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不同草苁蓉提取物中化学成分及药理作用的研究进展

2015-07-13马茜茜元海丹叶利等

安徽农业科学 2015年7期
关键词:化学成分药理作用研究进展

马茜茜 元海丹 叶利等

摘要草苁蓉(Boschniakia rossica)为列当科植物,具有抗肿瘤、抗肝损伤、增强免疫力、抗炎、抗疲劳等多种生物活性。在此主要对不同草苁蓉提取物中化学成分及其药理作用的研究进展进行综述,以便为草苁蓉的开发利用提供理论依据。

关键词草苁蓉;提取物;化学成分;药理作用;研究进展

中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611(2015)07-011-04

草苁蓉 Boschniakia rossica ( Fedtsch et Flerov) 为列当科草苁蓉属寄生肉质草本植物[1],主要分布在我国黑龙江、吉林和内蒙古地区,在朝鲜、日本和苏联的西伯利亚地区也有分布。草苁蓉是传统的中药材,其化学成分比较复杂,通过不同的溶剂提取能够得到不同的组分。为了合理有效地利用中药资源,需要掌握其有效成分及相关的药理作用,从而选择合适的提取溶剂和提取方法。笔者在此主要对国内外有关草苁蓉不同溶剂提取物的化学成分和药理作用等方面的研究进展进行综述。

1草苁蓉水提取物的化学成分及药理作用

Shyr等从草苁蓉的水溶液中分离得到草苁蓉苷A (Rossicaside A)、草苁蓉苷B (Rossicaside B)、草苁蓉苷E (Rossicaside E)、草苁蓉苷F (Rossicaside F)、rossicasin A、rossicasin B、trans-p-coumaryl alcohol-O-β-D-glucopyranosyl (1→4)-α-L-rhamnopyranosyl (1→3)-β-D-glucopyranoside和β-D-glucopyranosyl(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→3)-D- (4-O-caffeoyl)-glucopyranose等8种化学成分[2]。李树殿等用水从草苁蓉的根茎叶中提取的还原糖和总糖的含量平均值分别为9.52%和40.60%[3]。

Zhao等研究发现草苁蓉水溶性组分能够降低由于四氯化碳引起的小鼠急性肝损伤的肝脏氧化应激压力,且显著降低血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)的活性,并减少肝脏丙二醛(MDA)在肝线粒体中的含量;增加超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、肝脏中谷胱甘肽的含量,增强Na+-k+转换酶和Ca2+-Mg2+转化酶在肝线粒体中的活性,从而显示出它对由于四氯化碳引起的小鼠急性肝损伤起到了保护作用[4]。于庆海等分析发现草苁蓉水煎服剂能抑制大鼠肝匀浆过氧化脂质的生成,延长小鼠抓棒时间,抑制角叉柴胶导致的大鼠足肿胀,增强小鼠的耐缺氧能力,达到抗脂质过氧化、抗炎、抗疲劳的作用[5]。

付艾妮等研究了草苁蓉水提取物对AD大鼠学习记忆的影响机制,在此试验中,模型组的小胶质细胞胞体增大, 突起缩短,染色增强,与正常组和假手术组的相比差异显著;经过草苁蓉提取物治疗后胞体变小,染色强度减弱,数量较模型组显著减少,且以高剂量组最佳;由此推断,草苁蓉水提取物对 AD 模型大鼠学习记忆能力的改善可能通过阻抑脑内胶质细胞的活化来实现[6]。

Wang等研究发现草苁蓉的水提取物通过高效凝胶渗透色谱柱(HPGEC)纯化得到的多糖和5-氟尿嘧啶表现出了抗癌的协同作用,它能有效抑制S-180荷癌小鼠的生长,呈剂量依赖性地增长脾脏指标;同时,用草苁蓉和5-氟尿嘧啶一起处理过的荷癌小鼠能提高各种免疫作用,如促进淋巴细胞增殖,提高NK细胞的细胞毒性,增强免疫血清中IL-2和TNF-γ的分泌[7]。Quan等研究发现草苁蓉的水提取多糖部分对半乳糖胺和脂多糖诱导的急性肝衰竭起到了保护作用;试验发现,预先处理过的小鼠的肝坏死程度、血清标记酶、肿瘤坏死因子(factor-α)和白细胞介素- 6水平均显著降低,从而使半乳糖胺/脂多糖造成的肝损伤通过增强抗氧化防御系统,抑制炎症反应,减少凋亡信号,使肝损伤得到缓解[8]。

