黄芪多糖配合心理护理对直肠癌术后患者细胞免疫及血清炎性因子表达的影响

张 娆，潘 琳，张露露，张显茹*

黄芪多糖配合心理护理对直肠癌术后患者细
胞免疫及血清炎性因子表达的影响

张 娆a，潘 琳b，张露露a，张显茹a*

目的 观察黄芪多糖配合心理护理对直肠癌术后患者细胞免疫及血清炎性因子表达的影响。方法 选取160例直肠癌患者随机分为常规护理组、心理护理组、黄芪多糖组和黄芪多糖配合心理护理组(联合组)。采用流式细胞术对患者外周血T 细胞亚群进行检测。应用实时定量PCR法和ELISA法检测各组患者血清炎性细胞因子 mRNA表达水平和蛋白浓度。结果 与常规护理组相比，黄芪多糖组患者手术后3项免疫指标(CD4+、CD4+/CD8+及NK)升高，血清中TNF-α的蛋白含量和mRNA表达水平明显下降；与常规护理组相比，心理护理组患者治疗后NK升高，TNF-α、IL-6和IL-8的蛋白含量和mRNA表达水平明显下降；与常规护理组相比，联合组患者治疗后细胞免疫4项指标(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK)升高，CD8+下降，血清中TNF-α、IL-6、IL-8和IL-12的蛋白含量和mRNA表达水平明显下降；与黄芪多糖组相比，联合组患者术后细胞免疫2项指标(CD3+和NK)升高，TNF-α和IL-12的蛋白含量和mRNA表达水平明显降低。结论 黄芪多糖配合心理护理不仅调节细胞免疫功能，还能降低直肠癌患者血清中炎性因子的表达水平，从而增强直肠癌患者免疫力。

黄芪多糖；心理护理；直肠癌；细胞因子

0 引言

随着生活方式的改变，我国直肠癌发病率在恶性肿瘤中从原来的第7位上升到第5位[1-2]。外科直肠癌手术作为综合治疗的重要组成部分，是当前治疗直肠癌的最有效的方法之一，手术可明显延长患者的生存期[3-4]。被确诊为直肠癌是严重的负性生活事件，对患者造成生理、心理、精神上的严重创伤，国内报道直肠癌患者抑郁发生率较高[5]。患者会出现情感和心理上的剧变，继而对手术效果产生负面的影响。现代研究表明，黄芪多糖(Astragalus polysaccharide，APS)可增进机体细胞免疫功能，改善肿瘤患者的生活质量[6]。因此，笔者对直肠癌术后患者应用黄芪多糖配合心理护理，探讨其对直肠癌患者细胞免疫和血清中炎性细胞因子的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 纳入标准 患者入选标准：①经病理学检查确诊为直肠癌；②患者具有手术适应证，选择手术的患者；③黄芪多糖皮试试验结果为阴性者；④无合并免疫系统疾病或血液系统疾病。

1.2 一般资料 本研究病例来源于我院2013年1月至2014年10月收治的直肠癌患者。符合纳入标准的患者共160例。根据患者入院时间结合随机数字表法，将以上患者随机分为常规护理组、心理护理组、黄芪多糖组和黄芪多糖配合心理护理(联合组)。常规护理组40例，男22例，女18例；平均年龄(66.8±10.2)岁；病理分型结果：低分化腺癌10例，中分化腺癌12例，高分化腺癌18例；临床分期Ⅰ期1例，Ⅱ期14例，Ⅲ期25例。心理护理组40例，男23例，女17例；平均年龄(64.8±12.5)岁；病理分型结果：低分化腺癌11例，中分化腺癌11例，高分化腺癌18例；临床分期Ⅰ期1例，Ⅱ期13例，Ⅲ期26例。黄芪多糖组40例，男22例，女18例；平均年龄(65.5±8.9)岁；病理分型结果：低分化腺癌9例，中分化腺癌13例，高分化腺癌18例；临床分期Ⅰ期1例，Ⅱ期14例，Ⅲ期25例。联合组40例，男15例，女15例；平均年龄(66.2±9.5)岁；病理分型结果：低分化腺癌13例，中分化腺癌12例，高分化腺癌15例；临床分期Ⅰ期1例，Ⅱ期14例，Ⅲ期25例。四组患者年龄、性别比、病理分型及临床分期等比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.3 治疗方法 四组患者均实施直肠癌根治术。常规护理组由责任护士进行常规健康教育，内容包括手术不良反应告知及手术后注意事项等。黄芪多糖组在上述常规护理的基础上给予患者黄芪多糖(注射用黄芪多糖，天津华隆医药保健品有限公司，规格：250 mg/支)。具体用法：取250 mg黄芪多糖加入生理盐水500 mL中静脉滴注，化疗第1日起，1次/d，7 d为1个疗程。心理组除常规健康教育外加心理护理干预，由受过系统心理护理培训的护师实施，从入院第1天开始，1次/d，20～30 min/次，疗程为8周。具体实施方法: ①答疑解惑，灌输知识，实现患者认知重建。②争取信任，关心爱护，打开患者交流之窗。③耐心倾听，情感支持，走进患者心理世界。④修身健体，松弛疗法(舒适体位、慢节律呼吸、闭目、渐进性心理和肌肉放松)，帮助患者树立乐观生活态度。⑤查缺补漏，个体答疑，全面阻断消极心理(如针对具体问题，包括害怕病情加重、不愿见熟人和朋友等进行讲解，纠正认知偏见，重建认知)。联合组在上述心理护理的基础上给予患者黄芪多糖。黄芪多糖具体用法同黄芪多糖组。

