血清标本的保存条件对胃泌素释放肽前体检测结果的影响

张 铁，邵 茁，李 江，王云亭

（1.中日友好医院 检验科；2.中日友好医院，北京 100029）

我国医疗资源配置呈倒三角形， 优质资源大多集中在一线省会等大城市，又以中心城区居多。而乡镇医疗机构的检验设备和检测能力都远不及城市大医院，检验人员素质也参差不齐，无法保证检验结果的准确性和可靠性。 相当数量的基层医院选择将标本外送至第三方实验室。 第三方实验室在仪器、设备、技术方面优势明显，检验过程的质量控制基本比较完善， 而分析前标本收集为较薄弱的环节[1]，这个环节在许多医院及第三方实验室往往被忽视。 据统计，约70%检验结果的差错可溯源到分析前因素[2]。 为探讨这一问题，我实验室于2014 年9～12 月对标本放置时间和温度对胃泌素释放肽前体 （pro-gastrin-releasing peptide，ProGRP）检验结果的影响进行分析，并提出解决措施。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择2008 年5 月在本院参加健康体检的20名志愿者为检测对象，男、女各10 名，年龄30～50岁，平均38 岁。

1.2 仪器与试剂

采用美国雅培I-2000 全自动化学发光仪检测，试剂、标准品及质控为美国雅培公司提供。

1.3 采血与检测

受试者隔夜空腹12h 后， 真空采血管收集非抗凝血，分离血清，采用美国雅培I-2000 全自动化学发光仪检测血清ProGRP。 标本分离后，每份血清分装13 管，分别放置20℃， 4℃和-20℃冰箱保存， 分析存放时间和方式对ProGRP 测定值的影响。 检测时间的设置分别为：20℃： 即刻、6h、24h、48h、96h；4℃和-20℃：6h、24h、48h、96h。

1.4 统计学方法

统计分析应用SPSS19.0 统计软件进行。存放时间和保存方式对ProGRP 检测的影响采用方差检验和t检验。

2 结果

2.1 不同温度及保存条件下的ProGRP 浓度变化

对即刻、6h、24h、48h、96h 在20℃放置标本进行ProGRP 浓度测定， 同时对4℃和-20℃低温冰箱保存标本进行6h、24h、48 h、96h 时间点的Pro-GRP 测定。 20℃条件下，ProGRP 测定值随放置时间呈现逐渐显著下降趋势， 各时段间的测定值均差异有显著性， 与即刻ProGRP 测得值间差异显著 （P<0.05，P<0.01）；4℃保存的标本测定值随放置时间呈现逐渐显著下降趋势，6h 的测得值与即刻ProGRP 测得值间无显著差异，24h、48h、96h 的ProGRP 与即刻ProGRP 测得值间有显著差异（P<0.05，P<0.01），-20℃冰箱保存的ProGRP 测定值间均无显著性差异，见表1。

2.2 相同时间点不同保存条件下的ProGRP 浓度变化

同一时间点不同保存条件下ProGRP 检测值间差异显著，6h、24h、48h、96h 时20℃放置标本测得值显著低于4℃和-20℃保存标本（均P<0.05），4℃保存标本ProGRP 检测值显著低于-20℃保存标本（均P<0.05）。

表1 不同温度及保存条件下的ProGRP 浓度变化

3 讨论

胃泌素释放肽（GRP）是小细胞肺癌（SCLC）组织的重要产物， 被认为是小细胞肺癌的特异性肿瘤标志物。 早在1978 年McDonald 等就从猪的胃组织细胞中分离出了GRP，GRP 被认为是SCLC 的自主生长因子[3]， 然而血中GRP 极不稳定，不能用于临床检测。 后续大量研究证实Pro-GRP（31-98） 水平能够代表GRP 水平和GRP 基因表达[4]，是一种新的肿瘤标志物，这使得以Pro-GRP 作为SCLC 的重要肿瘤标志物成为可能。ProGRP 于1994 年被开发为小细胞肺癌患者的肿瘤标志物。 目前，由于血中ProGRP 测定已成为一种高精度、高灵敏度、易实行的检测方法，在临床应用领域大大增加， 其在医学上的价值也得到广泛验证和认可，所以当前临床标本量也大大增加，有必要对标本的不同保存条件对检测结果的影响进行探讨[5]，以避免检验前影响因素对实验结果的影响。

我们的实验结果显示在6h 内4℃保存的标本对检测结果没有影响，-20℃保存的标本在4d内结果与即刻测定结果间均无显著差异，20℃保存的标本测得值随放置时间呈现逐渐显著下降趋势， 各时段测定值间均存在显著性差异， 与即刻ProGRP 测定值间差异显著，这与文献报道相符[6]。综上所述，ProGRP 的标本4℃条件下可保存6h，-20℃保存可延长至4d， 应尽量避免室温放置。临床检验工作的任务是保证检测结果准确性，为临床诊断提供有力的依据， 在方法的准确性和灵敏度得到保证的情况下， 检测标本采集和存放必须符合检测要求。ProGRP 的标本要求尽量及时检测[7]，如不能及时检测，可将标本在-20℃保存，对检测结果基本没有影响， 能很好地满足临床诊疗的需求， 如将标本外送至第三方医学实验室检测，最好采用-20℃冷链运输。

[1] 黄斯瑜，李尔凡.血液标本采集过程对检测结果的影响分析[J].实验与检验医学，2013，31（2）：191-192.

[2] 陈江敏.探究血液标本采集质量与检验结果关系[J].中外医疗，2013，32（15）：39-40，42.

[3] Molina R，Filella X，Augé JM.ProGRP：a new biomarker for small cell lung cancer [J].Clin Biochem，2004，37 （7）：505-511.

[4] 胡义德，钱桂生.小细胞肺癌综合治疗：实践指南[J/CD].中华肺部疾病杂志（电子版），2011，4（5）：356-359.

[5] 彭夕芝，徐杰，李慧军.临床实验室分析前的质量控制[J].检验医学与临床，2011，5：635-636.

[6] Stieber P.Pro-gastrin-releasing peptide（ProGRP）-a diagnostic biomarker for small-cell lung cancer [J].Chinese Journal of Lung Cancer，2009，183-186.

[7] Nisman B，Biran H，Ramu.The diagnostic and prognostic value of ProGRP in lung cancer [J].Anticancer Research，2009，29（11）：4827-4832.