PDCD4在口腔鳞癌中的表达及意义

刘 桐，魏秀峰＊，孙 鑫，吕珊珊，唐冠群

（吉林大学口腔医院1.口腔黏膜病科；2.正畸科，吉林长春130021）

PDCD4在口腔鳞癌中的表达及意义

刘 桐1，魏秀峰1＊，孙 鑫1，吕珊珊1，唐冠群2

（吉林大学口腔医院1.口腔黏膜病科；2.正畸科，吉林长春130021）

目的研究PDCD4蛋白在口腔鳞癌组织中的表达及临床意义。方法 应用免疫组织化学SP法检测PDCD4蛋白在54例口腔鳞癌组织和15例正常口腔黏膜组织中的阳性表达，并结合临床资料进行统计学分析。结果

口腔鳞癌组织PDCD4蛋白的阳性表达率明显低于口腔正常黏膜组织（P＜0.01）。随着PDCD4表达水平的降低，口腔鳞癌恶性程度增高的可能性也随之增加（P＜0.05）。PDCD4蛋白表达与口腔鳞癌淋巴结转移无明显相关性（P＞0.05）。结论 PDCD4蛋白在口腔鳞癌中低表达，与口腔鳞癌的发生发展有密切联系。

口腔鳞状细胞癌；程序性细胞死亡因子4；免疫组织化学

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0220）

程序性细胞死亡因子4（programmed cell death 4，PDCD4）是一种在细胞调亡过程中表达上调的基因，其已被证实为是一种肿瘤抑制基因。已有研究［1－4］表明：PDCD4在许多人恶性肿瘤中表达下调或缺失，或能够促进多种肿瘤细胞发生凋亡，例如肾癌、胃癌、结肠癌以及尿路上皮癌等。但有关PDCD4在口腔鳞癌组织中的表达研究在国内尚未见报道。本研究利用免疫组织化学法，探讨PDCD4在口腔鳞状细胞癌发生发展中的影响以及与肿瘤临床病理分期的关系，检测PDCD4在口腔鳞癌中的表达并探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2011.01～2013.03吉林大学口腔医院口腔颌面外科收治的住院患者病理诊断明确的口腔鳞癌标本54例作为口腔鳞癌组（有淋巴结转移者23例，无淋巴结转移者31例），15例正常口腔黏膜组织作为对照组，所有患者术前都未作放疗、化疗及其它针对肿瘤的治疗。

1.2 主要试剂及仪器鼠抗人PDCD4抗体（美国圣克鲁斯生物技术公司），SP免疫组织化学试剂盒及DAB显色试剂盒（福州迈新生物技术开发有限公司），阳离子防脱玻片（北京中杉金桥生物技术有限公司）。

1.3 免疫组织化学法检测PDCD4的阳性表达

标本用10%甲醛固定，脱水，石蜡包埋。连续切片，切片厚度2μm，常规脱蜡，一抗稀释至1∶200，采用SP法染色，DAB显色，苏木精复染，常规脱水，干燥，封片。

1.4 PDCD4阳性表达判定标准PDCD4主要在核周、细胞浆阳性表达，棕黄色或黄褐色颗粒。在高倍视野下（400x），选取3～5个阳性视野进行计数，根据染色强度和阳性率进行评分判定。①染色强度：阴性—0分，染色弱但明显强于阴性对照者—1分，染色较强者—2分；染色强—3分。②阳性率：未见阳性细胞或阳性率＜10%为阴性（－）计0分，阳性率＜30%为阳性（＋）计1分，31%～60%为2分；＞60%为3分。上述两种分值相加大于等于3分为阳性［5］。

1.5 统计学分析结果采用SPSS17.0软件统计分析，PDCD4各组间阳性表达率采用χ2检验（必要时采用校正χ2检验或Fisher精确检验），以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PDCD4蛋白在不同组织中的表达率在正常口腔黏膜上皮组织中PDCD4阳性颗粒以核周、细胞浆表达为主，呈棕黄色或黄褐色颗粒，阳性部位以鳞状上皮的基底细胞、棘细胞多见（见图1），在口腔鳞癌组织中PDCD4阳性颗粒表达以细胞浆为主（见图2）。PDCD4在口腔鳞癌组织中的阳性表达率为35.2%（19／54），在正常口腔黏膜组织中的阳性表达率为100%（15／15），组间差异有显著统计学意义（P＜0.01）（见表1）。

