不同包衣维C银翘片中对乙酰氨基酚体外溶出度比较研究

安斯扬，胡芳，蒋坤，李星，阳璘魁，潘玉杰，

1.贵州百灵企业集团制药股份有限公司，贵州 安顺 561000；2.贵州大学生命科学学院，贵州 贵阳 550025

维C银翘片是由金银花、连翘、对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏、维生素C等13味药组成的中西复方制剂，具有疏风解表、清热解毒的功效[1]。现将维C银翘片糖衣片改薄膜衣片后，为了确保药品的一致性，针对它们同为固体口服制剂的共性，拟通过药物的体外溶出度来预测其体内的行为[4]。本文以本公司已上市销售的维C银翘片糖衣片为参照，对糖衣片、薄膜衣片进行体外溶出度曲线考察，以对乙酰氨基酚为其中一项考察指标，考察产品在溶出时间内的累积溶出情况，进而计算比较维C银翘片薄膜衣片和已上市的维C银翘片糖衣片药品质量的一致性。

1 仪器与试样

1.1 仪器 Agilent Technologies 1260 In f i nity高效液相色谱仪(G1314F 1260VWD检测器)，ZRS-8G溶出试验仪(天津市天大天发科技有限公司)。

1.2 对照品 对乙酰氨基酚化学对照品(购自中国食品药品检定研究院，纯度：100.0%，批号10018-200408)；

1.3 供试品 维C银翘片糖衣片供试品(批号：20120219、20120220、20120221)、维C银翘片薄膜衣片供试品(批号：101101、101102、101201)、维C银翘片糖衣片阴性样品(不含对乙酰氨基酚)、维C银翘片薄膜衣片阴性样品(不含对乙酰氨基酚)，均为贵州百灵企业集团制药股份有限公司生产。

1.4 试剂 甲醇(HPLC，TEDIA)；纯净水(娃哈哈)；冰醋酸(AR 500m L/瓶，上海申博化工有限公司)；盐酸(AR 500m L/瓶，重庆川东化工(集团)有限公司化学试剂厂)

2 方法与结果

2.1 样品含量测定 参照中国药典[1]方法，并对1.3项中的供试品的含量先进行测定，结果表明，维C银翘片糖衣片每片含对乙酰氨基酚(C8H9NO2)95.4～95.9m g，维C银翘片薄膜衣片每片含对乙酰氨基酚102.8～103.5mg，均符合规定 [即每片含对乙酰氨基酚(105mg)应为标示量的90%～110%]。

2.2 溶出条件 以0.1m o l/L的500m L HCL为溶出介质，温度控制在37℃±0.5℃，转速75r/m in[2-3]，供试品进入释放池瞬间开始记时，糖衣片在127m in、薄膜衣在120m in时取样3m L，立即过滤，取续滤液10μL进样，通过HPLC测定其峰面积及其含量。

2.3 溶出度测定方法的建立

2.3.1 对照品的制备 取对乙酰氨基酚对照品适量，加0.1mol/L的HCL溶液溶解并稀释成每m L含对乙酰氨基酚86.8 μg的溶液。

2.3.2 测定波长的选择 取2.3.1项下对乙酰氨基酚对照品溶液在190～900nm下进行全波段的扫描，最大吸收波长是249nm。

2.3.3 色谱条件 Agilent Technologies 1200 series高效液相色谱仪(G1315D DAD检测器)，色谱柱为Dikma C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为甲醇-0.5%冰醋酸溶液(20:80)；检测波长249nm；柱温为25℃；流速为1m L/m in；进样量10μL。理论塔板数按对乙酰氨基酚计算应不低于1500。在此色谱条件下测定对乙酰氨基酚对照品、样品、空白样品。

2.3.4 专属性试验 取维C银翘片糖衣片供试品、维C银翘片薄膜衣片供试品、维C银翘片糖衣片阴性样品、维C银翘片薄膜衣片阴性样品各一片，按照2.2项溶出条件制备溶出供试品溶液，以对乙酰氨基酚对照品溶液为参照，通过HPLC测定。在相同的保留时间下，维C银翘片糖衣片和薄膜衣片的供试品溶液可检出对照品对应的色谱峰，阴性溶液检不出对照品相应的色谱峰，说明专属性良好，见图1。

