藤茶二氢杨梅素对鸡内脏器官及小肠消化酶活性的影响

戴 青，龚 飞，郁建平

（贵州大学 药学院，贵州 贵阳550025）

藤茶是我国特有的药茶兼用植物，富含二氢杨梅素（dihydromyricetin，DMY）等黄酮类物质，具有抗炎抗菌、抗氧化、降血糖等作用[1－5]。有研究表明，用藤茶黄酮及二氢杨梅素作饲料添加剂，能有效提高动物机体的免疫力，增强生产性能、促进生长，可改善动物的肉质品质，作为新型绿色无公害饲料添加剂具有广阔的应用前景[6－8]，但目前在畜牧业生产中的应用水平和广泛程度还不高。随着现代养殖业规模化的不断发展，为了防治畜禽疾病、提高经济效益，人们在饲料中添加各种抗生素、激素等添加剂，但长期使用会导致许多不良后果，如畜产品中药物残留，通过食物链进入人体，给人类疾病防治带来困难，造成严重安全隐患[6]。因此，研究安全、高效和环保的新型饲料添加剂具有十分重要的意义。为藤茶资源的合理开发利用以及其在养殖生产中的应用提供参考依据，笔者于2014年3—5月进行了藤茶中二氢杨梅素对鸡内脏器官质量及指数、小肠消化酶活性的影响试验。

1 材料与方法

1.1 动物及分组

选用96只体重相近、健康的40日龄贵州瑶山鸡，随机分为4组，每组3次重复，每重复8只鸡，试验期70d。试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别在基础日粮（表1）中添加0.025%、0.05%和0.1%的二氢杨梅素（由贵州大学生化营养研究所植化实验室提取），试验Ⅳ组（对照组）只喂基础日粮，其他饲养管理措施一致。

表1 基础日粮组成及营养水平（风干基础）Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diets（air dry basis）

1.2 内脏器官采集与处理

试验结束后随机从各组每个重复中各选取2只鸡称重，然后放血致死、脱毛，迅速剖开腹腔取出心脏、肝脏、腺胃、肌胃、肺、小肠，去出腺胃、肌胃、肠道中的食糜，用吸水纸吸去器官表面水分后称重。用尺子测量肠道总长度，每只鸡截取肠道1cm，挤出食糜并用生理盐水清洗后装入冻存管于－20℃保存。计算脏器指数：

脏器指数（相对质量）＝（脏器鲜质量／活体质量）×100%。

1.3 小肠的消化酶测定

1.3.1 样本前处理 准确称取肠组织重量，按重量（g）∶体积（mL）＝1∶9的比例，加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2 500r／min离心10min，分别收集上清液。

1.3.2 蛋白酶测定 取上清液用生理盐水稀释10倍，取样50μL用考马斯亮蓝法测定待测匀浆蛋白浓度。取3支试管，其中2支为测定管，1支为空白管，分别在每管内加入1.5mL蛋白酶底物应用液，37℃预温5min，然后在测定管中各加15μL 样本，在空白管中加15μL样本匀浆介质。加入样本的同时开始计时，混匀后倒入0.5cm 光径的石英比色皿中，于253nm 处测定吸光度，记下30s时的吸光度值A1，将比色皿置于比色槽中不动，同时将比色槽温度恒定保持在37℃，于20.5 min时测定吸光度值A2后计算酶活力。在pH 8.0 和37℃条件下，1mg蛋白中含有的蛋白酶1 min 使吸光度变化0.003即为1个蛋白酶活力单位。

1.3.3 淀粉酶测定 取上清液用生理盐水稀释一定倍数，底物缓冲液先于37℃预温5 min。取3支试管，其中2支为测定管，1支为空白管，分别在每管内加入0.5mL 底物缓冲液，然后在测定管内分别加0.1mL待测样本（空白管内不加），混匀，37℃水浴，准确反应7.5 min，取出后沸水灭活，再每管分别加0.5 mL 碘应用液。最后，测定管各加3.0mL蒸馏水，空白管加3.1mL 蒸馏水，混匀，于波长660nm，1cm 光径比色，蒸馏水调零，测定各管吸光度后计算酶活力。组织中1mg蛋白在37℃与底物作用30min，水解10mg淀粉定义为1个淀粉酶活力单位。

1.4 数据处理

试验数据采用SPSS19.0 统计处理软件中ANOVA 模块进行单因素方差分析，用Duncan氏法对各组间平均数进行多重比较。试验结果用平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 内脏器官的质量及指数

从表2看出，添加二氢杨梅素试验组的心脏、肺质量与对照组间差异均不显著，其中，试验Ⅱ组、Ⅲ组的心脏质量分别比对照组高3.93%和13.87%，试验Ⅰ组、Ⅲ组的肺质量分别比对照组高22.57%和7.93%。添加二氢杨梅素试验组的肝脏、胃质量均低于对照组，其中，试验Ⅱ组、Ⅲ组的肝脏质量与对照组间差异显著，试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组的胃质量分别比对照组低14.69%、28.81%和15.11%，其中，Ⅰ组、Ⅲ组与对照组间差异显著，Ⅱ组与对照组间差异极显著。

