肠癌组织中微小染色体维持蛋白2的高表达与肠癌肝转移及临床病理特征的关系

王治伟，李福广，熊裕民，赵子龙

论著·临床

肠癌组织中微小染色体维持蛋白2的高表达与肠癌肝转移及临床病理特征的关系

王治伟，李福广，熊裕民，赵子龙

目的 探究肠癌组织中微小染色体维持蛋白2(MCM2) 的高表达与肠癌肝转移及临床病理特征的关系。方法 2009年1月—2014年1月收治大肠癌患者215例，其中肝转移88例为肝转移组，另127例为无肝转移组，同时选择60例健康者为健康对照组。比较3组血浆MCM2水平，以及肝转移组与无肝转移组肠癌组织MCM2表达情况，分析MCM2表达与临床病理特征的关系。结果 与健康对照组比较，肠癌肝转移组和无肝转移组MCM2水平均升高(P<0.05)，且肝转移组MCM2水平高于无肝转移组(P<0.05)；肠癌肝转移组MCM2高表达率为76.1%(67/88)，高于肠癌无肝转移组的46.5%(59/127)(P<0.05)；MCM2高表达与肠癌TNM分期、分化程度及淋巴转移密切相关(χ2=5.005、4.263、4.388，P<0.05)。结论 MCM2高表达与大肠癌肝转移、TNM分期、分化程度、淋巴转移密切相关。

肠癌；肝转移；微小染色体维持蛋白2；临床病理

大肠癌发病率较高，部分大肠癌患者在确诊时已出现肝转移[1]。肠癌肝转移患者预后差，近远期生存率低[2～4]。大肠癌中存在肿瘤细胞异常增殖，微小染色体维持蛋白2(minichromosome maintenance protein 2，MCM2)为DNA复制时的重要相关标志物，与肿瘤细胞异常增殖有关，在正常情况下表达水平不高，而在细胞过度增殖时其水平可不断升高[5，6]。由于MCM2的表达特异性，其现已成为肿瘤诊断的主要标志物[7]。现探讨MCM2的表达与肠癌肝转移及临床病理的关系，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2009年1月—2014年1月我院收治的大肠癌患者215例为研究对象，均经病理证实为大肠癌。剔除在随访过程中失去联系的患者。215例中男133例，女82例；年龄34～75(54±5)岁。其中出现肝转移88例(肝转移组)：男52例，女36例;年龄34～71(56±6)岁, 病程3～7(4±1)年；合并糖尿病19例，合并高血压22例，接受过放射治疗25例，有家族遗传史41例。肠癌无肝转移患者127例(无肝转移组)：男81例，女46例;年龄34～75(52±4)岁；病程2～6(3±1)年；合并糖尿病15例，合并高血压20例，接受过放射治疗16例，有家族遗传史38例。选择同期在我院健康体检的健康者60例为健康对照组：男32例，女28例;年龄35～75(54±4)岁。3组在性别、年龄等基本资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。肠癌患者肝转移组和无肝转移组在病程、基础合并症、既往治疗史、家族遗传史方面比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究获我院伦理委员会审批通过，患者及家属知情同意并签署知情同意书。

1.2 观测指标与方法[4，5]

1.2.1 血浆MCM2测定(ELISA法): 3组于清晨空腹状态下抽取外周肘静脉血5 ml，3 500 r/min离心10 min，上清液-80℃保存待测；采用双抗体夹心ELISA法检测MCM2水平；试剂盒购自于上海华大科技有限公司，严格按照说明书操作。

1.2.2 癌组织 MCM2测定(免疫组化法)：选用的病理组织蜡块在切片后脱蜡，再经免疫组化法进行显色。选择英国Abcan公司提供的鼠抗人MCM2多克隆抗体，最后用苏木素进行复染程序后在显微镜下观察，当细胞核中出现棕黄色颗粒记为MCM2阳性细胞。其中在显微镜( XTJ-4600，梧州光学仪器厂)观察区域内细胞阳性比例超过50%记为高表达，相反≤50%记为低表达。

2 结 果

2.1 血浆MCM2水平比较 与健康对照组比较，肠癌肝转移组、无肝转移组血浆MCM2水平均升高(P<0.05)，肝转移组MCM2水平高于无肝转移组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 3组血浆MCM2水平及癌组织MCM2表达情况比较

注：与健康对照组比较，aP<0.05；与无肝转移组比较，bP<0.052.2 肠癌组织MCM2高表达比较 肠癌肝转移组癌组织MCM2高表达率为76.1%，显著高于肠癌无肝转移组的46.5%(P<0.01)。见表1，图1、2(见插页4)。

