干细胞移植对缺血性脑卒中患者血清同型半胱氨酸、CRP及BDNF含量影响研究

蔡谋善，沈春林，曾令海，黄肖群，宋承伟

(宜昌市第一人民医院/三峡大学人民医院 神经内科，湖北 宜昌 443000)



干细胞移植对缺血性脑卒中患者血清同型半胱氨酸、CRP及BDNF含量影响研究

蔡谋善Δ，沈春林，曾令海，黄肖群，宋承伟

(宜昌市第一人民医院/三峡大学人民医院 神经内科，湖北 宜昌 443000)

目的 探讨干细胞移植对缺血性脑卒中患者血清同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)、C反应蛋白(C reactive protein，CRP)及脑源性神经生长因子(brain derived neurotrophic factor，BDNF)含量的影响。方法 收集宜昌市第一人民医院收治的缺血性脑卒中患者42例，随机分为实验组和对照组，每组各21例，对照组给予常规治疗，实验组在常规治疗基础上给予自体骨髓间充质干细胞移植治疗，治疗结束后，对所有患者的血清Hcy、CRP、BDNF水平及临床疗效情况进行检测。结果 治疗后，与对照组比较，实验组患者的血清Hcy水平较低，差异具有统计学意义(P<0.05)；实验组患者的血清CRP水平较低(P<0.05)；实验组患者的BDNF水平较高(P<0.05)；实验组患者的实验组患者的FIM、ADL、Fugl-Meyer评分较高(P<0.05)。结论 干细胞移植能够显著降低缺血性脑卒中患者血清Hcy、CRP水平，提高血清BDNF含量，提高治疗效果。

干细胞移植；缺血性脑卒中；同型半胱氨酸；CRP；BDNF

缺血性脑卒中是指由于各种原因导致的脑供血动脉狭窄或阻塞，而引起的局部脑组织缺血、缺氧、坏死的疾病。目前国际上公布的病因分型方法已有十余种，主要包括：类肝素药物治疗急性缺血性脑卒中实验(treatment of acute ischemic stroke with heparin like drugs，TOAST)分型、英国南伦敦改良TOAST分型、美国SSS-TOAST分型、韩国改良TOAST分型等[1]，而且有年轻化的趋势。脑卒中以其高发病率、致死、致残率给患者及社会带来沉重的负担[2-3]。因此，采用合理的治疗方法改善患者预后尤为重要[4]。目前，对于缺血性脑卒中的治疗，临床上多采用改善脑供血、抗血小板聚集、营养脑细胞、控制血压血糖等对症治疗的方案[5]，对于疾病的复发有一定的预防作用，但是对于已经缺血坏死的神经细胞以及神经功能的损伤疗效甚微。干细胞移植治疗是一种新的治疗手段，主要针对受损神经细胞的修复与再生，已有研究显示[6]，干细胞有促进缺血性脑卒中患者大脑功能恢复的效果；然而，目前相关的临床研究较少。因此，本研究通过对治疗前后患者血清Hcy、CRP、BDNF水平及临床疗效进行分析研究，探讨干细胞移植对缺血性脑卒中患者的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集宜昌市第一人民医院2014年1月～2015年1月的确诊为缺血性脑卒中的患者42例。其中男性27例，年龄50～77岁，平均年龄(60.1±7.2)岁；女性15例，年龄53～80岁，平均年龄(62.3±6.8)岁。病程为20 d～3个月，平均病程(1.75±0.85)月。

诊断标准：诊断依据根据全国第五届脑血管病学术会议关于缺血性脑卒中的诊断标准[7]，并经头CT平扫或MRI确诊； 排除标准：①缺血性脑卒中发病的急性期；②既往存在脑梗死、脑出血病史；③合并恶性肿瘤；④严重的心血管疾病、肝肾功能衰竭等；⑤合并意识障碍或其他神经、精神系统疾病的患者；⑥存在禁忌症，无法进行腰椎穿刺的患者。