1.4 细胞免疫检测 术后第6天采集各组患者外周血5 mL用于检测T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)及NK(CD16+/CD56+)。采用美国BD公司生产的BD FACSVerseTM 流式细胞仪检测，分析>10 000个细胞获得测定值。以上操作均严格根据说明书进行并实施质量控制。

1.5 ELISA 法检测各组患者术后炎性细胞因子含量 应用ELISA 法检测各组患者术后第6天血清中TNF-α、白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-8和IL-12的蛋白含量，酶标仪测定吸光度值，根据标准品的不同稀释度的对数及其相应的吸光度值绘制标准曲线，得到回归公式Y=-0.966 71+0.919 102 lg X，r=0.995 6，再根据各孔光密度值计算各孔蛋白含量，操作方法参考试剂盒说明书。

1.6 实时定量PCR方法检测各组患者细胞因子mRNA表达水平 采用实时荧光定量法检测各组患者术后第6天血清中TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8和IL-12 mRNA 表达水平。具体方法参照说明书。

2 结果

2.1 各组患者手术后细胞免疫指标比较 与常规护理组相比，黄芪多糖组患者治疗后细胞免疫3项指标(CD4+、CD4+/CD8+及NK)升高(P<0.05)；心理护理组患者治疗后NK升高，差异有统计学意义；联合组患者治疗后细胞免疫4项指标(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK)升高，CD8+下降(P<0.05)。与黄芪多糖组比较，联合组患者治疗后细胞免疫2项指标(CD3+和NK)升高(P<0.05)。见表1。

表1 各组患者治疗后细胞免疫指标比较

注：与常规护理组比较，*P<0.05，**P<0.01;与黄芪多糖组比较，#P<0.05，##P<0.01

2.2 各组患者术后血清中TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8和IL-12蛋白含量比较 与常规护理组比较，黄芪多糖组患者术后血清中TNF-α的蛋白含量均明显下降(P<0.05)；心理护理组患者术后血清中TNF-α、IL-6 和IL-8的蛋白含量均明显下降(P<0.05)；联合组患者术后血清中TNF-α、IL-6、IL-8 和 IL-12的蛋白含量均明显下降(P<0.05)。与黄芪多糖组比较，心理护理组患者术后血清中TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8 和 IL-12的蛋白含量变化不明显；联合组患者术后血清中TNF-α和IL-12的蛋白含量明显降低(P<0.05)。见表2。

表2 各组患者血清中TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8和IL-12蛋白含量比较(pg/mL)

注：与常规护理组比较，*P<0.05，**P<0.01;与黄芪多糖组比较，#P<0.05，##P<0.01

2.3 各组患者术后血清中TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8和IL-12 mRNA表达水平 与常规护理组比较，黄芪多糖组患者术后血清中TNF-α的mRNA表达水平明显下降(P<0.05)；心理护理组患者术后血清中TNF-α、IL-2、IL-6 和IL-8的mRNA表达水平均明显下降(P<0.05)；联合组患者术后血清中TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8 和 IL-12的mRNA表达水平明显下降(P<0.05)。与黄芪多糖组比较，心理护理组患者术后血清中IL-2的mRNA表达水平明显下降(P<0.05)；联合组患者术后血清中TNF-α、IL-2、IL-8和IL-12的mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。见表3。

表3 各组患者血清中TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8和IL-12 mRNA表达水平

注：与常规护理组比较，*P<0.05，**P<0.01;与黄芪多糖组比较，#P<0.05，##P<0.01

3 讨论

黄芪多糖是中药黄芪中提取出的大分子多糖类化合物，进一步水解后得到多种糖类单体[7]。现代药理学研究表明，黄芪多糖具有增强细胞免疫的作用，其机制可能通过选择性抑制Th1型细胞因子及转录因子的表达，逆转Th1型反应，从而促进T淋巴细胞增殖及转化方向，表现为调节T淋巴细胞亚群比例的功效；动物实验证实，黄芪多糖可增强小鼠体内NK细胞的杀伤能力，从而增强对肿瘤细胞的杀伤作用[8-9]。

