补中益气汤对运动疲劳后大鼠肠道影响的实验研究
2015-08-20王蓓蓓王雪梅
王蓓蓓 王雪梅
关键词:补中益气汤;胃动素;离体肠管中图分类号:R285.5
文献标志码:A
文章编号:1007 - 2349( 2015) 02 - 0066 - 02补中益气汤出自金代李东垣的《脾胃论》,目前被公认为是治疗脾胃病及甘温除大热的代表方。主要药物组成为黄芪、人参、陈皮、柴胡、白术、升麻、当归、甘草(炙)。运动性疲劳是指在竞技运动过程中发生的一种疲劳症状,具有特殊的运动特色。中医把苦力、劳役、强力举重、持重运行、疾走等劳动或运动都称为“劳”,而竞技运动可视为一种比劳动强度更大的剧烈活动,由于活动强度大,对筋骨肌肉和脏腑功能的影响很大,精气和能量的耗损更大,更易引起疲劳。由于大负荷量运动能损耗机体精气血津液和能量物质,累及心肝脾肾等脏腑,导致运动能力下降,此与中医的“虚证”十分相似,故应将运动性疲劳归属于中医“劳倦”范畴。中医认为脾为后天之本,气血生化之源,脾主四肢肌肉,与运动关系密切。故补脾益气法是防治运动性疲劳的主要治法之一。而补中益气汤为代表方剂。本实验旨在说明不同剂量的补中益气汤对运动疲劳后大鼠肠道影响情况。1 实验材料1.1试验药物补中益气汤剂量参考:《方剂学》[1]。将8味药材洗净,第一次加8倍量水浸泡30 min,提取30 min,滤过;第2次加6倍水提取,滤过;合并两次滤液,静置沉淀,取上清液;继续煎熬浓缩,得浸膏,4℃冰储备用。使用时取补中益气汤浸膏,按照出膏率折算出生药量并称取相应重量。高、中、低剂量分别为每10 g体重0.102,0.034,0.011 g生药。1.2试剂 胃动素由北京华英生物技术研究所提供并进行放免检测。1.3实验动物成熟清洁级SD大鼠,体重200 - 250g,雌性,50只,标准饲养,饲料及垫料由购自昆明医学院实验动物中心。实验动物许可证号SCXK(滇)2011 - 004。1.4实验主要设备 Powerlab八通道生理信号记录系统,生产厂家:澳大利亚,ADlnstrument;型号:ML 118;名称:QuadBridge,Chart5分析软件;台式高速冷冻离心机,生产厂家:长沙湘仪离心机仪器有限公司,型号:TGL - 20M。2实验方法2.1实验分组取大鼠50只,雌性,按体重随机分为5组,每组10只。具体如下:第1组为空白对照组(以下简称空白组),第2组为运动组(以下简称运动组),第3组为先服用补中益气汤低剂量后运动组(以下简称低剂量组),第4组为先服用补中益气汤中剂量后运动组(以下简称中剂量组),第5组为先服用补中益气汤高剂量后运动组(以下简称高剂量组)。2.2实验方法5组大鼠实验前禁食12h,自由饮水。将第3、4、5组大鼠分别灌入补中益气汤低、中、高剂量。灌胃后将第2、3、4、5组大鼠分别在胸前挂一个约大鼠体重12%的重物后,置于长100 cm,宽50 cm,高50 cm的泳槽中游泳,当大鼠游至水从耳下淹到耳上,其身体下沉时,处于疲劳阶段后,将五组大鼠摘眼球取血,后处死,迅速剖腹,分离肠系膜。由十二指肠处轻轻剪取肠段,将肠段处理后放入台氏液中,并连接Powerlab八通道生物信号记录系统,待肠管收缩平稳后,观察肠管平滑肌活动曲线情况。对照观察结果的差异,使用sPss软件作出统计学处理。并将所取血液放置肝素抗凝试管中摇匀,4℃低温高速离心15min( 2000r/min),取上层血浆,于一20℃冰箱冻存,按放免规定进行操作。3实验结果3.1血浆胃动素(MTL)情况见表1。与空白组相比,运动组大鼠血浆MTL显著提高(P<0.05);与运动组比较,低、中剂量组大鼠血浆MTL均有不同程度的降低,其中中剂量组血浆MTL降低最明显,差异具有统计学意义(P<0.01);与运动组比较,高剂量组大鼠的血浆MTL有所增加,但差异不具有统计学意义(P>0.05)。