2草苁蓉乙醇提取物的化学成分及药理作用

吴春华等用75%乙醇分离出的苯丙素苷类物质中除了有草苁蓉苷A (Rossicaside A)、草苁蓉苷B (Rossicaside B)、草苁蓉苷C(Rossicaside C)、草苁蓉苷D(Rossicaside D)、草苁蓉苷E(Rossicaside E),还提取得到了草苁蓉苷G(Rossicaside G)、草苁蓉苷H(Rossicaside H)、草苁蓉苷I(Rossicaside I)、草苁蓉苷J(Rossicaside J)、草苁蓉苷K(RossicasideK)、trans-p-coimarylalcohol1-O-β-glucopyranosy(1→4)-α-rhamnopyranosyl(1→3)-β-glucopyranside[9-10]。Wu等通过试验分离得到了红景天苷I (salidroside I)、红景天苷(salidroside)、类叶升麻苷(acetoside)、trans-p-coimaryl-(2'-O-β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranside[11];吴春华等从草苁蓉75%乙醇提取物中分离得到了β-D-glucopyranose 1-(3,7-dimethyl)-2-trans-6-octa-dienoate和6,7-dihydrofoliamenthoic acid diglucoside 2种单萜苷类化合物[12]。Yim等也先后分离出7-methyl-octahy-drocyclopenta[c] pyran-4-carboxylic acid、(1R)-1-O-methyl-8-epideoxyloganic acid aglycone、(1S)-1-O-methyl-8-epideoxyloganic acid aglycone、1,10-bisdeoxy-7, 8-dihydrogenipin、3α-乙酰基齐墩果(3-epiacetyloleanolic acid)、齐墩果酸(oleanolic acid)、β-谷甾醇(β-sitosterol)、boschnaloside、胡萝卜苷(daucosterin)等萜类物质[13-15]。

Lin等用95%乙醇分离出萜类物质boschnaloside、7-deoxy-8-epiloganic acid[14];易以军等分离出4, 5, 6-三羟基噢酮(4, 5, 6-trihydroxy-aurone)、咖啡酸(caffeic acid)、肉桂酸(cinnamic acid)、没食子酸(gallic acid)4种酚酸[16]。

近些年的研究表明,草苁蓉乙醇提取物的保肝作用显著。草苁蓉乙醇提取物能抑制大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)细胞增殖,抑制HSC-T6细胞培养液中HA及Ⅳ型胶原的产生并表现出浓度、时间依赖性关系[17-19]。观察发现草苁蓉乙醇提取物作用于HSC-T6细胞后呈现出典型的细胞凋亡形态学改变,检测细胞周期及细胞凋亡率的变化后发现,经草苁蓉乙醇提取物处理后的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率上升,并随药物浓度的升高呈增高趋势,因此了解到草苁蓉乙醇提取物通过此机制治疗肝纤维化[17-19]。张炜煜等研究发现草苁蓉乙醇提取物能下调肝组织细胞色素P4502E1(CYP 2E1)表达和血清肿瘤坏死因子(TNF-α);对大鼠NAFLD肝组织α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达有抑制作用,说明草苁蓉乙醇提取物有抗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)纤维化的作用[20]。Quan等在2009年对草苁蓉90%乙醇提取物得到的Rossicaside B进行了研究,在2011年对草苁蓉90%乙醇提取物(其富含苯丙素苷和环烯醚萜葡萄糖苷)进行了更深入的研究,从而发现这些成分通过减少氧化应激、抑制炎症反应和诱导HO-1蛋白表达结合,并改进肝CYP2E1水平和功能对氯仿(CCl4)引起的肝损伤起到预防保护作用[21-22]。

草苁蓉乙醇提取物有抗脂质过氧化的活性,而脂质过氧化与许多慢性疾病有关,如动脉粥样硬化、癌变和衰老,从而说明了草苁蓉的乙醇提取物在这些方面有潜在的药用价值。李勇用高养法建立兔高血脂症的模型,饲喂草苁蓉乙醇提取液后发现,高脂血症兔血脂水平和血浆脂蛋白脂质过氧化程度降低,LDL抗氧化修饰能力增强,这些均对防治动脉粥样硬化症起到积极作用[23]。全吉淑等利用家兔分离出红细胞,用比色法测定过氧化脂质(LOOH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)以及对羟基自由基的清除能力和红细胞溶血度,结果表明,草苁蓉的乙醇提取物具有抑制红细胞脂质过氧化作用,提高红细胞 SOD 和 GSH-Px 活性,减少红细胞溶血程度[24]。

