绝经后女性非酒精性脂肪性肝病与骨生化指标的相关性研究

张 丽， 安恒庆， 陈 艳

(新疆医科大学1公共卫生学院， 乌鲁木齐 830011； 2第一附属医院医学检验中心， 3第一附属医院泌尿外科, 乌鲁木齐 830054)

绝经后女性非酒精性脂肪性肝病与骨生化指标的相关性研究

张 丽1,2， 安恒庆3， 陈 艳1

(新疆医科大学1公共卫生学院， 乌鲁木齐 830011；2第一附属医院医学检验中心，3第一附属医院泌尿外科, 乌鲁木齐 830054)

目的 探讨绝经后女性非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血脂指标和骨生化指标的相关性。方法 选择新疆医科大学第一附属医院2014年7月-2015年8月800例受试者，按照1∶1病例对照研究设计原则，病例组和对照组中维吾尔族、汉族各200例。检测所有受试者的血脂指标，包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、脂蛋白a(LP-a)及游离脂肪酸(NEFA)。骨生化指标包括血清骨特异性碱性磷酸酶(s-BAP)、骨钙素(OT)、Ⅰ型胶原氨基末端肽(s-NTX)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TrACP)，并进行相关性分析。结果 病例组TG、TC、HDL-C、LDL-C、LP-a和NEFA指标均明显高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；TG、TC、HDL-C、LDL-C、LP-a、NEFA和s-BAP与OT、s-NTX、TrACP均有相关性(P<0.05)，其中s-BAP与LDL-C呈显著正相关(r=0.817，P=0.022)，OT与NEFA呈显著负相关(r=-0.766，P=0.031)，s-NTX与TC呈显著正相关(r=0.841，P=0.021)，TrACP与TG呈显著正相关(r=0.812，P=0.025)。结论 绝经后女性非酒精性脂肪性肝病患者血脂指标与骨生化指标有一定的相关性，有助于对绝经后女性非酒精性脂肪性肝病患者发生骨代谢异常的预防、诊断和治疗。

非酒精性脂肪性肝病； 维吾尔族； 汉族； 骨生化

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease NAFLD)是除酒精及其他明确的肝损害因素所致外，主要以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特征的临床病理综合征[1]。NAFLD相关的危险因素包括肥胖、糖尿病和血脂异常，NAFLD是代谢综合征(MS)和胰岛素抵抗的一种肝内表现[2-3]。大量研究表明MS的人群中存在骨代谢异常，表现为骨质疏松以及由此导致的骨折[4];原发性胆汁性肝硬化患者的骨质疏松及骨折风险明显上升[5]，这提示肝脏疾病也对骨质代谢有重要影响[6]。同时大量骨组织学研究发现，肝病患者骨钙物质含量明显低于正常人，骨质疏松症的发生率较高[7]。Moon等[8]研究证实，绝经后女性伴发NAFLD时有较高发生骨质疏松的风险。而NAFLD患者通常合并血脂紊乱，表现为肝脏生成极低密度脂蛋白(VLDL)增多伴脂蛋白清除减少，导致血清甘油三酯(TG)增高、高密度脂蛋白(HDL)和胆固醇下降以及低密度脂蛋白(LDL)和氧化LDL(ox-LDL)水平增高[9]。所以脂质异常有可能影响到骨质疏松的发生。

本研究立足于绝经后女性非酒精性脂肪性肝病患者，采用病例对照的研究方法对肝病、骨代谢和血脂三者之间的关系进行研究，探讨绝经后女性非酒精性脂肪性肝病患者血脂指标和骨生化指标的相关性, 进一步了解脂代谢和骨代谢的具体关系，同时探讨血脂对骨质疏松的影响，以期为绝经后女性非酒精性脂肪性肝病、骨质疏松和血脂的诊断、治疗和预防提供新的理论依据和基础。