2.2 PDCD4蛋白表达与口腔鳞癌恶性程度及淋巴结转移的关系PDCD4的阳性表达率随口腔鳞癌恶性程度的增高而降低，高分化及中分化鳞癌组织的PDCD4阳性表达率均高于低分化鳞癌组织，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05），而高分化与中分化口腔鳞癌组织间的PDCD4阳性表达率比较差异则无统计学意义（P＞0.05）。PDCD4阳性表达率在淋巴结转移组与无淋巴结转移组的组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）（见表2）。

表1 PDCD4蛋白在不同组织中的表达率

表2 PDCD4蛋白表达与口腔鳞癌恶性程度及淋巴结转移的关系

图1 PDCD4蛋白在正常口腔黏膜组织中的表达（SP×200）

图2 PDCD4蛋白在口腔鳞癌组织中的表达（SP×200）

3 讨论

口腔鳞状细胞癌是发生在口腔黏膜最为常见的恶性肿瘤。口腔鳞癌常向区域淋巴结转移，晚期可发生远处转移，其分化程度越差，恶性程度越高。近年来，口腔鳞癌的治疗已取得了很大的进展，但治疗手段仍以手术为主，会对患者造成一定程度伤害，而且患者接受治疗后的生存率也没有得到显著的提高。

PDCD4是一种新的肿瘤抑制因子。人PDCD4基因定位于染色体10q24［6］，PDCD4的主要功能之一就是抑制依赖于AP－1（系膜细胞内活化蛋白－1）的转录，从而抑制真核翻译起始因子eIF4A和eIF4G的功能［7，8］。有研究［9］发现PDCD4也可以与Twist1蛋白相互作用，从而下调YB－1（Y盒结合蛋白－1）的表达，抑制癌细胞的生长，并对某些化学疗法产生调节性的阻抗作用。Saxena等［10］研究发现抑制AR（醛糖还原酶）的活性后可以通过ROS／AMPK／mTOR／AP1／4E－B－P1等多条通路，下调microRNA－21的表达，致使PDCD4的表达增加，从而可以抑制结肠癌细胞生长。

本研究结果表明，PDCD4蛋白在正常口腔黏膜组织与口腔鳞癌组织中均有不同程度的表达，但在口腔鳞癌组织中的表达明显降低甚至缺失，而随着肿瘤临床病理分期越差，PDCD4表达程度越低。这提示着PDCD4可能与口腔鳞癌的发生发展与恶性程度密切相关。原因之一可能是因为失去了PDCD4的抑制作用，翻译起始因子呈现过表达从而发挥了类似癌基因的作用。Allgayer等［11］研究表明PDCD4可以作为结直肠癌预后的客观指标和潜在诊断标志。对于卵巢癌和结肠癌患者，PDCD4缺失是癌症相关生存率的一个预测指标［12，13］。在小鼠肺癌模型中，雾化给予PDCD4复合物能够促进细胞凋亡并抑制细胞增殖和肿瘤血管生成［14］。结合本研究结果，PDCD4也可能成为口腔鳞癌早期诊断与预后判断的客观指标。随着研究不断进展，对口腔鳞癌患者进行PDCD4靶基因治疗或许也会成为一个新的治疗途径。

［1］Li X，Xin S，Yang D，et al.Down－regulation of PDCD4expression is an independent predictor of poor prognosis in human renal cell carcinoma patients［J］.J Cancer Res Clin Onco1，2012，138（3）：529.

［2］Cao Z，Yoon J H，Nam S W，et al.PDCD4expression inversely correlated with miR－21levels in gastric cancers［J］.J Cancer Res Clin Onco1，2012，138（4）：611.

［3］Chang KH，Miller N，Kheirelseid EAH，et al.MicroRNA－21and PDCD4expression in colorectal cancer［J］.European Journal of Surgical Oncology，2011，37（7）：597.

