结肠靶向滴丸克癌素包衣工艺及释放性能研究

张 璐，于 莹，谢 宁，马 伟，董培良，张晓燕

(1.黑龙江中医药大学中医药研究院，哈尔滨150040;2.黑龙江中医药大学附属第一医院，哈尔滨150040;3.黑龙江中医药大学科技产业处，哈尔滨150040)

利用槲皮素和姜黄素(配伍质量比35∶20)[1]作为药效成分，为克服pH依赖型个体差异大的缺点，基于胃肠道pH值逐渐升高这一生理特征，设计了用乙基纤维素水分散体(Surlease)和FS30D为包衣材料，制备了一种新型的pH－时间依赖型结肠定位滴丸给药系统.

1 实验材料

95%乙醇(哈尔滨市欣达化工厂);实验中色谱分析用水为娃哈哈纯净水，甲醇(DikmaPure，色谱醇);其他试剂均为分析纯.

2 方案与结果

2.1 丸芯处方与工艺研究

丸芯制备方法:取辅料90 g PEG4000、30 g PEG6000、泊洛沙姆 1.2 g，混合，微热使溶解，搅拌下加入姜黄素8.727 3 g，槲皮素15.272 7 g充分搅匀，加热至88℃，迅速移至已预热至恒温的滴头(滴口内外径为 4.5、5.0 mm)内，保温 10 min，以20滴/min左右的速度，滴入液体石蜡冷却液中，连续制备3批样品，丸重为42 mg，每丸直径约为0.4 cm，表面圆整平滑，证明工艺稳定性良好.

2.2 正交实验优化包衣处方

采用L9(34)正交设计方案将9个处方的包衣滴丸分别在人工胃液和人工肠液中进行释放度试验，以累积释药百分率考察指标，确定出最佳的包衣处方.实验安排及结果见表1～3.

表1 因素与水平表

表2 L9(34)正交试验及结果

表3 正交实验方差分析表

由累积释药百分率计算得各水平极差值表明，因素A、B、C对实验有显著性影响.其主次关系为:C＞B＞A.经综合分析，筛选出最佳包衣处方为C3B3A1，即缓释层Surelease与HPMC 比例为15∶6，缓释层聚合物增重百分数为4%，肠溶层FS30D增重百分数为20%.经反复验证，重复性良好.

2.3 释放度测定

2.3.1 包衣液的配制

1)隔离层的配制

取适量HPMC为包衣材料，溶于95%乙醇中，混合均匀，水浴加热使溶解.

2)缓释层的配制[2]

将HPMC适量溶于蒸馏水中，放置24 h后得澄清溶液，然后和质量浓度为0.25 g/mL的Surelease混合，加适量的蒸馏水，搅拌均匀即得缓释层水分散体包衣液.此时Surelease的质量浓度为0.15 g/mL，HPMC的质量浓度为0.015 g/mL.

3)肠溶层的配制

将30%的FS30D加适当的蒸馏水配成质量浓度为0.1 g/mL的水分散体，搅拌均匀，即得肠溶层水分散体包衣液.

2.3.2 释放介质(人工胃液、人工肠液、人工结肠液)的制备[3]

1)人工胃液的配制

取稀盐酸16.4 mL，加水约800 mL，再加入胃蛋白酶3.2 g，摇均后，加水稀释至1 000 mL，即得.

2)人工肠液的配制(pH=6.8)

取磷酸二氢钾6.8 g，加水500 mL使溶解，用0.1 mo1/L氢氧化钠溶液调节溶液的pH至6.8;另取胰酶l0 g，加水适量使溶解，将两液混合后，加水稀释至1 000 mL，即得.

3)人工结肠液的配制(pH=7.6)

取磷酸二氢钾27.22 g，加水使溶解成1 000 mL，取 50 mL，加 0.2 mo1/L 氢氧化钠溶液 42.4 mL，再加水稀释至200 mL，即得.

2.3.3 采用浆法研究包衣滴丸的体外释放行为[4]

将包好的包衣滴丸称量6份，每份10粒.分别放于6个溶出杯中.保持转速75 r/min，温度(37±0.5)℃，模拟包衣滴丸在胃肠道中转运时间的释药情况.先在500 mL的人工胃液中释放2 h，于2 h时取样20 mL，在500 mL人工肠液中继续释放3 h，于5 h时取样20 mL;最后在500 mL人工结肠液中继续释放10 h，分别于第7、9、11、13、15 h 时各取样5 mL，同时补充相应的溶出介质，将各个取样点挥干后适量甲醇溶解，0.45 μm微孔滤膜过滤后，定容至5 mL.以甲醇为空白，紫外分光光度法测定其吸光度[5]，测定不同取样点溶出介质中的药物浓度，通过标准曲线，计算出不同时间的释放度和累积释放百分率.其中:Ci，Cn为溶出介质中药物的浓度;Vi为取出介质的体积;V为溶出介质的总体积;W为滴丸的重量;D为滴丸中药物的百分含量.

3 结果

释放度结果见表4、图1.

表4 累积释放率数据表(n=3)

图4 释放度曲线图

所得结肠靶位包衣滴丸在人工胃液中2 h内无变化，不受胃排空的影响;在人工肠液中2 h后开始释放，3 h释放4.3%;在人工结肠液中7～8 h内溶胀为球型，然后破裂崩解，10 h内达到累积释药百分率为90.12%，符合释放要求.

4 结语

pH值为7.6的FS30D缓释层包衣材料Surelease是水分散体，可与制孔剂HPMC进行配比，此混合液包衣后形成的衣膜在水中不溶，但能溶胀，形成孔道，药物可通过这些孔道释放，是本实验靶向制剂的释药机制.因Surelease和FS30D内含增塑剂，故在包衣时未加入其他的增塑剂.

[1]张晓燕，徐增荣，胡红伟，等.结肠靶向滴丸克癌素抗肿瘤作用研究[J].中国医药导刊，2010，12(3):459－460.

[2]HU Z P，KIMURA G，MAWATARI S，et al.New preparation method of intestinal pressure2controlled colon delivery capsules by coating machine and evaluation in beagle dogs[J].J Cont rolled Release，1998，56(1):293－302.

[3]国家药典委员会.中国药典 2010年版(二部)附录XV D[M].北京:中国医药科技出版社出版，2010.

[4]MINAMI T，ABID M R，ZHANG J，et al.Thrombin stimulation of vascular adhesion molecule－1 in endothelial cells is mediated by protein kinase C(PKC)－delta－NF－Kappa B and PKC－zeta－GATA signaling pathways[J].J Biol chem，2003，278(9):6976.

[5]孙忠杨，于 莹，谢 宁，等.结肠靶向滴丸克癌素中槲皮素体内药动学研究[J].哈尔滨商业大学学报:自然科学版，2015，31(5):516 －519.