草苁蓉乙醇提取物对VX2移植瘤具有明显的抑制作用,且对长春瑞滨化疗(NVB)有明显增强作用,其作用可能与其抑制细胞增殖和增高机体抗氧化能力有关;草苁蓉乙醇提取物(BRE)和NVB单独或联合治疗均可明显抑制VX2移植瘤生长和抑制肿瘤细胞增殖,与 NVB单独用药相比,BRE+NVB组肿瘤生长抑制率最高、增殖指数最小[25]。尹学哲等研究发现草苁蓉乙醇提取物和用90%乙醇从草苁蓉中得到的苯丙素(PGBR)提取物对A549细胞均有抑制作用,通过检测周期分布和细胞凋亡情况发现,BRE能够改变肺癌细胞周期分布,使多数细胞阻滞于G0/G1期,同时Fas、Bax的表达明显增加,Bc1-2表达降低,但不改变P53表达以及sFas蛋白水平,分析得到草苁蓉乙醇提取物可以通过促进肿瘤细胞凋亡来抑制A549肺癌细胞的增殖,且PGBR可呈时间和浓度依赖性地抑制肺癌细胞增殖[26-27]。金爱花等研究发现用90%乙醇从草苁蓉提取得到的环烯醚萜苷对小鼠H22移植瘤也有生长抑制作用,从而能显著减轻移植瘤的瘤质量,高、中、低剂量组的抑瘤率分别为38.05%、34.98%、26.95%;荷瘤小鼠的脾脏指数明显升高,升高血清IL-2水平和降低TNF-α水平,升高血清T-AOC和降低MDA水平,说明草苁蓉环烯醚萜苷对H22移植瘤具有明显的抑制作用,其作用机制可能与调节IL-2和TNF-α等细胞因子的表达以及增强荷瘤小鼠抗氧化能力有关[28]。

草苁蓉乙醇提取物可明显增强肝枯否氏细胞的吞噬功能,从而增强枯否损伤枯否细胞的免疫活性;正常组的枯否细胞与损伤组的枯否细胞相比,损伤组结合的SRbC明显减少,通过吞噬试验可知,试验组和正常组的吞噬细胞表面呈满饱食SRbC状态,损伤组吞噬的SRbC减少[29]。

草苁蓉乙醇提取物可以提高大鼠的学习记忆能力。周丽莎等分析发现阿尔茨海默病(AD)患者的Meynert基底神经核的大型神经元明显减少,大脑皮质乙酰胆碱含量降低;采用脑立体定位仪双侧Meynert核注射β淀粉样蛋白建立AD模型,中药组予以草苁蓉提取物并按高、中、低3种剂量对大鼠模型进行灌胃治疗,治疗后分别检测各组大鼠的学习记忆能力及海马、皮质部分乙酰胆碱的含量,结果发现,与模型组比较,中药组大鼠的学习记忆能力及乙酰胆碱含量明显提高(P<0.01)[30]。

3草苁蓉甲醇提取物的化学成分及药理作用

Murai等用甲醇从草苁蓉中提取分离出了草苁蓉酮(boschnialactone)、草苁蓉碱(boschniakine)、草苁蓉酸(boschnialinic acid)3种单萜物质[31],Yin等分离出 boschnaloside、boschnaro、boschnarol methylether、7-deoxy 8-epiloganic acid[32],Konishi等先后分离出对香豆酸(p-coumaric acid)、对香豆酸甲酯(methyl p-coumarate)、β-谷甾醇(β-sitosterol)、草苁蓉苷 B(rossicaside B)、草苁蓉苷 C(rossicaside C)、草苁蓉苷 D(rossicaside D)、3α-齐墩果酸(3-epioleanolic acid)和齐墩果酸(oleanolic acid)[33]。

草苁蓉甲醇提取物对二乙基亚硝胺(DEN)诱发的大鼠肝脏化学致癌过程有抑制作用,对癌前病变大鼠给予草苁蓉提取物后,其SOD、GSH-Px活性显著提高,MDA的生成得到抑制,使得曾被受到抑制的抗氧化系统各成分又重新相互协调、依赖,以清除体内产生的过多的自由基,减轻组织细胞的损伤[34-35]。由此可见,草苁蓉提取物具有抗氧化作用。SOD、GSH-Px具有抗癌活性,可以保护正常细胞,有利于肿瘤的防治,试验中所用的草苁蓉提取物显著提高了肝脏癌前病变大鼠血清的SOD、GSH-Px活性,从而表明草苁蓉提取物有可能用于肿瘤的治疗;同时草苁蓉甲醇提取物经进一步分离水层所得的成分可显著增高肝脏癌前病变大鼠血清肿瘤坏死因子α的含量,可激活巨噬细胞,诱导产生肿瘤坏死因子,也可达到肿瘤免疫和肿瘤治疗的目的[34-35]。