3.2大鼠离体肠道平滑肌活动情况实验数据以平滑肌肌条标本收缩的振幅(g)、频率(Hz)表示。3.2.1 大鼠离体肠道平滑肌平均频率见表2。与空白组相比,运动组大鼠离体肠道平滑肌的平均频率明显提高(P<0.05);与运动组比较,低、中剂量组大鼠的离体肠道平滑肌平均频率均有不同程度的降低,其中中剂量组大鼠的离体肠道平滑肌平均频率显著降低(P<0.01);与运动组比较,高剂量组大鼠的离体肠道平滑肌平均频率有增加趋势,但统计无显著意义(P>0.05)。但与中剂量组比较,高剂量组大鼠的离体肠道平滑肌平均频率显著增加(P<0.01)。3. 2.2大鼠离体肠道平滑肌平均振幅见表3。与空门组相比,运动组大鼠离体肠道平滑肌的平均振幅显著提高(P<0.05);与运动组比较,低、中剂量组大鼠的离体肠道平滑肌平均振幅显著降低(JD<0.05,,)<0.01);与运动组比较,高剂量组大鼠的离体肠道平滑肌平均振幅显著增加(P<0.05)。4讨论
胃肠运动主要受肠神经系统支配和体液因素的影响。通过检测血液、下丘脑和胃肠局部组织中的胃肠激素含量的变化可反映胃肠运动机能状况。
胃动素( MTLilin MTL)是一种重要的胃肠激素,分布在大多数哺乳动物十二指肠近端,空肠粘膜隐窝中的上皮胃动素细胞,还存在于神经组织及垂体、下丘脑、大脑皮层、小脑中,也属于一种脑肠肽激素.MTL对消化道异型性收缩起重要作用,促进胃肠运动,提高胃肠道、胆道、oddis括约肌收缩力和张力。从实验结果看,大鼠负重游泳后,血浆胃动素水平平明显增加,可能胃动素使小肠运动明显加速 与运动组比较,低、中剂量组大鼠血浆MTL均有不同程度的降低,中剂量组血浆MTL降低最明显,表明中剂量补中益气汤可有效降低血浆中的MTL,可能胃动素会使小肠运动减缓,而补中益气汤高剂量的大鼠血浆MTL与运动组比较,虽然没有统汁学意义,但有增加趋势,不知是否与该组样本数量不够十个有关.这提示我们,补中益气汤对肠管平滑肌的调节可能与胃动素有关,并是否可进一步推测,不同剂量的补中益气汤对胃动素的释放有双向调节作用。
中药对胃肠运动功能的调节有双向调节作用[2]。补中益气汤由黄芪、升麻、柴胡、当归、白术、人参、陈皮、甘草组成有补中益气,升阳举陷之功效。有实验表明[3],补中益气汤对小肠动力的影响比较复杂.当小肠蠕动亢进时呈现抑制作用,张力降低且蠕动减慢;当小肠的运动处于抑制状态时,则出现促进肠管蠕动的作用。本实验利用生物信号记录系统,记录不同组别大鼠的离体肠管平滑肌收缩的振幅和频率变化情况,实验结果显示,与运动组大鼠离体肠道平滑肌的平均振幅和频率比空白组显著提高,表明经过负重游泳后形成疲劳的大鼠小肠运动明显加速,出现饮食物的消化和排泄的过速现象,也表明造模成功;低、中剂量组大鼠的离体肠道平滑肌平均振幅和频率与运动组比较显著降低,表明补中益气汤中、低剂量均可显著延缓运动后大鼠的加速的小肠运动,说明补中益气汤中、低剂量对于疲劳运动后所造成的胃肠道损伤有治疗作用;高剂量组大鼠的离体肠道平滑肌平均频率与运动组比较,有增加趋势,高剂量组大鼠的离体肠道平滑肌平均振幅与运动组比较显著增加,表明补中益气汤高剂量使运动后本米就加速的小肠运动更加快,说明补中益气汤高剂量对于疲劳运动后所造成的胃肠道损伤并无治疗作用,反而有可能加速小肠运动。根据以上离体实验结果,低、中剂量的补中益气汤能够延缓运动后大鼠的加速的小肠运动,而高剂量的补中益气汤能够使运动后大鼠的加速的小肠运动更加加快,是否可推测,不同剂量的补中益气汤对疲劳大鼠的肠道具有双向调节作用。参考文献:[1]段富津.方剂学[M].上海:上海科学技术出版社,1995,ll6.[2]汤斌.补中益气汤的实验研究进展[J].广东医院学报,1994,12(4):324-327.[3]李岩.补巾益气汤对小鼠胃肠运动双向调节作用和抗炎作用的研究[J].医药论坛杂志,2011,32( 22):l8-19(收稿日期:2014-10-07)