槐果碱缓释片的制备及工艺优选

商立新，李丽霞，王红月，赵 航，阎雪莹

(黑龙江中医药大学药学院，哈尔滨150040)

槐果碱(sophocarpine)是苦参中的有效成分之一，弱碱性，脂溶性强，具有抑制中枢神经、抗癌、平喘、镇痛抗炎等药理作用[1].槐果碱(SP)的分子式为C15H22N2O，结构式如图1.临床用于慢性支气管哮喘[2]，具有较好的平喘疗效，是一种新型的平喘药物.由于槐果碱脂溶性强，体内吸收差，生物利用度较低，导致口服给药疗效较差，大大限制了它在临床上的应用[3－6].临床数据显示[7－8]，槐果碱每天服用剂量为80 mg，每天1片，每日4次，做成缓释片后可以减少给药剂量和给药次数.口服缓释片剂是目前国内外医药发展的重要方向，缓释制剂可延长药物在体内的释放、吸收、分布、代谢和排泄，从而达到延长药物作用的目的，缓释片能够减少给药次数，特别适用于需要长期服药的慢性疾病患者(如心血管疾病、高血压、哮喘等);使血药浓度平稳，避免“峰谷”现象，有利于降低药物的毒副作用，减轻胃肠道不良反应，提高药物的安全性和有效性，从而提高药物的生物利用度.本实验通过研制以羟丙甲基纤维素(HPMC)为缓释辅料，雅克宜(ACRYL－EZE)为肠溶包衣材料，制得稳定性好、体内生物利用度高的槐果碱缓释片，提高药物疗效、减少患者服药次数，提高患者服药顺应性，降低药物的毒副作用的目的.为慢性支气管哮喘的临床治疗提供缓释片剂方面必要的研究资料.

图1 槐果碱结构式

1 仪器与试剂

Waters e2695型高效液相色谱仪(美国Waters公司 );电子天平(Sartorius BT25S，德国 Sartorius公司);电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司);KQ5200DB数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);单冲打片机DP/30(北京国药龙立科技有限公司);D－800型智能药物溶出仪(天津大学精密仪器厂);BY－300A型小型包衣机(上海金鹏仪器有限公司).

槐果碱原料药(质量分数≥98%，西安小草植物科技有限公司);槐果碱对照品(质量分数≥98%，上海顺勃生物技术有限公司);三乙胺(广州帝杰科技有限公司);甲醇(色谱纯，DIKMA公司);其他试剂均为分析纯.微晶纤维素(MCC)(上海昌为医药辅料技术有限公司);HPMC(K4M，K15M，K100M)(日本信越公司);乳糖(沈阳市华东试剂厂);邻苯二甲酸二乙脂(DEP)(阿拉丁公司);欧巴代(上海卡乐康公司);雅克宜(上海卡乐康公司);丙烯酸树脂(日本信越公司).

2 方法和结果

2.1 槐果碱缓释片的制备

2.1.1 制备工艺

基础处方 SP 80mg、HPMC K15M 120mg、乳糖40mg、MCC60mg，95%乙醇为黏合剂，过40目筛、烘干、整粒，通过对释放度的考察，湿法制粒压片法制得缓释片的堆密度及休止角均小于粉末直接压片组，流动性相对较好;且后者有突释现象，所以选用湿法制粒压片法.

2.1.2 释放度测定

色谱条件色谱柱:Dikma Diamonsil(钻石C185 μm，250 ×4.6 mm);检测波长:215 nm;流动相:甲醇－水(0.1‰三乙胺)(65∶35);流速:1 mL/min;柱温:30 ℃;进样量:10 μL.

释放度测定方法:按中国药典2000版附录XB和XIXD(缓释、控释和迟释制剂指导原则)，采用转篮法，以900 mL人工胃液为释放介质，在转速100 r/min，温度37 ℃条件下，于2、4、6、8、10、12 h，分别取溶出介质2 mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，同时补充等体积等温的溶出介质，取滤液作为供试品溶液.采用高效液相色谱法测定溶液中含槐果碱量，计算出缓释片在不同时间点的释放量.

2.2 单因素考察

1)亲水凝胶骨架种类选择:固定处方中其他条件不变，分别以HPMC K4M、K15M、K100M为亲水凝胶骨架，按照“2.1.1”项下的制备方法，以有无突释现象及溶出率为考察指标，见图1.结果表明:K4M组溶出率最大为98.77%且无突释现象，选用HPMC型号为K4M.