1.2 方法

1.2.1 分组及治疗方法：采用随机数字表，将所有的患者分为实验组和对照组，每组各21例，实验组男性14例，女性7例，年龄53～80岁，平均年龄(61.4±6.7)岁，病程0.8～2.4年，平均病程(1.70±0.73)年；对照组男性13例，女性8例，年龄54～80岁，平均年龄(62.7±6.9)岁，病程0.7～2.3年，平均病程(1.75±0.81)年；2组患者的年龄、性别、病程、基本病情等资料差异无统计学意义。对照组患者给予改善脑供血、保护脑细胞、抗血小板聚集、控制血压、血糖、康复训练等常规治疗；实验组在常规治疗的基础上，进行自体骨髓间充质干细胞静脉注射移植治疗，移植细胞数量为每次(5～20)×107个，1次/周，共治疗3次。

1.2.2 血清指标采集及测量：所有研究对象均于治疗前后采集空腹12小时后静脉血5 mL，然后分离血清，采用DELTA全自动全血CRP检测仪(上海希亚克诊断用品有限公司)，通过免疫透射比浊法检测C反应蛋白(CRP)含量；采用Thermo MK3酶标仪(赛默飞世尔)，严格按照说明书操作，采用酶联免疫分析法(ELISA)检测血清中同型半胱氨酸(Hcy)、脑源性神经生长因子(BDNF)水平。

1.2.3 临床疗效评估：根分别于治疗前以及治疗6个月后，根据功能独立性评定量表(FIM)、日常生活能力量表(ADL)以及Fugl-Meyer神经功能评测法，对所有患者的临床治疗效果进行评估。

2 结果

2.1 治疗前后2组患者血清Hcy水平比较 治疗后，2组患者的血清Hcy水平与治疗前比较，均显著降低(P<0.05)；实验组患者的血清Hcy水平明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 治疗前后2组患者血清Hcy水平比较Tab.1 Comparison of level of Hcy in serum between two ±s,μmol/L)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.2 治疗前后2组患者血清CRP水平比较 治疗后，2组患者的血清CRP水平与治疗前比较，均显著降低(P<0.05)；实验组患者的血清CRP水平明显低于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 治疗前后2组患者血清CRP水平比较Tab.2 Comparison of the level of CRP in serum between two ±s, mg/L)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.3 治疗前后2组患者血清BDNF水平比较 治疗后，2组患者的血清BDNF水平与治疗前比较均显著升高(P<0.05)；实验组患者的血清BDNF水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 治疗前后2组患者血清BDNF水平比较Tab.3 Comparison of the level of BDNF in serum between two ±s, μmol/L)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.4 治疗前后2组患者FIM、ADL、Fugl-Meyer评分比较 治疗后，2组患者的FIM、ADL、Fugl-Meyer评分与治疗前比较均显著改善(P<0.05)；实验组患者的FIM、ADL、Fugl-Meyer评分均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 治疗前后2组患者FIM、ADL、Fugl-Meyer评分比较，分)Tab.4 Comparison of FIM， ADL and Fugl-Meyer of two ±s, score)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

3 讨论

近年来，脑卒中的日益年轻化引起了医学界广泛的关注。多项研究指出青年脑卒中患者中以缺血性脑卒中为主体。有研究报道，发达国家的青年缺血性脑卒中病因中动脉夹层分离和心源性因素占有重要地位[8]。血性脑卒中以局部脑组织缺血、缺氧、坏死为主要的病理基础，缺血缺氧的部位可以通过药物干预扩张血管来改善局部循环，而坏死部分的损伤在很大程度上是不可逆的，这也是导致患者认知、运动功能障碍的主要原因，NIHSS评分、PLT计数、BUN水平及ALB水平是影响缺血性脑卒中患者近期预后的主要因素[9]。随着细胞学的发展，干细胞移植作为新的治疗手段逐渐成为研究热点。干细胞是具有高分化及增殖潜能的细胞，包括骨髓源性细胞、人胚胎干细胞、内皮祖细胞、诱导多能干细胞等[10]，其中骨髓间充质干细胞具有易获得、可自体移植等优点，目前研究较多。有研究显示[11]，移植的干细胞一方面通过促进坏死组织血管、神经结构再生来恢复损伤部位的完整性，另一方面，干细胞还可以刺激各种营养因子的分泌，促进血管、神经细胞的再生，修复损伤，从而对缺血性脑卒中起到治疗作用。在本实验中，笔者通过对患者血清相关指标以及临床疗效的分析研究，来探讨干细胞移植对缺血性脑卒中患者的治疗效果以及其作用机理。