另有研究发现,草苁蓉用80%甲醇提取得到的环烯醚萜类(IGBR)化学成分对家兔的VX2移植瘤有生长抑制作用;IGBR能够显著延长VX2荷瘤兔生存时间,提高其生命延长度;显著减小移植瘤瘤重,提高抑瘤率[36]。IGBR可明显升高血清SOD、CAT和GSH-PX活性,降低MDA水平,所以其作用可能与其增高机体抗氧化能力有关[36]。

4其他化学成分及药理作用

除了上述方法提取得到化学成分外,Konishi等用丁醇从草苁蓉中分离得到boschnaloside、boschnaside、草苁蓉苷A (Rossicaside A)、(+)-pinoresinol-β-D-glucopyranoside、β-D-glucopyranosyl (1→4)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→3)-D-(4-O-caffeoyl)-glucopyranose[37]。孙仓等通过碱提取多糖发现,它的化学成分组成主要为岩藻糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖,岩藻糖与葡萄糖以 1→2 糖苷键相连[38]。桂明玉等用乙醚回流提取出亚油酸、棕榈酸、10- 甲基珠光脂酸、十氢萘甲酸、3,5- 二甲氧基苯甲酸,其中亚油酸和棕榈酸含量均超过30%[39]。李树殿等用NH4Cl水解分离出草苁蓉中的氨基酸有 17 种以上,总含量为4.356 5%,其中人体必需的氨基酸有7种以上,其含量为1.221 3%;同时,草苁蓉中含有大量的铁、磷、钾、钠、镁、钙、锰、钴、锶、铬、镧、钛、镍、钼、钇、钒等多种无机成分[40]。

Wang等研究发现草苁蓉通过高效分子筛层析法筛出的同多糖(仅由一种类型单糖单元组成的多糖)呈时间和剂量依赖性地抑制喉癌鳞状细胞Hep2的增殖;200 μg/ml的BPR可以抑制Hep2的G0/G1周期,且用100~400 μg/ml的BPR处理24 h的细胞与未被处理过的细胞相比,对Hep2细胞的抑制作用显著提高[41]。Liu等研究发现草苁蓉多糖经二乙氨基乙基纤维素提取分离净化得到BRR-W1、BRR-WA1和BRR-WA2等3种多糖,对巨噬细胞的吞噬、NO的产生和TNF-α分泌起到重要作用,并与其物理化学性质有密切的关系[42]。金爱华等研究表明草苁蓉多糖可有效清除·OH,抑制红细胞脂质过氧化作用的发生,保护红细胞膜免受损伤,保护红细胞正常结构和功能,抑制红细胞发生溶血,具有良好的红细胞保护作用[43]。

5小结与展望

从提取的角度看,每种有机溶剂中均可以提取分离出多种化学成分,部分化学成分在多种有机溶剂中均能被提取出来,如草苁蓉苷A (Rossicaside A)、草苁蓉苷B (Rossicaside B)、草苁蓉苷E (Rossicaside E)在水和75%乙醇均被提取出来;草苁蓉苷 B(rossicaside B)、草苁蓉苷 C(rossicaside C)、草苁蓉苷 D(rossicaside D)和boschnaloside在甲醇和乙醇中被提取出来。因此,可以根据总提取物的药理作用,对特定化学成分的药理作用进行研究,从而为今后临床与生活中的开发利用提供可靠的试验资料。

草苁蓉是一种传统中药。 多年来的试验研究表明,草苁蓉有重要的药用价值和经济价值,尤其在抗肿瘤、抗氧化、抗肝损伤方面。然而在临床开发应用方面就显得“不受重视”,回顾多年来草苁蓉的实际应用可知,解放军208医院研制的“健身不老酒”(草苁蓉+酒)为屈指可数的一个典型代表。草苁蓉与肉苁蓉同为列当科植物,均具有补肾壮阳、保护肝脏等药理作用,但近年来从临床结果来看,肉苁蓉有“苁蓉总苷胶囊”、“红芸口服液”、“杞芸口服液”、“苁蓉四倍丸”[44]等诸多临床应用,因此草苁蓉可以借鉴肉苁蓉的开发经验。从溶剂总提取物和单独的有效成分等方面,开发利用草从蓉具有广泛的应用前景。亦可以通过一定的微生物技术,采用诱变育种、基因工程进行改造来实现草苁蓉有效成分的工业化生产,满足实际需要,解决资源破坏和浪费问题。

43卷7期

马茜茜等不同草苁蓉提取物中化学成分及药理作用的研究进展

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