2)亲水凝胶骨架含K4M量选择:固定槐果碱含量80 mg，保持片重300 mg，乳糖∶MCC(2∶3)，使K4M的用量分别占片重的40%、35%、30%、25%压片，筛选含K4M量，见图2.结果表明:30%组12 h溶出率相对最大为95.41%，无突释现象，选用含K4M量占片重的30%，即90 mg.

3)填充剂种类及选择:固定含槐果碱量80 mg、K4M 90 mg，保持片重 300 mg不变，分别以乳糖，MCC为填充剂，以溶出率为考察指标，见图3.结果表明:全乳糖组溶出率最大为98.39%，无突释现象，选乳糖130 mg为填充剂.

4)亲水凝胶骨架K4M和乳糖比例的选择:固含定槐果碱量80 mg，保持片重300 mg不变，考察K4M和乳糖比例，见图4.结果表明:K4M90乳糖130组溶出率较大为98.39%，无突释现象，选用二者比例为K4M 90 mg，乳糖130 mg.

图1 凝胶骨架对药物释放的影响

图2 HPMC K4M用量对药物释放的影响

图3 填充剂对药物释放的影响

图4 K4M和乳糖对药物释放的影响

5)黏合剂种类的选择

槐果碱 80 mg、K4M 90 mg、乳糖 130 mg，分别以85%、95%、无水乙醇为黏合剂，以堆密度，休止角及颗粒状态为考察指标，结果见表1.

3.3 假设检验 由于样本是随机的且是独立同分布的，因此线性回归的方法可以来检验农业品牌真实性与网络口碑及顾客价值共创意愿等变量之间的关系。

表1 黏合剂对药物释放的影响

结果表明:以95%乙醇为黏合剂颗粒状态及流动性较好，选用95%乙醇为黏合剂.

2.3 肠溶包衣工艺研究及优化

2.3.1 未包衣缓释片的释放度考察

采用“2.2.2”项的最佳工艺制备槐果碱缓释片，在释放度实验的前2 h以人工胃液为释放介质，而后的12 h均以脱气蒸馏水为释放介质，采用“2.1.2”项下方法进行实验，考察包衣工艺对缓释片释放度的影响，见图5.结果表明:未经包衣处理的缓释片释放缓慢，14 h的累计释放度小于50%，不符合缓释要求.表明槐果碱在胃酸中不稳定，易被破坏.考虑对缓释片进行肠溶包衣处理，以抵抗胃酸侵蚀，保护药物.

2.3.2 肠溶包衣溶液的配制

雅克宜包衣液:称取雅克宜粉末10 g，定容至40 mL蒸馏水中，在25℃下搅拌30 min，即得20%的包衣液.

欧巴代包衣液:称取欧巴代粉末5 g，定容至50 mL的85%乙醇中，在25℃下搅拌40 min，即得10%的包衣液.

丙烯酸树脂 L100包衣液:称取 L1002.5 g，以50 mL的95%乙醇为溶剂，在25℃下缓慢加入L100搅拌，之后再缓慢加入用量为L10020%的DEP，继续搅拌过夜，即得5%的L100包衣液.

丙烯酸树脂S100包衣液:称取 S1002.5 g，以50 mL的95%乙醇为溶剂，在25℃下缓慢加入S100搅拌，之后再缓慢加入用量为S10020%的DEP，继续搅拌过夜，即得5%的S100包衣液.

2.3.3 单因素考察

1)缓释片芯增重百分比的考察

采用“2.3.2”项配制雅克宜溶液，保持其他条件相同，使缓释片芯分别增重 7%、9%、10%、12%.以14 h累积释放率为主要考察指标，见图6.结果表明:包衣增重在7% ～12%范围内时，片芯的成膜性能良好，外观平整均匀，综合考虑选择7%、9%及10%进行筛选.

2)包衣转速的考察

采用“2.3.2”项配制的雅克宜溶液，保持其他条件相同，使包衣机转速分别为20、30、40、50 r/min.以14 h累积释放率为主要考察指标，见图7，结果表明:转速为30～50 r/min时，包衣外观平整均匀，累积释放率较好，约为96%，优于20 r/min时的包衣效果，综合考虑选择30、40、50 r/min进行筛选.

