肉苁蓉多糖脱蛋白工艺的优化

肖道安

摘要：优选肉苁蓉多糖的脱蛋白工艺，为肉苁蓉多糖纯化提供试验依据。以脱蛋白率为指标，比较 Sevag法、酶法及酶-Sevag联合法对肉苁蓉粗多糖的脱蛋白效果，采用正交试验优选最佳工艺。结果表明，Sevag法优于酶法和酶-Sevag联合法，Sevag法脱蛋白的最佳工艺为：三氯甲烷与正丁醇的体积配合比4 ∶1，料液体积比1 ∶3，搅拌40 min，脱蛋白4次。在该工艺下平均脱蛋白率为87.11%，RSD为1.34%；平均多糖保留率为83.05%，RSD为154%。试验证明该工艺稳定可靠，适用于肉苁蓉多糖的纯化。

关键词：肉苁蓉多糖；脱蛋白；Sevag法；酶法；酶-Sevag联合法；正交试验

中图分类号：R284.2 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2015）07-0314-02

A：V三氯甲烷 ∶V正丁醇B：料液体积比C：搅拌时间（min）D：脱蛋白次数

13 ∶11 ∶3202

24 ∶11 ∶4303

35 ∶11 ∶5404

2 结果与分析

2.1 3种脱蛋白方法试验结果

从表2可知，Sevag法和酶-Sevag联合法脱蛋白的效率相对较高，而酶法多糖的保留率相对较高。这可能是因为肉苁蓉多糖中的蛋白质以游离型居多，结合型较少，Sevag法能更加有效地除去游离型蛋白质，而酶法主要酶解结合型蛋白质。2个因素综合考虑，Sevag法更适合于肉苁蓉多糖的脱蛋白工艺。

2.2 Sevag法正交试验结果

由表3的极差分析可知，Sevag法各因素对肉苁蓉多糖脱蛋白的影响顺序依次为A>C>D>B，即三氯甲烷与正丁醇的体积比影响最大，其次为搅拌时间、脱蛋白次数、料液比。Sevag法脱蛋白的最佳工艺为A2B1C3D3，即三氯甲烷与正丁醇的体积比为4 ∶1，料液体积比为1 ∶3，搅拌时间40 min，脱蛋白次数4次。这主要是因为随着搅拌时间的增加，Sevag试剂与蛋白质结合增多，脱蛋白率提高；脱蛋白次数的增加固然能提高脱蛋白率，但是多糖损失得也会更多，可能会造成综合效果不佳。对上述最佳工艺进行验证，重复操作3次，得出该工艺下平均脱蛋白率为87.11%，RSD为1.34%；平均多糖保留率为83.05%，RSD为1.54%。结果表明该工艺脱蛋白率高，综合效果良好。

3 结论

Sevag法适用于肉苁蓉多糖脱蛋白工艺，通过正交试验优选出肉苁蓉脱蛋白的最佳工艺为：三氯甲烷与正丁醇的体积配合比4 ∶1，料液体积比1 ∶3，搅拌40 min，脱蛋白4次。在该工艺水平下平均脱蛋白率为87.11%，RSD为1.34%；平均多糖保留率为83.05%，RSD为1.54%。试验证明该工艺稳定可靠，适用于肉苁蓉多糖的纯化。

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