵入性方法。目前国外采用抗麦胶蛋白抗体及抗肌内膜抗体血清学检测作为筛查GSE的指标，国内还未见类似研究报道。本文通过检测GSE患者血清中抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA和抗肌内膜抗体IgG、IgA，评价这四种抗体在GSE临床诊断中的应用价值。

表1　GSE组和健康对照组四种自身抗体检测的阳性率［n（%）］

1　资料与方法

1．1临床资料选择2012年8月至2014年9月就诊于我院门诊和住院的35例GSE患者作为GSE组，其中男性18例，女性17例，年龄1～80岁，中位年龄38岁，所有患者均符合2012年欧洲儿科胃肠肝脏营养学协会乳糜泻诊断指南［4］的诊断标准，并结合临床表现和治疗有效或肠镜报告确诊。健康对照组选择50例同时期体检健康者，其中男性27例，女性23例，年龄0～73岁，中位年龄32岁。

1．2仪器与试剂抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA检测试剂盒（酶联免疫吸附法）、抗肌内膜抗体IgG、IgA检测试剂盒（间接免疫荧光法）均由北京欧蒙生物技术有限公司提供。

1．3方法采集入选者的空腹静脉血，分别检测血清中抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA及抗肌内膜抗体IgG、IgA的水平。抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA测定采用ELISA法，抗肌内膜抗体IgG、IgA测定采用间接免疫荧光法。检测过程严格参照试剂盒说明书操作。

1．4结果判定抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA以样本吸光度与标准品吸光度比值＞1.1为阳性，抗肌内膜抗体IgG、IgA以抗体滴度≥1∶10为阳性。检测方案分为单项目检测和联合检测（平行试验），联合检测中一个指标出现阳性即诊断为GSE阳性。

1．5统计学处理采用SPSS 13.0统计学软件对数据进行分析。计数资料的比较采用χ2检验（样本例数＜40时采用Fisher确切概率法）；采用四格表χ2检验计算四种抗体单独检测及联合检测对GSE诊断的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2．1GSE组和健康对照组抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体检测的阳性率比较35例GSE患者中，抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA和抗肌内膜抗体IgG、IgA的阳性率均显著高于健康对照组，且差异均有统计学意义（P均＜0.05），见表1。

2．2GSE组和健康对照组抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体联合检测的阳性率比较GSE患者中，抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体联合检测的阳性率均显著高于健康对照组，且差异均有统计学意义（P均＜0.05），见表2。

2．3抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体对GSE的诊断效能评价抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体各亚型单项检测对GSE诊断的特异性和阳性预测值较高，最高均可达100.0%，但敏感性较低，均在28.6%以下。其中，各指标诊断效能最高的是抗肌内膜抗体IgA，分别为敏感性28.6%、特异性100.0%、阳性预测值100.0%、阴性预测值66.7%，见表3。

表2　GSE组和健康对照组四种自身抗体联合检测的结果分析［n（%）］

表3　抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体各亚型单项抗体对GSE的诊断效能评价（%）

2．4抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体联合检测GSE的诊断效能评价抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体联合检测对GSE的诊断效能均较高，特异性和阳性预测值最高均可达100.0%，敏感性最高可达48.6%，阴性预测值最高可达72.3%。其中特异性和阳性预测值最高的为抗肌内膜抗体IgG和抗肌内膜抗体IgA联合检测，敏感性和阴性预测值最高的为抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA和抗肌内膜抗体IgG、IgA联合检测，见表4。

表4　抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体联合检测对GSE的诊断效能评价（%）

3　讨论

GSE是患者对麸质不耐受引起的以小肠黏膜病变为特征的一种原发性吸收不良综合征。该病起病大多缓慢，其临床表现以腹痛、腹泻和便秘为主，是慢性腹泻不可忽视的病因之一，进食麦类食物症状加重，忌食麦类食物症状缓解［5］。国外研究［6，7］发现GSE患者常伴发1型糖尿病、自身免疫性甲状腺炎等自身免疫性疾病，认为GSE与这些自身免疫性疾病具有共同的免疫异常基础，并与肿瘤、骨质疏松、贫血有一定的相关性，且男女均可发病，可发生于任何年龄段，具有家族倾向，直系亲属中有5%～10%会发展成GSE。儿童患病症状包括生长发育停止、面色苍白、喜欢抱怨、易怒、学习困难、肌张力减低、消瘦、腹胀、痢疾、注意力不集中和多动等［8-11］。此外，唐氏综合征、过敏性疾病患儿也是GSE的高发人群［12，13］。

目前认为，GSE发病机制是肠黏膜的固有层吸收麸质中的麦胶蛋白后，组织谷氨酰胺转移酶脱去麦胶蛋白的酰胺基。在这个过程中谷氨酰胺残基被谷氨酸残基取代，在有遗传易感性的人群中，通过这种方式被修饰改造的麦胶蛋白会与抗原提呈细胞HLA-DQ2/8等分子结合，提呈给辅助T细胞，由此促发广泛的免疫反应，引起病理性组织变化，特别是对小肠的损害，产生GSE症状［14］。而参与这一免疫反应的成分包括了抗肌内膜抗体以及抗组织谷氨酰胺转移酶脱酰胺的麦胶蛋白抗体［15］。本文研究结果显示，35例GSE患者中分别检测出9例抗麦胶蛋白抗体IgG阳性，9例抗麦胶蛋白抗体IgA阳性，5例抗肌内膜抗体IgG阳性以及10例抗肌内膜抗体I-gA阳性，阳性率分别为 25.7%、25.7%、14.3%和28.6%，均显著高于健康对照组，差异均有统计学意义。而抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体各亚型联合检测的阳性率也均显著高于健康对照组 （P均＜0.05），同时也高于各抗体单项检测的阳性率。说明抗麦胶蛋白抗体及抗肌内膜抗体与GSE的发病具有一定的相关性。