1 资料与方法

1.1 一般资料本研究采用病例对照研究，选择2014年7月-2015年8月新疆医科大学第一附属医院收治的绝经后女性非酒精性脂肪性肝病患者400例作为病例组，将同期在本院健康体检中心的绝经后女性非脂肪性肝病体检者400例作为对照组。纳入标准：(1)做过上腹部CT、骨代谢检测及血液生化分析3项检查；(2)符合非酒精性脂肪性肝病诊断标准：无饮酒史或饮酒折合乙醇量<140 g/w(女性<70 g/w)，除外可导致脂肪肝的特定疾病，如药物性肝病、自身免疫性肝病、全胃肠外营养、干豆状核变性及病毒性肝炎等；(3)在新疆居住10 a以上的绝经后女性(年龄>45岁)。排除标准：(1)上腹部CT、骨代谢检测及血液生化分析3项检查时间间隔超过10 d；(2)患有肝硬化、肝内肿瘤及(或)其他可影响肝脏脂肪密度疾病；(3)服用过可影响骨代谢的药物，既往有脊椎侧弯、髋关节置换、腰椎严重退行性变、腰椎及左髋部骨折、腰椎术后异物、严重的骨性关节炎以及患有可影响骨代谢的疾病。

1.2 问卷调查由经过统一培训的调查员发放统一的调查问卷，收集受检者的基本信息、饮食运动习惯、饮酒量、饮酒的种类、饮酒史和疾病家族遗传史等信息。

1.3 非酒精性脂肪性肝病的诊断标准(1)无饮酒史或饮酒折合乙醇量<140 g/w(女性<70 g/w)；(2)除外可导致脂肪肝的特定疾病，如药物性肝病、自身免疫性肝病、全胃肠外营养、干豆状核变性及病毒性肝炎等；(3)肝组织的病理学活检改变符合脂肪肝性肝病的诊断标准。由于肝组织学活检难以获得，故只要肝脏影像学的检查符合弥漫性脂肪肝的诊断标准且无其他原因可供解释。

1.4 骨生化指标的检测(1)方法：所有受检者空腹12 h后，于次日清晨抽取前臂静脉血3～4 mL，离心抽取血清，装入事先编号的试管里。分离出血清，然后由检验科同一操作人员严格按说明书逐一测定。(2)测定指标：骨形成指标：血清骨特异性碱性磷酸酶(sBAP)、骨钙素(OT)；骨吸收指标：I型胶原氨基末端肽(sNTX)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TrACP)。(3)测量设备：采用美国的METRA生物系统公司的ELISA试剂盒测定血清骨特异性碱性磷酸酶(sBAP)，批内精密度CV<5.2%和批间精密度CV<5.8%，单位以U/L表示，检测最小值为0.71 U/L，批号C2014123010。采用罗氏E601全自动化学发光分析仪及罗氏原装配套试剂测定骨钙素(OT)。采用美国Ostex International公司的ELISA盒测定Ⅰ型胶原氨基末端肽(sNTX)，批内精密度CV<4.6%和批间精密度CV<6.9%，单位以nM BCE/mL表示(BCE为人骨胶原当量)，批号C2014123020。采用美国Ostex International公司的ELISA盒测定抗酒石酸酸性磷酸酶(TrACP)，批内精密度CV<6.7%和批间精密度CV<7.2%，单位以U/L表示，检测最小值为0.61 U/L，批号C2014123030。

1.5 血脂指标的检测(1)方法：所有受检者空腹12 h后，于次日清晨抽取前臂静脉血3～4 mL，离心抽取血清，装入事先编号的试管里。分离出血清，然后由检验科同一操作人员严格按说明书逐一测定。(2)测定指标：总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、脂蛋白a(Lp-a)及游离脂肪酸(NEFA)。(3)测量设备：采用罗氏C8000全自动生化分析仪及罗氏原装配套试剂、校准品和质控品。

2 结果

2.1 病例组与对照组一般临床资料的比较病例组与对照组年龄、闭经年龄、身高、GLU、TC和HDL-C比较差异均无统计学意义，提示两组间均衡可比。病例组体质量、体质指数(BMI)、TG、LDL-C、LP-a和NEFA均高于对照组，差异均具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.2 病例组与对照组骨生化指标的比较病例组s-BAP、s-NTX、TrACP均高于对照组；病例组OT低于对照组，差异均具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 病例组与对照组一般临床资料的比较(±s)

表2 病例组与对照组骨生化指标的比较(±s)

