SOX2在结直肠癌表达的临床观察

付静 郭彦科 刘潜

北京市海淀医院（北京大学第三医院海淀院区）病理科，北京100080

SOX2在结直肠癌表达的临床观察

付静#郭彦科 刘潜

北京市海淀医院（北京大学第三医院海淀院区）病理科，北京100080

目的观察SOX2在结直肠癌组织的表达情况，探讨SOX2在结直肠癌中表达的临床意义。方法收集103例有60～125个月（中位随访时间84个月）随访资料的结直肠癌及其相应的正常结直肠黏膜标本，应用免疫组化方法检测SOX2的表达，分析SOX2表达与临床特征的关系。结果结直肠癌组织中SOX2蛋白的表达率显著高于癌旁正常肠黏膜（P＜0.001）；SOX2表达与结直肠癌分化程度显著负相关（P＜0.01），与结直肠癌TNM分期、淋巴结转移个数及远处转移程度正相关（P＜0.05）。SOX2表达与结直肠癌患者术后5年生存率和3年无瘤生存率也具有相关性（P＜0.05）。结论SOX2蛋白异常表达可作为提示结直肠癌预后判断的重要参考指标。

SOX2；结直肠癌；临床病理特征；预后

Oncol Prog,2015,13(4)

结直肠癌是全球常见的恶性肿瘤之一[1]。中国结直肠癌的发病率每年以4%的速度递增，年均增长速度高出世界平均水平近2%。2015年中国卫生统计资料显示结直肠癌的发病率和死亡率位居第三[2]。SOX2是一种核转录因子，被看作是胚胎干细胞的标记基因，存在于成人的许多正常组织中，如大脑、视网膜、舌、食管、肺和胃等。最近的研究表明，SOX2基因在许多恶性肿瘤中过表达，与恶性肿瘤的发生、发展密切相关。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集北京市海淀医院病理科2004年2月至2012年1月行结直肠癌根治术的212例患者并进行随访，随访时间截至2015年1月，获得131例患者的随访资料（随访率61.8%）。选取至2015年1月时已死亡和存活5年以上的患者共103例作为研究对象，其中男74例，女29例；手术时患者的年龄为24～95岁（平均年龄68岁，中位年龄71岁），手术时≤60岁者25例、＞60岁者78例。

全部病例重新阅片，并根据《美国癌症研究联合会癌症分期手册》（第7版）重新进行TNM分期；根据WHO标准分为黏液性癌（包括黏液腺癌和印戒细胞癌）和非黏液性癌两型，其中黏液性癌16例（包括11例黏液腺癌和5例印戒细胞癌），非黏液性癌87例。

所有病例均选取癌与癌旁正常黏膜交界处组织作为对照。

1.2 方法

1.2.1 随访 采用电话随访，记录患者的生存情况及复发、死亡时间。随访时间36～125个月（中位随访时间82个月）。

1.2.2 免疫组织化学染色 免疫组织化学染色采用MaxVision二步法。SOX2兔抗人单克隆抗体（效价1∶50）、即用型免疫组化MaxVision TM检测试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术公司，按照试剂盒的操作说明进行免疫组化染色。以SOX2阳性的肺鳞癌组织作为阳性对照。

1.2.3 结果评价 SOX2阳性表达部位为细胞核，细胞质及背景不着色。根据细胞核的阳性强度和细胞阳性率两项评分之和进行评价：①依据细胞核阳性强度计分：细胞核无着色记0分，细胞核着浅棕色（弱阳性）记1分，细胞核着棕色（阳性）记2分，细胞核着棕褐色（强阳性）记3分；②依据细胞阳性率计分：每张切片镜下随机选择5个高倍视野（×400），每个视野计数100个细胞，以细胞阳性率进行计分。无阳性细胞计0分，细胞阳性率≤25%计1分，25%～50%计2分，≥50%计3分。③将上述两项评分相加，结果≤2分者定为低表达，≥3分者定为高表达。

1.3 统计学分析

采用SPSS 20.0统计软件进行分析。各组SOX2阳性表达水平之间差异采用χ2检验进行统计学分析，双向有序数列的相关性采用Spearman秩相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 随访结果