各组间心脏、肝脏指数差异均不显著，肝脏指数均低于对照组。胃指数试验Ⅰ组、Ⅲ组显著低于对照组；试验Ⅱ组显著低于试验Ⅰ组和Ⅲ组，极显著低于对照组。肺指数试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组与对照组间差异均不显著，但试验Ⅱ组与Ⅰ组、Ⅲ组间差异均显著（表2）。

2.2 小肠长度及消化酶活性

从表3看出，添加二氢杨梅素饲喂贵州瑶山鸡对其小肠长度、消化酶活性有显著或极显著影响。肠道长度试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别比对照组增加6.30%、13.04%和6.90%，其中，试验Ⅱ组与对照组间差异显著，其余各组间差异不显著。小肠蛋白酶活性试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别比对照组高65.34%、70.75%和31.98%，其中，试验Ⅰ组、Ⅱ组与对照组间差异显著，Ⅲ组与对照组间差异不显著，试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组间差异均不显著。小肠淀粉酶活性试验Ⅲ组较对照组显著提高30.22%，试验Ⅱ组较对照组提高16.55%，试验Ⅰ组较对照组降低8.03%，但与对照组间差异均不显著；试验Ⅰ组与Ⅱ组间差异显著，Ⅰ组与Ⅲ组间差异极显著。

表2 试验各组贵州瑶山鸡的内脏器官质量和脏器指数Table 2 The visceral organ weight and organ index of each group of Yaoshan chickens

表3 试验各组贵州瑶山鸡的小肠长度及消化酶活性Table 3 The intestine length and digestive enzymes activity of each group of Yaoshan chickens

3 结论与讨论

1）二氢杨梅素（DMY）对鸡内脏器官的影响。内脏器官是各种营养物质消化和吸收的主要场所，健康及生长良好的内脏器官是肉鸡快速生长的基础，只有当内脏器官得到充分发育，才能为肌肉等养分消耗器官的物质合成奠定基础[9]。目前，国内关于DMY 对鸡心、肝、胃、肺等器官指数及发育的影响研究较少，且主要集中于对免疫器官的影响方面。试验结果表明，日粮中添加DMY 组鸡的心脏、肺质量与对照组间均无显著差异，与张继东等[10]研究桂皮型中草药添加剂对鸡心脏等器官的影响结果一致。但本试验中，与对照组相比，添加0.05%和0.1%的DMY 可显著降低鸡的肝脏质量，0.025%、0.1%的DMY 可显著降低鸡的胃质量，0.05%的DMY 可极显著降低胃质量。原因可能是DMY 加快食糜在胃肠道中的消化速度，减小了胃肠道的消化负担。

脏器质量及指数能近似反应动物的生理状况及对环境的适应程度。脏器指数可从另一侧面反应产肉性能，指数越小则意味着更高的产肉可能[11－12]。试验结果表明，日粮中添加DMY 对鸡心脏、肝脏和肺指数无显著影响，但添加0.025%和0.1%的DMY 可显著降低胃指数，0.05%的DMY 可极显著降低胃指数，表明日粮中添加DMY 可影响鸡消化器官的生长发育。刘丽等[13]研究日粮水平对鸡内脏器官质量及指数的影响发现，脏器指数与活体质量间呈负相关，相关性大小依脏器不同而有所差异。而本试验中各脏器指数并不完全与活体质量呈负相关，这可能与试验鸡品种和饲养环境等不同有关。在屠宰过程中发现，各组鸡的心、肝、胃和肺的形状和颜色无明显差异。

2）二氢杨梅素（DMY）对鸡小肠消化酶活性的影响。鸡肠道的消化吸收能力主要取决于肠道内壁的面积，面积越大，吸收能力越强[14]。试验结果表明，日粮中添加不同水平的DMY 均可增加鸡的肠道长度，能在一定程度上增加肠道内壁的面积，进而提高消化、吸收能力，其中添加0.05%组与对照组间差异显著。日粮添加DMY 均能提高鸡的小肠蛋白酶活力，其中添加0.025%、0.05%组与对照组间差异显著，说明DMY 能刺激鸡肠道消化腺分泌更多的蛋白酶，从而使鸡更好地分解肠道内的蛋白类营养成分，进而有助于鸡对饲料蛋白的消化吸收，提高饲料利用率。而添加0.05%、0.1%组的小肠淀粉酶活力比对照组高，其中0.1%组与对照组间差异显著。淀粉酶活力提高则可使禽类更好地消化吸收饲料中的淀粉类营养成分，提高饲料利用率。

3）综上所述，藤茶二氢杨梅素添加量以0.05%最为适宜，与对照组相比，能降低肺质量及指数（P＞0.05），显著降低肝脏质量（P＜0.05），极显著降低胃质量及指数（P＜0.01），增加小肠淀粉酶活力（P＞0.05），显著增加小肠长度和蛋白酶活力（P＜0.05）。在贵州瑶山鸡基础日粮中添加0.05%的藤茶二氢杨梅素可降低内脏器官质量及指数，增强消化道的消化、吸收能力，从而提高饲料利用率，促进鸡的生长。

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