2.3 病例组血脂指标和骨生化指标的相关性分析TG、TC、HDL-C、LDL-C、LP-a、NEFA和s-BAP与OT、s-NTX、TrACP均有相关性，其中s-BAP与TC和LDL-C呈显著正相关，其与LDL-C相关性最强(r=0.817，P=0.022)；OT与TG和NEFA呈显著负相关，其与NEFA相关性最强(r=-0.766，P=0.031)；s-NTX与TC和LDL-C呈显著正相关，其与TC相关性最强(r=0.841，P=0.021)；TrACP与TG和Lp-a呈显著正相关，其与Lp-a相关性最强(r=0.812，P=0.025)，见表3。

3 讨论

本研究立足于绝经后女性非酒精性脂肪性肝病患者，采用病例对照的研究方法对肝病、骨代谢和血脂三者之间的关系进行研究，结果发现绝经后非酒精性脂肪性肝病患者的TG、TC、HDL-C、LDL-C、LP-a、NEFA指标均明显高于对照组。据报道，NAFLD在西方国家十分常见，估计普通人群中患病率为20%～30% ，其中在肥胖或糖尿病人群中达到70%～90%[10]。近年来NAFLD在亚太地区呈上升趋势，患病率接近北美[11]。我国NAFLD的流行态势同样不容乐观，上海市成人NAFLD患病率高达15%，在确诊为NAFLD的患者中30%～100%具有肥胖，10%～75% 有2型糖尿病，10%～92%有高脂血症，显示与代谢综合征(MS)关系密切[12]。进一步证明非酒精性脂肪性肝病患者的血脂水平较正常人紊乱或高于正常人。

表3 绝经后女性非酒精性脂肪性肝病血脂指标与骨生化指标的相关性分析(r值)

指标维吾尔族(n=200)r值P值汉族(n=200)r值P值s-BAP/(U/L)甘油三酯/(mmol/L)0.6660.5910.6670.308总胆固醇/(mmol/L)0.7620.0420.7590.046高密度脂蛋白/(mmol/L)0.4030.9580.3130.431低密度脂蛋白/(mmol/L)0.8170.0220.8050.034脂蛋白-a/(mg/dL)0.5560.8410.5900.675游离脂肪酸/(mmol/L)0.5570.9580.4700.231OT/(ng/mL)甘油三酯/(mmol/L)-0.7220.038-0.7330.033总胆固醇/(mmol/L)0.5020.1250.5690.891高密度脂蛋白/(mmol/L)0.4110.9800.4120.897低密度脂蛋白/(mmol/L)0.6120.2290.5900.104脂蛋白-a/(mg/dL)0.4070.9790.3270.327游离脂肪酸/(mmol/L)-0.7660.031-0.7760.029s-NTX/(nmBCE/mL)甘油三酯/(mmol/L)0.5910.9090.5000.105总胆固醇/(mmol/L)0.8410.0210.8320.037高密度脂蛋白/(mmol/L)0.4990.8720.4900.306低密度脂蛋白/(mmol/L)0.7370.0340.8830.031脂蛋白-a/(mg/dL)0.5670.5690.5680.648游离脂肪酸/(mmol/L)0.4100.1590.4900.243TrACP/(U/L)甘油三酯/(mmol/L)0.8120.0250.7740.038总胆固醇/(mmol/L)0.7790.0410.7890.037高密度脂蛋白/(mmol/L)0.3970.6420.3000.981低密度脂蛋白/(mmol/L)0.6440.2770.6470.472脂蛋白-a/(mg/dL)0.5350.4450.3900.827游离脂肪酸/(mmol/L)0.3800.7870.3000.711