图1 对乙酰氨基酚对照品Fig1 The HPLC chromatogram chart

2.3.5 线性关系考察 精密称取对乙酰氨基酚对照品适量，制成316μg/m L的对照品储备液W 1；精密量取W 1适量，制成浓度为0.32，6.32，15.80，31.60，94.80，158.00，252.80，316.00μg/m L的溶液，经HPLC测定，以对乙酰氨基酚的浓度C(μg/m L)为横坐标(x)，以相应的峰面积A为纵坐标(y)，进行线性回归。回归方程为y=36.876x+6.8619，r=0.9999，其线性范围为0.0032 μg～3.1600 μg。

2.3.6 准确度试验 取维C银翘片糖衣片阴性样品、维C银翘片薄膜衣片阴性样品各6份，每份一片，并精密称取对乙酰氨基酚对照品12份，每份105m g，待用。按照2.2项溶出条件，将一片阴性样片和一份对乙酰氨基酚对照品同时放入释放池，并同时开始记时，糖衣片在127m in、薄膜衣在120m in时取样3m L，立即过滤，取续滤液10μL进样，通过HPLC测定其峰面积及其含量，糖衣片、薄膜衣片加样回收率平均值分别为100.7%、100.8%，RSD分别为0.20%、0.26%，可知供试品在该色谱条件进行测定的准确度高。

2.3.7 精密度试验

2.3.7.1 仪器精密度试验 取2.3.1项下制备的对乙酰氨基酚对照品溶液，将其连续进样6次，测定对乙酰氨基酚的峰面积平均值为3403.8±3.69，RSD=0.1%，表明本仪器的精密度良好。

2.3.7.2 方法精密度试验 取维C银翘片糖衣片和薄膜衣片的供试品各一片，按照2.2项溶出条件制备溶出供试品溶液，取同一供试品溶液连续进样6次。结果表明，在溶出介质中，维C银翘片糖衣片中的对乙酰氨基酚峰面积平均值为8235.5±5.95，RSD=0.07%，维C银翘片薄膜衣片中的对乙酰氨基酚峰面积平均值为8545.6±5.12，RSD=0.06%，表明本试验方法的精密度良好。

2.3.8 重复性试验 取同一批号的维C银翘片糖衣片和薄膜衣片样品各5份，每份一片，按照2.2项溶出条件制备溶出供试品溶液。结果表明，在溶出介质中，维C银翘片糖衣片中的对乙酰氨基酚峰面积平均值为8197.2±29.2，RSD=0.36%，其平均溶出量104.4～105.1m g/片；维C银翘片薄膜衣片中的对乙酰氨基酚峰面积平均值为8596.7±29.9，RSD=0.35%，其平均溶出量109.5～110.2m g/片，表明本试验重复性良好。

2.3.9 稳定性试验 取维C银翘片糖衣片和薄膜衣片的供试品各一片，按照2.2项溶出条件制备溶出供试品溶液，取同一供试品溶液，分别在0，2，4，8，12，18，24h进样。结果表明，在溶出介质中，维C银翘片糖衣片中的对乙酰氨基酚峰面积平均值为7756.4±59.45，RSD=0.77%，维C银翘片薄膜衣片中的对乙酰氨基酚峰面积平均值为8186.8±53.71，RSD=0.65%，表明本试验条件下的供试品溶液在24 h内稳定。

2.3.10 耐用性试验 取同一批号的维C银翘片糖衣片和薄膜衣片供试品各一片，按照2.2项溶出条件制备溶出供试品溶液，通过对其进行耐用性试验的考察，结果得知：其在不同流速、不同流动相比例、不同柱温、不同检测波长、不同色谱柱、不同检测设备条件下，经HPLC含量测定结果稳定。

2.3.11 滤膜干扰试验 取2.3.1项下制备的同一对乙酰氨基酚对照品溶液，考察经0.45μm滤膜过滤前后，峰面积的变化情况。结果表明，使用滤膜过滤不会对对乙酰氨基酚的含量测定造成干扰。

2.4 溶出度实验

2.4.1 溶出曲线均一性的考察 取同批次的维C银翘片糖衣片、薄膜衣片供试品各6片，以2.2项为溶出条件，分别在设定的采集时间(见2.4.2)取溶液3m L(不补液)，立即过滤，取滤液10μL进样，在2.3.2项下通过HPLC测定峰面积，计算各样品中对乙酰氨基酚在各个时间点的累积溶出量(m g)及其相应的累积溶出率(%)、同批次供试品的平均累积溶出率(%)。

