张掖市小反刍兽疫免疫效果检测与分析

车小蛟 郭慧琳 何彦春 孟林明 李勇生 包永清

(1.甘肃省动物疫病预防控制中心，甘肃 兰州 730046；2.甘肃省张掖市动物疫病预防控制中心，甘肃 张掖 734000；3.甘肃省甘南州动物卫生监督所，甘肃 合作 744000)

小反刍兽疫（Pestedes petits ruminants,PPR）是由小反刍兽疫病毒（Pestedes petits ruminants virus,PPRV）引起的，以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征的急性接触性传染病[1]，山羊和绵羊易感，山羊发病率和病死率均较高。世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。

PPR主要通过直接接触传染，患病动物的排泄物和分泌物是主要传染源，尤其是感染后带毒的羊更为危险。该病常呈现地方流行性，当易感动物增多时，可造成爆发流行[2]。我国在2007年首次在西藏发现该病以来，先后在新疆、甘肃、贵州、湖南以及黑龙江等21个省、自治区、直辖市发生，给当地养羊业造成了巨大经济损失。我省自古浪县发生小反刍兽疫疫情以来，全省对14个市州重点区域的羊只进行免疫接种，构建免疫屏障。为掌握我省张掖市羊只注射小反刍兽疫疫苗后抗体水平情况，评估防控效果，为今后制定防控措施提供科学依据，特开展此次免疫效果检测与分析。

1 材料与方法

1.1疫苗和检测试剂

小反刍兽疫活疫苗由新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产，批号为201404；检测试剂为中国动物卫生与流行病学中心(青岛)提供的小反刍兽疫阻断ELISA抗体检测试剂盒，批号为201428。

1.2被检血清

采集张掖市6县（区）小反刍兽疫活疫苗免疫后21天的规模场（户）和散养户羊血样共1039份，离心分离血清，编号待检，-20℃保存。

1.3仪器

单道移液器、多道移液器、生化培养箱、洗板机（COLUMBUS）、酶标仪（TecanSunrise）、普通离心机、一次性移液器吸头等均由本单位实验室提供。

1.4检测方法

向酶标板阳性对照孔加入阳性血清50μL，阴性对照孔加入阴性血清50μL，酶标单抗对照孔加入稀释液50μL，样品孔每孔加入稀释液25μL，样品孔每孔加入待检血清25μL，37℃生化培养箱孵育60min。弃去反应孔的液体，用洗涤液洗4次，每次每孔300μL。每孔加入酶标单抗50μL，37℃孵育30min，用洗涤液洗4次。每孔加入底物溶液50μL，室温避光作用10-15min。最后，每孔加入终止液50μL，终止反应。用酶标仪在450nm波长下测定各孔OD450nm值，计算阻断率。

1.5判定标准

阳性对照阻断率（PB）＞60，阴性对照阻断率（PB）<40，试验结果有效；否则，应重新进行试验。待检样品阻断率（PB）＞50，判为阳性；待检样品阻断率（PB）≤50，判为阴性。

2 结果

对6个县（区）采集的1039份羊血清样品进行了小反刍兽疫免疫抗体检测，免疫抗体合格血清925份，平均合格率为89%，详见表1。

表1 2014年张掖市小反刍兽疫抗体检测结果

3 讨论

3.1张掖市各县（区）的样品小反刍兽疫免疫抗体平均合格率达到70%以上，达到了国家规定的大于70%的标准，其中4个县（区）的群体免疫密度达到90%以上。从数据上来看，张掖市小反刍兽疫免疫效果整体较好。由此可见，我们采取的防控措施是有效的，为本病的防控具有重要作用。

3.2本次试验是首次对张掖市羊只进行PPR疫苗强制性免疫接种后的抗体合格率检测。本次使用新疆天康畜牧生物技术股份有限公司的PPR活疫苗对本辖区内的各种健康羊只进行免疫接种，接种后未见PPR新病例和不良接种反应，表明PPR活疫苗的副作用小，安全可靠。

3.3当前，对小反刍兽疫尚无有效的治疗措施，疫苗免疫是最为有效的手段之一[3]。在防疫工作中，要严格按照本地区动物疫病流行情况制定科学有效的免疫方案，切实做好小反刍兽疫的免疫工作,及时开展抗体检测,认真做好补免工作,确保有效保护。

3.4加强监测与流行病学调查[4]。在高风险区要主动监测，对不明原因羊只死亡和临床可疑羊要进行检测、诊断，对疑似疫情要快速采样确诊。

3.5野生动物亦是小反刍兽疫疫病的易感动物，因此，严密监控易感野生动物的活动，加大在野生小反刍兽群的迁移路线周围及野生小反刍兽群活动区域羊只的监测和免疫，防止带毒野生动物向家养畜传播，做好相关工作。

3.6加强宣传教育，进一步强化养殖户的防疫责任，让养殖户全面了解小反刍兽疫的危害和防疫的必要性，提高养殖户依法防疫、自觉防疫的意识。

[1]李佳,何宗霖,白正辉,等.新疆阿克苏地区羊小反刍兽疫免疫效果检测与分析[J].草食家畜,2015（4）:49-51.

[2]何利昆,段亚良,谷志大.辽宁省小反刍兽疫疫苗临床免疫效果跟踪试验及抗体水平动态观察[J].现代畜牧兽医,2014（8）:14-18.

[3]祁巧芬.小反刍兽疫免疫效果监测报告[J].当代畜牧，2015（6）:29-18.

[4]谷修萍,杨翠红,高代宏.小反刍兽疫流行特点及其防控策略[J].中国畜牧兽医文摘,2014（12）:87.