降压草的组织培养技术研究

2015-06-10郭福生陈淑华王漫叶雅玲

防护林科技 2015年6期

郭福生，陈淑华，王漫，叶雅玲

（1.白城市到保机械林场，吉林白城 137000；2.白城市林业科学研究院，吉林白城 137000）

降压草为菊科三七草属多年生宿根常绿草本植物，是从东南亚引进的一种稀有天然药用植物，高25～35cm。该草对高血压、动脉硬化、脑溢血后遗症、脑血栓、脑梗死均有特殊疗效。降压草用法简便，坚持每天当茶（沸水浸泡）饮用，可降低血脂、血黏度等。由于其社会需求量大，且要求高品质，我们采用了组织培养对其进行繁殖。降压草的培育成功，填补了我国利用天然稀有植物降血压、降血脂、防治心血管等多种疾病的空白。

1 试验材料和方法

1.1 试验材料

选用白城市林业科学研究院选育的降压草优株2号新品种为试材。

1.2 试验方法

1.2.1 取材消毒与接种在春季采剪生长旺盛的嫩枝，冲洗干净，切成带腋芽的茎段，用70%的酒精消毒20～30s，无菌水冲洗2次；0.1%的HgCI2消毒6～8min，无菌水冲洗2次，接种于空白培养基。接种时将茎段两端接触消毒液的切口剪掉，外植体长3.0～5.0cm，当嫩鞘长至1.5～2.0cm时，转至附加不同浓度的培养基中，观察芽的诱导、增殖与生长的规律。

1.2.2 基本培养基选择将茎段分别在MS、1／2MS和B5培养基中附加6－BA1.0mgL－1＋NAA0.1mgL－1的培养基中培养30d，观察不同培养基对诱导外植体分化的影响，确定适宜培养基类型。

1.2.3 愈伤组织的诱导和初代培养将经消毒的外植体接种于培养基中，在25±2℃条件下培养15 d左右，茎段边缘切口处出现淡绿色愈伤组织。经10d左右的诱导培养，形成的愈伤组织转入分化培养基中进行不定芽分化，分化培养20d，可见愈伤组织出现绿色小突起，继续培养则分化成不定芽。为了解基本培养基、激素组合对腋芽萌发的影响，采用3因素3水平9个处理试验，每瓶接种外植体1个，多个处理接种12瓶，重复3次。

表1 初代培养诱导丛生芽9处理

2.3 继代增殖培养基的选择

通过初代培养基而获得的无菌苗，丛生芽的数量是有限的，需要继代培养增殖来扩大繁殖系数。考虑到细胞分裂素和生长素之间可能存在交互作用，为了更准确详细地研究丛生芽的增殖问题，分别选取不同含量的细胞分裂素和生长素进行诱导分化，选择采用3因素3水平试验，观察降压草增殖培养结果。

表2 继代增殖培养诱导分化9处理

2 结果与分析

2.1 降压草基本培养基的选择及培养条件

由表3可知，MS培养基褐变率最低，分化率最高，较适合降压草的快繁。以MS为基本培养基，除特别说明，均附加蔗糖20gL－1，琼脂8gL－1，pH5.8。培养基在121℃下灭菌25min，培养温度25℃，光照强度2 000lx，光照12h。

表3 不同培养基对诱导外植体分化的影响

2.2 降压草愈伤组织的诱导和初代培养

试验的9个处理中，处理5：MS＋6－BA0.5 mgL－1＋NAA0.1mgL－1＋IAA0.2mgL－1，诱导的丛生芽较粗壮，分生系数较高，最适宜降压草的丛生芽诱导；处理1－3培养基基本不分生；处理4：MS＋6－BA0.5mgL－1＋IAA0.1mgL－1诱导的丛生芽细，分生系数低；而处理6－9分生系数最高，但芽苗细弱，不适合进一步培养。

2.3 继代增殖培养

将上一阶段诱导培养的丛生芽切成小块继代和增殖，降压草刚增殖时，嫩茎条增加的倍数比较低，几次继代后，倍数加大，壮苗增加。不同的6－BA和NAA对继代增殖的影响效果是不同的。观察降压草增殖培养结果，处理6号MS＋6－BA 0.8mg L－1＋NAA0.5mgL－1＋IBA0.1mgL－1的继代效果最好。