截至2015年1月，入组患者中仍存活者37例（随访时间60～125个月，中位随访时间84个月），死亡者66例（术后存活时间1～87个月，中位时间18.5个月）；术后生存时间≤5年者61例，术后生存时间＞5年者42例；有明确复发资料者87例：术后无瘤生存期者≤3年者41例，术后无瘤生存期＞3年者46例。

2.2 SOX2蛋白在结直肠癌和癌旁组织中的表达情况

SOX2蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为39.81%（41/103），仅有1例癌旁正常肠黏膜有SOX2低表达，表达率为0.97%（1/103）。结直肠癌组织中SOX2蛋白的阳性表达率显著高于癌旁正常黏膜，且差异有统计学意义（χ2=48.042，P＜0.001）（。图1）

图1 SOX2在结直肠癌组织和癌旁组织的表达情况

2.3 SOX2蛋白在结直肠癌组织中的表达与临床特征的相关性

SOX2蛋白的表达水平与结直肠癌患者年龄及性别均无相关性（分别χ2=2.305，P=0.316；χ2= 0.666，P=0.717），与肿瘤分型无明显相关性（χ2= 1.069，P=0.586）。

SOX2蛋白的表达水平与结直肠癌分化程度呈负相关（rs=－0.231，P=0.019），TNM分期呈正相关（rs=0.204，P=0.039），结直肠癌淋巴结转移个数呈正相关（rs=0.275，P＜0.01），结直肠癌远处转移程度呈正相关（rs=0.263，P＜0.01）。（表1）

表1 SOX2蛋白在结直肠癌组织中的表达与临床特征的相关性

2.4 SOX2蛋白表达与结直肠癌患者术后5年生存率和3年无瘤生存率的相关性

入组患者术后5年生存率为40.8%（42/103）。SOX2表达情况与结直肠癌术后5年生存率有相关性，且差异有统计学意义（χ2=6.872，P=0.032）。（表2）

表2 结直肠癌组织中SOX2蛋白表达情况与术后5年生存期的关系

87例有明确复发证据资料的病例中，术后3年无瘤生存率为52.9%（46/87）。SOX2表达情况与结直肠癌术后3年无瘤生存率有相关性，且差异有统计学意义（χ2=6.357，P=0.042）。（表3）

表3 结直肠癌组织中SOX2蛋白表达情况与术后3年生存期的关系

3 讨论

SOX2是SOX家族重要成员之一，参与正常组织细胞增殖发育、分化和自我更新的调节过程。SOX2突变和表达异常与多种肿瘤的发生、发展及恶性转化等生物学行为相关，在食管癌、乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌、肺癌等肿瘤组织中均被发现存在异常表达。Neumann等[3]和Tsukamoto等[4]检测到结肠癌和胃癌中SOX2的表达有所增高；Rybak等[5]发现SOX2能促进肿瘤细胞生长，并在表皮因子受体介导的前列腺癌干细胞生长中起重要作用；Chen等[6]和牛艳清等[7]发现非小细胞肺癌组织中SOX2阳性率明显高于癌旁组织，SOX2在非小细胞肺癌发生发展过程中起重要作用，且随着TNM分期的增加，其表达量也逐渐增加。陈尚忠等[8]和Park等[9]提出SOX2在结肠黏液腺癌及印戒细胞癌中呈高表达，且SOX2高表达患者的五年生存率小于SOX2低表达者。

本研究的结果显示，SOX2蛋白主要在结直肠癌的癌组织中表达，而在癌旁正常黏膜组织中很少表达；结直肠癌中SOX2蛋白表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移个数及远处转移程度具有相关性，而与患者性别、年龄、肿瘤分型无关，这与大多数研究的结果一致[8，10]。

由于黏液性结直肠癌具有更易发生腹膜转移、浸润性更强、淋巴结转移数目更多、生存率低及预后差等特点[11]，本研究探究了SOX2蛋白在黏液性结直肠癌中的表达情况。本研究并未显示出SOX2在黏液性结直肠癌和非黏液性结直肠癌中存在表达差异，这与Raghoebir等[10]的结论一致，与陈尚忠等[8]和Park等[9]的结论不符。入组病例中5例印戒细胞癌均呈SOX2高表达，而11例中至高分化黏液腺癌中只有3例有SOX2表达，且其中2例为SOX2低表达；本研究的结果显示SOX2在大肠印戒细胞癌和黏液腺癌中表达的差异无统计学意义（P＞0.05），虽然入组的黏液性结直肠癌病例较少，但可以推测SOX2在低分化的结直肠印戒细胞癌中的表达水平高于中至高分化的结直肠癌黏液腺癌，这也验证了SOX2异常表达与结直肠癌分化程度相关，而与其分型不相关。入组患者的随访结果显示，SOX2表达情况与患者术后5年生存率及3年无瘤生存率有相关性。