2.3 肠癌组织MCM2表达与临床病理特征的关系 根据肠癌组织MCM2表达情况将215例患者分为高表达亚组(126例)和低表达亚组(89例)。结果显示，MCM2高表达与肠癌TNM分期、分化程度及淋巴转移密切相关(P<0.05)。见表2。

表2 MCM2表达与临床病理特征的关系 [例(%)]

3 讨 论

大肠癌为消化系统恶性肿瘤，发病率居消化道恶性肿瘤第2位，病死率高，其中肠癌伴发肝转移患者预后极差，近远期生存率低[8]。一般大肠癌在发病早期得到确诊并进行及时治疗不仅能提高生存率，亦可降低肝转移发生率。MCM2是DNA复制中的主要组成物[9]，在DNA复制前期，通过与主要过程因子的结合形成复合体，从而引起DNA的复制。当恶性肿瘤细胞不断增殖时可出现MCM2高表达。MCM2独特的性质使得其成为肿瘤标志物，其对肿瘤的发生及严重程度的判定均有较高的价值[10]。研究显示，MCM2的异常表达与大肠癌肝转移密切相关[11，12]。本结果显示，肠癌伴肝转移组MCM2水平明显高于肠癌无肝转移组及健康对照组，而免疫组化结果亦显示，肠癌伴肝转移组癌组织中MCM2高表达率高于肠癌无肝转移组。表明MCM2的异常表达与肠癌肝转移密切相关，MCM2的高表达可能参与了肠癌肝转移的发生过程。

本结果显示，MCM2高表达与肠癌肝转移、TNM分期、分化程度及淋巴转移等因素有关。与Schmidt等[12]的研究结果相符。表明大肠癌肝转移患者MCM2表达水平相对更高，MCM2表达与肿瘤严重程度、淋巴转移存在一定相关性。MCM2主要是在DNA复制中对细胞分裂起作用来加大细胞增殖速度，从而作为肿瘤标志物。在大肠癌转移的患者中由于细胞增殖转移的需要，导致所需MCM2越多，进一步刺激了MCM2的表达，两者相互恶性循环，能高效代表肿瘤转移水平[10]。当TNM分期越高，即大肠癌越严重时就会出现扩散及转移，所以MCM2水平不断增高。同样，在分化程度越大、淋巴转移的患者中也观察到MCM2水平升高。这也说明MCM2表达水平的高低在一定程度上能代表TNM分期和分化程度，并能辅助判断是否出现肝转移和淋巴转移[13，14]。大肠癌肝转移患者多会选择肝切除来治疗疾病，也有部分患者坚持放化疗来治疗。但肝转移后的恶化程度在一定程度上影响预后结果，若在治疗前能准确判断大肠癌严重程度能帮助患者选择最佳治疗方案[15，16]。不仅增大治疗效率，还减少患者经济压力。因此，MCM2水平对大肠癌肝转移具有较高的研究价值，可以作为诊断及预后的观察指标。

综上所述，大肠癌中血浆MCM2出现异常表达，组织中MCM2高表达与大肠癌肝转移、TNM分期、分化程度、淋巴转移密切相关。

1 苏琳,吕春龙,高品,等.β1整合素在结直肠癌肝转移组织中的表达及其临床意义[J].中华实验外科杂志,2014,31(9):2029-2031.

2 姚宏伟,修典荣,付卫,等.腹腔镜手术治疗可切除的结直肠癌伴肝转移的前瞻性病例系列研究[J].中华外科杂志,2014,52(12):919-923.

3 Liu Y,He G,Wang Y,et al.MCM-2 is a therapeutic target of Trichostatin A in colon cancer cells[J].Toxicol Lett,2013,221(1):23-30.

4 陈琼荣,王满香,魏少忠.结直肠癌肝转移的过程及分子机制[J].中华普通外科杂志,2014,29(9):734-736.

5 王晓林,熊枝繁,曹仕琼,等.肝细胞肝癌组织MCM2和FAP-1表达及其与癌细胞增殖和凋亡的相关性研究[J].中华肿瘤防治杂志,2011,18(3):205-207.

6 Guzińska-Ustymowicz K,Pryczynicz A,Kemona A,et al.Correlation between proliferation markers: PCNA, Ki-67, MCM-2 and antiapoptotic protein Bcl-2 in colorectal cancer[J].Anticancer Res,2009,29(8):3049-3052.

7 侯芸,王华庆,傅凯,等.细胞分裂周期相关蛋白激酶7和微小染色体维持蛋白2的表达与弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后的关系[J].中华肿瘤杂志,2011,33(12):911-915.