本文研究对抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体诊断GSE的效能评价结果显示，单独检测抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA，或者抗肌内膜抗体IgG、IgA，虽然其诊断的特异性可高达100.0%，但是敏感性极低，仅有14.3%～28.6%。因此，单独检测虽然有利于GSE的筛查，但检出率极低。联合检测这两种自身抗体及其亚型可有效提高诊断的敏感性，达到37.1%～48.6%，其中以抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA和抗肌内膜抗体IgG、IgA联合检测的敏感性最高（48.6%）。并且联合检测IgG和IgA，还可避免一些选择性IgA缺乏症的GSE患者的漏诊，提高检出率。因此，进行抗麦胶蛋白抗体IgG、IgA和抗肌内膜抗体IgG、IgA的联合检测有利于GSE的筛查和诊断。

总之，对于GSE高危人群，如GSE患者亲属、有疑似GSE相关临床表现（腹泻、腹痛和便秘）的患者，以及GSE相关疾病（1型糖尿病、唐氏综合征、贫血、关节炎、骨质疏松、不育和身材矮小等）的患者，有必要进行抗麦胶蛋白抗体和抗肌内膜抗体的血清学检测。

1Ellul P，Vassallo M，Montefort S.Association of asthma and allergic rhinitis with celiac disease.Indian J Gastroenterol，2005，24：270-271.

2Watson RG.Diagnosis of coeliac disease.BMJ，2005，330：739-740.

3马冬红，韩英.乳糜泻诊断的研究进展.胃肠病学，2014，19：309-311.

4郭红梅.2012年欧洲儿科胃肠肝脏营养学协会乳糜泻诊断指南.中华实用儿科临床杂志，2014，29：1118-1120.

5吴静，赵春.乳糜泻的回顾与展望.中国中西医结合消化杂志，2010，18：338-340.

6Ludvigsson JF，Sanders DS，Maeurer M，et al.Risk of tuberculosis in a large sample of patients with coeliac disease--a nationwide cohort study.Aliment Pharmacol Ther，2011，33：689-696.

7Ludvigsson JF，James S，Askling J，et al.Nationwide cohort study of risk of ischemic heart disease in patients with celiac disease.Circulation，2011，123：483-490.

8Catassi C，Gatti S，Fasano A.The new epidemiology of celiac disease. J Pediatr Gastroenterol Nutr，2014，59：S7-S9.

9Westerberg DP，Gill JM，Dave B，et al.New strategies for diagnosis and management of celiac disease.J Am Osteopath Assoc，2006，106：145-151.

10Zelnik N，Pacht A，Obeid R，et al.Range of neurologic disorders in patients with celiac disease.Pediatrics，2004，113：1672-1676.

11van Rijn JC，Grote FK，Oostdijk W，et al.Short stature and the probability of coeliac disease，in the absence of gastrointestinal symptoms. Arch Dis Child，2004，89：882-883.

12王歆琼，刘伟，徐俊杰，等.乳糜泻在中国慢性腹泻患儿中的发病情况.中华儿科杂志，2010，48：244-248.

13Nisihara RM，Kotze LM，Utiyama SR，et al.Celiac disease in children and adolescents with Down syndrome.J Pediatr（Rio J），2005，81：373-376.

14Dube C，Rostom A，Sy R，et al.The prevalence of celiac disease in average-risk and at-risk Western European populations：a systematic review.Gastroenterology，2005，128：S57-S67.

15Setty M，Hormaza L，Guandalini S.Celiac disease：risk assessment，diagnosis，and monitoring.Mol Diagn Ther，2008，12：289-298.

（本文编辑：杨军）

The application of anti-gliadin antibody and anti-endomysial antibody immunoglobulin A，immunoglobulin G levels detection in diagnosis of gluten sensitive enterpathy

YI Xun-fei，ZHANG Jing-lan，LIU Fei，et al.
Institute of Laboratory Medicine，Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command，Fuzhou 350025，China

ObjectiveTo evaluate the clinical value of anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA in the diagnosis of gluten sensitive enterpathy（GSE）.Methods35 cases GSE patients（GSE group）and 50 cases healthy people（healthy control group）were selected from August 2012 to September 2014 in our hospital.The levels of anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA were measured by ELISA method and indirect immunofluorescence method，respectively.All data were analyzed statistically.ResultsThe positive rates of anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA in GSE group were 25.7%（9/35），25.7%（9/35），14.3%（5/35）and 28.6%（10/35），respectively，which were all higher than that of healthy control group.And the differences all had statistical significance（Pall＜0.05）.The positive rates of anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA combined detection were 45.7%（anti-gliadin antibody IgG，IgA），37.1%（anti-endomysial antibody IgG，IgA）and 48.6%（anti-gliadin antibody IgG，IgA+anti-endomysial antibody IgG，IgA），which were all higher than that of healthy control group.And the differences all had statistical significance（Pall＜0.05）.Anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA had high specificity and positive predictive value in the diagnosis of GSE，but had low sensitivity.The highest specificity and positive predictive value were all 100.0%（anti-endomysial antibody IgG，IgA）.The sensitivity increased in combined detection of anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA，the highest was 48.6%（anti-gliadin antibody IgG，IgA+anti-endomysial antibody IgG，IgA）.ConclusionAnti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA combined detection can improve the sensitivity in the diagnosis of GSE，and reduce misdiagnosis.The GSE high risk group should detect anti-gliadin antibody IgG，IgA and anti-endomysial antibody IgG，IgA to screening and diagnosis.

Gluten sensitive enterpathy；Celiac Disease；Anti-gliadin antibody；Anti-endomysial antibody；Immunoglobulin

（2014-12-25）