2.4.2 时间点采集 自样品进入释放池瞬间开始记时，以包衣层脱落作为取样时间点，为取样采集时间点的第0m in。薄膜衣片溶出2m in后，其包衣层基本脱落，选取溶出1m in、2m in、3m in测定其对乙酰氨基酚百分含量：1m in时溶出0.78%、2m in溶出1.16%、3m in溶出7.56%；糖衣片溶出约9m in后，其包衣层基本脱落，选取5m in、8m in、9m in测定其对乙酰氨基酚百分含量：5m in时溶出0、8m in溶出0.20%、9m in溶出5.23%。因此糖衣片从9m in、薄膜衣片从2m in起分别记作相似性考察的采集时间点第0分钟，考察两者第0，3，6，8，10，13，18，23，28，38，48，58，73，88，118分钟所采集样品的情况。

2.4.3 溶出曲线的批间差异 统计各取3批维C银翘片糖衣片、薄膜衣片供试品，按照2.4.1项下溶出曲线均一性的考察，进行样品制备及测定，结果见表1和图2。

2.4.4 不同规格的体外溶出曲线 相似性考察将上述

2.4.3项下所得的维C银翘片糖衣片的平均累积溶出率Rti作为参照，将维C银翘片薄膜衣片的平均累积溶出率Tti作为考察对象，分别对三个批次的供试品进行考察，根据FDA判定溶出度曲线相似性的相似因子比较法——计算差异因子f1和相似因子f2，考察两种规格间化药成分对乙酰氨基酚的平均累积溶出曲线的相似性[5-6]，见表2。

其中n为时间点个数，R t为参照批次(改变前)药品在时间t的溶出度值，T t为试验批次(改变后)药品在时间t的溶出度值。

表2 维C银翘片糖衣片、薄膜衣片对应采样时间点对乙酰氨基酚平均累积溶出率曲线相似性比较结果Tab2 The average cumulative solubility curve sim ilarity of acetaminophen between the sugar-coated tablets and film-coated tablets of Vitamin C Yinqiao Tablet

图2 三批次维C银翘片糖衣片、薄膜衣片对应采样时间点对乙酰氨基酚的平均累积溶出率曲线相似性比较图Fig2 The average cumulative dissolution curve similarity comparison chart of acetam inophen in three batches of sugar-coated tablets and film-coated tablets of Vitam in C Yinqiao Tablet

3 结论

本文是为了模拟维C银翘片在人体的溶出条件，因此采用0.1m o l/LHCL溶液作为溶出介质。考虑到溶出曲线绘制需要从0m in开始采样的特点，开始时浓度较小，为利于含量测定，故采用溶出介质的体积为500m L。经试验500m L介质满足漏槽条件。通过数据得知：以供试品进入释放池瞬间开始记时，维C银翘片糖衣片、薄膜衣片在60m in内对乙酰氨基酚的溶出率均在85%左右；糖衣片在97m in、薄膜衣片在90m in的溶出率趋于99%，鉴于对乙酰氨基酚的含量比较稳定，试验组将总溶出时间设定为糖衣片127m in、薄膜衣片120m in。此外，浆法转速一般为50～75r/m in，通过对比，发现50r/m in时片剂有堆积现象，而采用75r/m in时则没有，因此采用75r/min。

本公司的维C银翘片薄膜衣生产工艺与已上市的维C银翘片糖衣片的片芯生产工艺基本一致，但由于包衣材料的不同，薄膜衣片的溶出在开始阶段略快于糖衣片。但通过比较糖衣片和薄膜衣片中对乙酰氨基酚的溶出曲线，其体外溶出行为相似，没有显著差异。

试验结果表明，本试验提供的体外溶出曲线的采集方法稳定性好；经过三批次验证，该方法可行性、重现性良好。

[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典(2010年版一部)[S]. 北京: 中国医药科技出版社, 2010. 1139-1141.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(2010年版二部)[S].北京: 中国医药科技出版社, 2010.附录85-88.

[3] 郭怀忠, 庞晓敏, 王进文, 等.高效液相色谱法测定维C银翘片溶出度的研究[J]. 中成药, 2011, 7(33):1178-1182.

[4] FDA. Guidance for Industry Dissolution Testing of Immediate Rslease So lid O ral Dosage Form s[OL].h ttp://www.fda.gov/downloads/drugs/guidancecom plianceregulatoryinformation/guidances/ucm070237.pdf.

[5] 张启明, 谢沐风, 宁保明, 等. 采用多条溶出曲线评价口服制剂的内在质量[J]. 中国医药工业杂志, 2009, 40(12): 946-951.

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