本研究结果显示SOX2蛋白在结直肠癌中的表达率显著增高；SOX2蛋白表达与结直肠癌分化程度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移相关；患者SOX2蛋白的表达情况与其术后5年生存率和3年无瘤生存率具有相关性。SOX2蛋白异常表达可作为提示结直肠癌预后判断的重要参考指标。

［1］Jemal A,Bray F,Center MM,et al.Global cancer statistics[J].CA Cancer JClin,2011,61(2):69-90.

［2］陈万青,郑荣寿,曾红梅,等.2011年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J].中国肿瘤,2015,24(1):1-10.

［3］Neumann J,Bahr F,HorstD,etal.SOX2 expression correlates w ith lymph-node metastases and distant spread in right-sided colon cancer[J].BMCCancer,2011,11:518.

［4］Tsukamoto T,M izoshita T,M ihara M,et al.Sox2 expression in human stomach adenocarcinomas w ith gastric and gastric-andintestinal-m ixed phenotypes[J].Histopathology,2005,46(6):649-658.

［5］Rybak AP,Tang D.SOX2 plays a critical role in EGFR-mediated self-renewal of human prostate cancer stemlike cells[J].Cell Signal,2013,25(12):2734-2742.

［6］Chen Y,Huang Y,Huang Y,et al.The prognostic value of SOX2 expression in non-small cell lung cancer:ameta-analysis[J].PloSOne,2013,8(8):e71140.

［7］牛艳清,肖鹏,王云峰.非小细胞肺癌中SOX2的表达及其临床意义[J].临床与实验病理学杂志,2014, 30(6):681-683.

［8］陈尚忠,周自华,邹媚.SOX2蛋白在结直肠中的表达及临床意义[J].临床肿瘤学杂志,2011,16(11): 991-994.

［9］Park ET,Gum JR,Kakar S,et al.Aberrant expression of SOX2 upregulates MUC5AC gastric foveola mucin in mucinous cancers of the colorectum and related lesions [J].Int JCancer,2008,122(6):1253-1260.

［10］Raghoebir L,Biermann K,Kempen MB,et al.Aberrant SOX2 expression in colorectal cancers does not correlate w ith mucinous differentiation and gastric mucin MUC5AC expression[J].Virchows Arch,2014,465(4): 395-400.

［11］郑淼,李继坤,周立生.大肠粘液腺癌的临床病理特点及预后分析[J].中国癌症杂志,2005,15(4): 383-384；386.

The clinicopathologic observation of the SOX2 expression in colorectal cancer

FU Jing#GUO Yan-ke LIU Qian
Departmentof Pathology,Beijing Haidian Hospital(Haidian Section of Peking University Third Hospital),Beijing 100080,China

ObjectiveTo evaluate the expression of SOX2 in colorectal cancer(CRC)and to explore its clinicopathological significance.MethodThe expression of SOX2 was exam ined immunohistochem ically in 103 specimens of CRC and matched normal colorectalmucosae.The relationship between SOX2 expression and clinical pathology was analyzed.Patient follow-up ranged from 60-125 months.The median follow-up period was 84 months.ResultWe detected a significant increase in the expression of SOX2 in CRC tissues compared w ith adjacent normalmucosae(P＜0.001).The expression level of SOX2 was significantly and reversely related w ith degree of differentiation (P＜0.01),while positively associated w ith TNM stage(P＜0.05),lymph node metastases and distantmetastases(P＜0.01),and was correlated w ith 5-year postoperative survival and 3-year postoperative tumor-free survival(P＜0.05)in CRC.ConclusionOur findings suggest that enhanced expression of SOX2 is a predictor of prognosis for patients w ith CRC.

SOX2;colorectal cancer;clinicopathologic features;prognosis

R735.3

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2015.13.04.21

#通信作者（corresponding author），e-mail：fj50627@163.com

2015-04-27）