［4］Fischer N，Göke F，Splittstösser V，et al.Expression of programmed cell death protein 4（PDCD4）and miR－21in urothelial carcinoma［J］.Biochem Biophys Res Commun，2012，417（1）：29.

［5］Zhang H，Ozaki I，Mizuta T，et al.Involvement of programmed cell death 4in transforming growth factor－betal－induced apoptosis in human hepatocellular careinoma［J］.Oncogene，2006，25（45）：6101.

［6］Soejima H，Miyoshi O，Yoshinaga H，et al.Assignment of the programmed cell death 4gene（PDCD4）to human chromosome band 10q24by in situ hybridization［J］.Cytogenet Cell Genet，1999，87（1－2）：113.

［7］Yang HS，Jansen AP，Nair R，et al.A novel transformation suppressor，Pdcd4，inhibits AP－1transactivation but not NF－kB or ODC transactivation［J］.Oncogene，2001，20（6）：669.

［8］Yang HS，Jansen AP，Komar AA，et al.The transformation suppressor Pdcd4is a novel eukaryotic translation initiation factor 4Abinding protein that inhibits translation［J］.Mol Cell.Biol，2003，23（1）：26.

［9］Shiota M，Izumi H，Tanimoto A，et al.Programmed cell death protein 4down－regulates Y－box binding protein－1expression via a direct interaction with Twist1to suppress cancer cell growth［J］.Cancer Res，2009，69（7）：3148.

［10］Saxena A，Shoeb M，Ramana KV，et al.Aldose reductase inhibition suppresses colon cancer cell viability by modulating microRNA－21mediated programmed cell death 4（PDCD4）expression［J］.Eur J Cancer，2013，49（15）：3311.

［11］Allgayer H.Pdcd4，a colon cancer prognostic that is regulated by a microRNA［J］.Crit Rev Oncol Hematol，2010，73（3）：185.

［12］Mudduluru G，Medved F，Grobholz R，et al.Loss of programmed cell death 4expression marks adenoma－carcinoma transition，correlates inversely with phosphorylated protein kinase B，and is an independent prognostic factor in resected colorectal cancer［J］.Cancer，2007，110（8）：1697.

［13］Wei NA，Liu SS，LeungTH，et al.Loss of Programmed cell death 4（Pdcd4）associates with the progression of ovarian cancer［J］.Mol Cancer，2009，8：70.

［14］Jin H，Kim TH，Hwang SK，et al.Aerosol delivery of urocanic acidmodified chitosan／programmed cell death 4complex regulated apoptosis，cell cycle，and angiogenesis in lungs of K－ras null mice［J］.Mol Cancer Ther，2006，5（4）：1041.

Expression and significance of PDCD4 in oral squamous cell carcinoma

LIU Tong，WEI Xiu－feng，SUN Xin，et al.

（Department of Oral Mucosal Diseases，Stomatology Hospital，Jilin University，Changchun130021，China）

ObjectiveTo investigate the expression and significance of PDCD4in oral squamous cell carcinoma.MethodsPDCD4immunohistochemical expression was investigated in 54cases of oral squamous cell carcinoma and 15 cases of normal oral mucosa tissue，analyze its relationship with clinical data.ResultsThe positive rate of PDCD4protein was significantly lower in oral squamous cell carcinomas than that in normal oral mucosa tissues（P＜0.01）.And with the decreasing of PDCD4protein expression level，the malignant degrees of oral squamous cell carcinoma were also increased，which had statistically significant difference among groups（P＜0.05）.But the expression of PDCD4protein were no relationship to lymph node metastasis（P＞0.05）.ConclusionThe down－regulated expression of PDCD4protein was correlated with the pathogenesis and development in oral squamous cell carcinomas.

oral squamous cell carcinoma；PDCD4；immunohistochemistry

R739.8

A

刘桐（1988－），男，山东省泰安市人，在读医学硕士，主要从事口腔黏膜病基础与临床方面的研究。

2014－03－03）

1007－4287（2015）02－0220－03

＊通讯作者