王碧玉等[13]研究显示，NAFLD患者体内存在糖、脂类代谢紊乱，骨转化率减少，降低了体内骨钙素的水平，出现脂肪的堆积，表明骨钙素水平与体内脂肪含量存在负相关。本研究更全面地了解骨生化指标和一些血脂指标的关系，结果发现TG、TC、HDL-C、LDL-C、LP-a、NEFA与s-BAP、OT、s-NTX、TrACP均有相关性。其中s-BAP与TC和LDL-C呈显著正相关，其与LDL-C相关性最强(r=0.817，P=0.022)，这可能与s-BAP受HDL的保护作用减弱和受LDL的影响增强有关。OT与TG和NEFA呈显著负相关，其与NEFA相关性最强(r=-0.766，P=0.031)；血清OT的水平与胰岛素敏感性有相关性[14-15]。运动后OT水平的变化与运动后血糖水平的变化具有相关性[16]，进一步证实OT和NEFA在绝经后女性非酒精性脂肪性肝病发生和发展中的作用。s-NTX与TC和LDL-C呈显著正相关，其与TC相关性最强(r=0.841，P=0.021)；Luegmayr等[17]进行胆固醇与破骨细胞的相关性研究，结果证明破骨细胞依赖于脂蛋白来调节细胞内的胆固醇水平，而这种调节过程控制破骨细胞的形成和生存，通过低密度脂蛋白运输的胆固醇可明显提高破骨细胞的生存能力，与本研究的结果具有一致性。TrACP与TG和Lp-a呈显著正相关，其与Lp-a相关性最强(r=0.812，P=0.025)，提示TrACP与TG在某些方面存在着功能上的联系性，对于其具体的联系形式，还需要进行更进一步的动物实验。

本研究也具有一些局限性：首先，NAFLD需要排除饮酒过度的患者，而本研究中，酒精的摄入量通常是利用健康自我评估问卷进行调查，但调查过程中被调查者往往会少报数量，这可能会影响研究结果；然而目前只有这唯一的一种方式调查酒精的摄入量，其他并没有更好的办法。第二，不能很好地收集绝经期情况的病史，受试者多为年老体弱者，记忆力有所减退，往往不能很明确地说出哪一年绝经，使数据的准确性受到一定的影响。第三，超声对诊断脂肪肝是一个比较广泛的诊断方式。然而，脂肪肝的定义是在正常的肝脏细胞中甘油三酯滴>5%即为脂肪肝[18]。超声的准确性和可靠性来探查脂肪变性具有不定性[19-20]。

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(本文编辑 张巧莲)

Correlation between nonalcoholic fatty liver disease and bone biochemical indicators in postmenopausal women

ZHANG Li1,2， AN Hengqing3， CHEN Yan1

(1CollegeofPublicHealth,XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830011，China;2DepartmentofMedicalExaminationCenter,3DepartmentofUrologySurgery,theFirstAffiliatedHospitalofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi830054，China)

Objective To explore the correlation between nonalcoholic fatty liver disease blood lipid indicators and bone biochemical indicators in postmenopausal women. Methods During July of 2014 to August of 2015, 800 cases were selected from people who were physically examined in the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University as the subjects. According to the design principle of 1∶1 case control study, 400 cases of patients and control group, 200 cases of Uygur and Han nationality in case group and control group. The blood and bone biochemical markers were detected and the correlation analysis was carried out. Results Triglyceride (TG), total cholesterol (TC), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), lipoprotein a (LP-a), non esterified fatty acid (NEFA) in the case group were significantly higher than those in the control group and had statistical significance (P<0.05).TG,TC,HDL-C,LDL-C,LP-a,NEFAands-BAP,OT,s-NTX,TrACPhavecorrelation(P<0.05).sBAPandLDL-Cweresignificantlypositivelycorrelated(r=0.817,P=0.022),OTandNEFAweresignificantlynegativelycorrelated(r=-0.766,P=0.031),s-NTXandTCweresignificantlypositivelycorrelated(r=0.841,P=0.021),TrACPandTGweresignificantlypositivelycorrelated(r=0.812,P=0.025). Conclusion There is a certain correlation between the serum index and the bone biochemical parameters of the non-alcoholic fatty liver disease in postmenopausal women. And this study was contribute to diagnosis and treatment of abnormal bone metabolism in postmenopausal women with non-alcoholic fatty liver disease.

non-alcoholic fatty liver disease; Uygur; Han; bone metabolism

中华医学会基金项目(CAMB032010)

张 丽(1982-)，女，在读硕士，研究方向：疾病预防与控制。

陈 艳，女，教授，研究方向：疾病预防与控制，E-mail：834931595@qq.com。

R

A

1009-5551(2015)12-1496-05

10.3969/j.issn.1009-5551.2015.12.010

2015-09-15]