3)进风温度的考察

采用“2.3.2”项配制的雅克宜溶液，保持其他条件相同，使进风温度分别为30、40、50、60℃.以14 h累积释放率为主要考察指标，进行包衣进风温度的考察，见图8，结果表明:温度为40～60℃时，包衣外观光滑均匀，累积释放率较好，约为95%左右，优于30℃时的包衣效果，综合考虑选择40、50、60 ℃进行筛选.

图5 未包衣缓释片溶出曲线

图6 片芯增重百分比筛选的溶出曲线

图7 包衣转速筛选的溶出曲线

图8 包衣温度筛选的溶出曲线

2.3.4 正交设计优化

通过单因素考察，选用对包衣释放影响较大的片芯增重、进风温度，转速为因素，采用三因素三水平L9(34)的正交设计方案，每个因素取三个水平，见表2.

表2 因素水平表

直观分析结果表明:最优水平为:A1B2C2，各因素对溶出速率常数的影响程度为A＞B＞C.

2.3.5 槐果碱缓释片的最佳处方工艺

SP 80 mg;K4M 90 mg;乳糖130 mg;95%乙醇;20%雅克宜，温度40℃，转速40 r/min，增重9%，成功制备槐果碱缓释片

2.3.6 最佳处方验证

分别称取K4M 90 mg;乳糖130 mg;SP 80 mg为处方，采用湿法制粒压片法制备缓释片芯;20%雅克宜，温度40℃，转速40 r/min，增重9%的条件下进行包衣处理，得到槐果碱缓释片剂.释放度实验的前2 h以人工胃液为释放介质，而后的12 h均以脱气蒸馏水为释放介质，采用“2.2.1”项释放度测定方法进行实验，制备的槐果碱缓释片溶出趋势稳定且14 h累积溶出率均达到90%以上，说明其具有良好的缓释特性，符合缓释要求.

3 讨论

目前常用的亲水性凝胶辅料主要有羟丙甲纤维素(HPMC)、羟丙纤维素(HPC)、甲基纤维素(MC)等，本文选用HPMC为亲水凝胶骨架.结果表明，随着HPMC黏度增加，药物扩散速度减慢，HPMC K100M的黏度过大，片剂释放缓慢.HPMC K15M比HPMC K4M的粘度较适合，释放度较小，选择HPMC K4M为亲水凝胶骨架材料.雅克宜是水性丙烯酸树脂，具完全配方包衣系统的优点且很容易配制，能在30 min内溶于水，并在胃内的常态及高胃酸pH环境中提供肠溶保护.以水作为溶剂，无毒害、成膜迅速、均匀、光滑、包衣效果好，综合考察决定以雅克宜作为包衣材料.在肠溶包衣试验中，进风温度对包衣质量的影响相对较大，温度过高，易使包衣液迅速干燥，不易形成连续均匀的膜;温度过低时，易使干燥太慢，导致粘连及气泡现象，从而影响包衣外观及质量.

未经包衣处理的槐果碱缓释片芯，在释放度实验的前2 h以人工胃液为释放介质，而后的12 h均以脱气蒸馏水为释放介质的条件下进行释放度实验，结果14 h累积释放度仅是包衣缓释片累计释放度的1倍，为了使其释放缓慢所以需要对制备的缓释片芯进行包衣处理.

[1]陈雯雯，罗章源，陈颖敏，等.槐果碱抗乌头碱诱发大鼠心律失常及其作用机制[J].中国新药与临床杂志，2011，30(12):947－949.

[2]孙 明.支气管哮喘临床药物治疗进展[J].河北医药，2004，26(7):581－582.

[3]黄峥慧，林挺岩.支气管哮喘治疗药物简述[J].临床肺科志，2007，12(3):249－251.

[4]陈曙霞，成 威，刘晶星，等.定量RT－PCR法对“苦参”在心肌炎模型中药效学研究[J].上海第二医科大学学报，2003，23(l):l－4.

[5]陈婷婷，陈曙霞，刘晶星，等.苦参总碱有效成分对柯萨奇B3m病毒细胞的保护作用[J].中国实验临床免疫学杂志，1997，9(l):18－21.

[6]廖慧丽.中医药治疗哮喘的临床观察和实验研究[J].广州:广州中医药大学，2001.

[7]李英衡，王建新，程 瑜.一种中枢性平喘药－氢溴酸苦甘草硷[J].论著与实验研究，1982，5(1):8－10.

[8]宋紫霞，周淑华，王来璋，等.静滴氢澳酸槐果碱治疗小儿支气管哮喘及喘息型支气管炎的疗效观察[J].陕西医学杂志，1999，19(12):22.