研究结果发现，治疗后，实验组患者的血清Hcy水平明显低于对照组(P<0.05)，证实了干细胞移植能够降低患者血清Hcy的水平，减少Hcy对血管的损伤作用。曾有研究报道，高Hcy血症是心脑血管病的独立危险因素[12]。Hcy是蛋氨酸代谢产生的含硫氨基酸，在正常人血清中含量很低，而在心脑血管病患者体内Hcy水平明显较高。Hcy含有还原性巯基，容易氧化生成氧自由基损害血管内皮细胞，同时能够促进平滑肌增殖、与低密度脂蛋白产生协同作用、抑制抗凝和纤溶系统的功能，从而加速血管动脉粥样硬化的进程，血清Hcy水平的升高与缺血性脑卒中发生的风险增加密切相关[13]。

CRP也是评价缺血性脑卒中预后的重要指标，反映动脉粥样硬化的进展。CRP是一种炎症反应标志物，而动脉周扬样硬化斑块的形成与炎症反应关系密切，由于各种原因导致的血管内皮损伤，能够促进炎症相关因子的合成分泌，促进淋巴细胞、中性粒细胞等的聚集，引起巨噬细胞活化，同时促进血小板聚集形成血栓，加速动脉硬化进程，另外，这些炎症因子也能引发脑卒中后的神经元损伤。研究表明[14]，脑卒中患者血清CRP水平升高，可以用来评估患者预后。本研究结果显示，治疗后实验组患者的血清CRP水平明显低于对照组(P<0.05)，表明干细胞移植能够降低缺血性脑卒中患者体内的炎症反应。

BDNF是一种脑源性的神经营养因子，具有促进神经细胞分化、生长、增殖的作用。研究发现[15]，BDNF参与脑缺血损伤的保护过程，一方面可以促进超氧化物歧化酶等的产生，以消除氧化应激反应对于神经细胞的损害，防止神经细胞凋亡；另一方面，又能直接作用于血管内皮及神经元，促进血管及神经的再生，恢复神经功能。本研究结果显示，治疗后，实验组患者的血清BDNF水平明显高于对照组(P<0.05)，表明干细胞移植能够促进缺血性脑卒中患者BDNF的合成分泌，起到脑保护作用。

FIM、ADL、Fugl-Meyer评分都是评估缺血性脑卒中疗效的常用指标，FIM 量表可以用来评估患者生活自理、活动、行动、理解交流、社会认知、括约肌控制方面的能力，ADL可以评价患者日常生活活动的能力，Fugl-Meyer侧重于对患者运动功能的评价。三种评价手段联合使用，能够更全面准确的评估对患者的临床疗效。本研究结果显示，治疗6个月后，实验组患者的FIM、ADL、Fugl-Meyer评分均明显高于对照组(P<0.05)，表明干细胞移植治疗缺血性脑卒中患者具有良好的临床效果。

本实验通过对缺血性脑卒中患者血清同型半胱氨酸、CRP、BDNF水平及临床疗效检测结果进行分析，证实了干细胞移植能够显著降低缺血性脑卒中患者血清Hcy、CRP水平，提高血清BDNF含量，提高治疗效果，对临床有指导意义。在下一步研究中，将进行安全性方面的研究，为干细胞移植更好的应用于缺血性脑卒中的治疗提供依据。

[1] 甄志刚， 汪立燕， 王晋朝，等.急性脑梗死TOAST分型的相关研究进展[J].实用心脑肺血管病杂志， 2011， 19(9)：1433-1434.

[2] 付娜娜，石正洪.缺血性脑卒中病因分型研究进展[J].中国老年学杂志，2014，(12)：3489-3491.