8 吕远,李世拥,安萍,等.骨桥蛋白与结直肠癌及肝转移关系研究进展[J/CD].中华普外科手术学杂志:电子版,2014,1(2):178-180.

9 Liu Y,He G,Wang Y,et al.MCM-2 is a therapeutic target of Trichostatin A in colon cancer cells[J].Toxicol Lett,2013,221(1):23-30.

10 Giaginis C,Georgiadou M,Dimakopoulou K,et al.Clinical significance of MCM-2 and MCM-5 expression in colon cancer: association with clinicopathological parameters and tumor proliferative capacity[J].Dig Dis Sci,2009,54(2):282-291.

11 Kwon HJ,Hong YK,Park C,et al.Widdrol induces cell cycle arrest,associated withMCM down-regulation,in human colon adenocarcinoma cells[J].Cancer Lett,2010,290(1):96-103.

12 Schmidt T,Strowitzki MJ,Reissfelder CA,et al.Influence of age on resection of colorectal liver metastases[J].J Surg Oncol,2015,111(6):729-739.

13 王永,宋怡才,尹作文,等.细胞增殖标记物MCM2在结直肠腺瘤的表达差异及意义[J/CD].中华普通外科学文献:电子版,2013,1(3):174-178.

14 栗东海,刘明.存活素、微小染色体维持蛋白2在乳腺癌中的表达及其临床意义[J/CD].中华乳腺病杂志:电子版,2013,7(4):15-18.

15 李毅,冯强,刘树延，等.大肠癌患者外周血细胞角蛋白-20信使核糖核酸与白细胞介素-10联合检测的临床意义[J].中国煤炭工业医学杂志,2003,6(3):276-278.

16 史敬朋,李本辉,李秀杰.改良FOLFOX6方案治疗大肠癌根治术后63例疗效观察[J].中国煤炭工业医学杂志,2010,13(7):1007-1008.

《疑难病杂志》可直接使用的英文缩略语

T(体温) R(呼吸) HR(心率) BP(血压)

SBP(收缩压) DBP(舒张压) ECG(心电图) EEG(脑电图)

Hb(血红蛋白) RBC(红细胞) WBC(白细胞) N(中性粒细胞)

L(淋巴细胞) M(单核细胞) E(嗜酸粒细胞) PLT(血小板)

ESR(红细胞沉降率) HCT(红细胞压积) TG(三酰甘油) TC(总胆固醇)

CH(胆固醇) LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇) HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇) SCr(血肌酐)

UA尿酸 NO(一氧化氮) BUN(血尿素氮) T3(三碘甲状腺原氨酸)

T4(甲状腺素) ALT(丙氨酸氨基转移酶) AST(天冬氨酸氨基转移酶) APTT(活化部分凝血活酶时间)

PaO2(动脉血氧分压) PaCO2(动脉血二氧化碳分压) SaO2动脉血氧饱和度 IU或U(酶活力的国际单位)

The expression of minichromosome maintenance protein 2 in colorectal cancer with liver metastases and the clinical significance

WANGZhiwei*,LIFuguang,XIONGYumin,ZHAOZilong.*DepartmentofSurgery,AnkangCentralHospital,ShanxiProvince,Ankang725000,China

Objective To explore the relationship between the expression of 2 (MCM2) in colorectal cancer tissues and the clinical pathological characteristics of colorectal cancer.Methods From January 2009 to January 2014, 215colorectal cancer patients were enrolled, 88 patients with hepatic metastasis as liver metastases group, 127 cases as non-liver metastasis group, and 60 cases of healthy people as healthy control group. MCM2 levels in the 3 groups were compared, and the expression of MCM2 in the liver metastasis group and non-liver metastasis group were compared. The relationship between MCM2 expression and clinical pathological features was analyzed.Results Compared to the health control group, colon cancer liver metastasis group and non-liver metastases group’s level of MCM2 increased (P<0.05), and liver metastasis group’s level of MCM2 was higher than those in non-liver metastasis group (P<0.05); liver metastasis group’s MCM2 expression rate was 76.1% (67/88), which was higher than non-liver metastasis group’s 46.5% (59/127) (P<0.05); MCM2 expression and Colon Cancer TNM staging, differentiation degree and lymph node metastasis is closely related (χ2=5.005，4.263，4.388,P<0.05).Conclusion The high expression of MCM2 is related to liver metastasis of colorectal cancer, TNM staging, differentiation, lymphatic metastasis.

Colorectal cancer; Hepatic metastasis; Minichromosome maintenance protein 2; Clinical pathology

725000 陕西省安康市中心医院普通外科(王治伟、李福广、熊裕民)，病理科(赵子龙)

10.3969 / j.issn.1671-6450.2015.11.007

2015-06-04)