[3] 刘瑛娜，詹一，章华米，等.出血性和缺血性脑卒中发病情况分析[J].心脑血管病防治，2014，14(3)：238-239.

[4] 丁兆生， 周芳， 林马明，等.氟西汀对缺血性脑卒中患者脑源性神经营养因子的影响[J].中风与神经疾病杂志， 2013， 6(30)：622-624.

[5] 赵均峰，张宪坤，李闯，等.缺血性脑卒中107例的治疗及预防[J].中国老年学杂志，2014，34(15)：4318-4319.

[6] 陈娟.干细胞移植在缺血性脑卒中治疗中的应用[J].中国组织工程研究，2012，16(19)：3576-3583.

[7] 陈伟群， 王新德.全国第五届脑血管病学术会议纪要[J].中华神经科杂志， 2000， 8(33)：252-254.

[8] 靳玮，吕佩源，董艳红，等.初发缺血性脑卒中患者危险因素分析[J].中国老年学杂志，2012，32(20)：4381-4383.

[9] 张填，王埮，王淑荣，等.老年缺血性脑卒中患者近期预后的影响因素[J].中国老年学杂志，2014，34(7)：1754-1755.

[10] 袁志俊，李小刚.干细胞治疗缺血性脑卒中的研究进展[J].中国组织工程研究，2013，17(45)：7954-7960.

[11] 李红蕾，李正仪.干细胞移植治疗缺血性脑卒中的研究与现状[J].中国组织工程研究与临床康复，2009，13(19)：3755-3758.

[12] 王松.血浆同型半胱氨酸与颈内动脉系统进展性缺血性脑卒中及颈动脉粥样硬化相关性的研究[J].中国综合临床，2012，28(5)：471-475.

[13] 王靖东，吴承志，吕晓侠，等.高同型半胱氨酸血症与进展性缺血性脑卒中相关性的临床研究[J].中风与神经疾病杂志，2009，26(1)：55-57.

[14] 郭毅，姜昕，陈实，等.C反应蛋白—缺血性脑卒中预后的重要标志物[J].中华预防医学杂志，2003，37(2)：102-104.

[15] 丁兆生，周芳.脑源性神经营养因子与缺血性脑卒中康复[J].中国康复医学杂志，2013，28(1)：86-89.

(编校：谭玲)

Effect of stem cell transplantation on serum homocysteine, CRP and BDNF in patients with ischemic stroke

CAI Mou-shanΔ, SHEN Chun-lin, ZENG Ling-hai, HUANG Xiao-qun, SONG Cheng-wei

(Department of Internal Medicine,Yichang First People’s Hospital/People’s Hospital of China Three Gorges University,Yichang 443000,China)

ObjectiveTo analysis the effect of stem cell transplantation on serum homocysteine(Hcy), C reactive protein(CRP) and brain derived neurotrophic factor(BDNF) in patients with ischemic stroke.Methods42 patients who were diagnosed with ischemic stroke in Yichang First People’s Hospital were collected.All patients were randomly divided into experimental group and control group, 21 cases in each group.The control group was treated with conventional therapy, and the experimental group was treated with autologous bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for treatment on the basis of conventional therapy, after treatment, the serum levels of serum homocysteine, CRP, BDNF and clinical curative effect were detected in all patients.ResultsAfter treatment, compared with control group, the serum Hcy level was lower in the experimental group(P<0.05); the serum CRP level was lower in the experimental group (P<0.05); the serum BDNF level was higher in the experimental group (P<0.05); the FIM, ADL and Fugl-Meyer score were higher in the experimental group(P<0.05).ConclusionsThe stem cell transplantation can significantly reduce the serum Hcy and CRP levels in patients with ischemic stroke, increase the content of BDNF in serum, improve the therapeutic effect, and have a guiding significance for clinical.

stem cell transplantation; ischemic stroke; homocysteine; C reaction protein; brain derived neurotrophic factor

蔡谋善,通讯作者，男,本科,副主任医师,研究方向:神经内科,E-mail:yichangcms@163.com。

R741

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1005-1678(2015)09-0091-03