直肠癌患者一旦确诊，对患者来说是严重的应激事件，往往会出现情感上的剧变，产生精神抑郁甚至悲观绝望的情绪，继之对治疗的疗效产生焦虑和抑郁[10]。研究表明，造成患者抑郁情绪患病率差异与许多因素有关，包括患者的性别与年龄，住院情况，肿瘤的诊断、类型、分期，这些因素都对抑郁情绪的评估有影响，其他影响因素还包括抑郁情绪的评估体系和诊断方法[11]。一部分患者经医生开导解释后，在治疗后经短期逐步调理能正视现实，积极配合医生进行各种治疗；而另一部分患者则仍难以接受这一事实，对生命受到癌症的威胁而产生恐惧心理。护理人员在治疗的同时应给予解释，帮助患者树立起同疾病斗争的信心[12]。

本研究结果显示，与常规护理组相比，联合组患者治疗后细胞免疫4项指标(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK)明显升高，CD8+明显下降；与黄芪多糖组相比，联合组患者治疗后细胞免疫2项指标(CD3+和NK)明显升高。说明直肠癌患者使用黄芪多糖配合心理护理具有明显的促进细胞免疫功能恢复的效果。炎性因子中起主要作用的有TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8 和 IL-12等[13-15]。研究表明，TNF-α是炎症反应最重要的炎症介质，能激活中性粒细胞和淋巴细胞，增加血管内皮细胞通透性，促使其他细胞因子的合成和释放[16-18]。IL-2 能诱导产生细胞毒T淋巴细胞，刺激T细胞增殖分化，诱导干扰素等多种细胞因子的分泌，增强NK细胞活性，具有增强机体免疫功能等多方面作用。IL-6能诱导B细胞分化和产生抗体，并提高细胞毒T 细胞和NK细胞溶解细胞的能力、提高T 细胞活化信号[19]。IL-8 能诱发中性粒细胞、T 淋巴细胞和嗜酸性粒细胞的趋化，促进中性粒细胞脱颗粒，释放弹性蛋白酶，损伤内皮细胞，阻滞微循环血流，造成器官功能损伤。本研究结果显示，与常规护理组相比，联合组患者术后血清中TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8 和 IL-12的mRNA表达水平明显下降；与黄芪多糖组相比，联合组患者术后血清中TNF-α、IL-2、IL-8和IL-12的mRNA表达水平明显降低。结果提示，黄芪多糖配合心理护理能降低直肠癌患者术后血清中TNF-α、IL-2、IL-8和IL-12蛋白含量及mRNA表达水平，从而提高直肠癌患者术后免疫力，提高患者的生活质量，为黄芪多糖配合心理护理疗法在肿瘤方面的临床普及应用奠定实验基础。

综上所述，对于直肠癌手术患者，在其手术期间同步加用黄芪多糖配合心理护理，不仅能够调节细胞免疫功能，还能进一步降低患者血清中炎性因子的表达水平，从而增强直肠癌患者免疫力。

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Effect of astragalus polysaccharide combined with psychological nursing on cellular immunity and expression of proinflammatory cytokines in patients after rectal cancer operation

ZHANG Raoa，PAN Linb，ZHANG Lu-lua，ZHANG Xian-rua*

(a.Department of The Tenth General Surgery,b.Department of The Third Urology Surgery,Shengjing Hospital of China Medical University,Shenyang 110004，China)

Objective To investigate the effect of astragalus polysaccharide (APS) combined with psychological nursing on cellular immunity and expression of proinflammatory cytokines in patients after rectal cancer operation.Methods 160 rectal cancer patients were randomly divided into routine nursing (RN) group,APS group,psychological nursing (PN) group and combined group(APS combined with psychological nursing),40 patients in each group.The T cell subsets after operation of 160 patients were detected by flow cytometry.ELISA was used to detect the contents of serum proinflammatory cytokines protein;Real-time PCR was used to detect the expression levels of cytokines mRNA.Results Compared with RN group，the CD4+，CD4+/CD8+and NK indexes in APS group increased significantly，the contents and expression levels of TNF-α protein and mRNA in APS group decreased significantly(P<0.05)；the NK in PN group increased significantly(P<0.05)；the contents and expression levels of TNF-α，IL-6 and IL-8 proteins and mRNA in PN group decreased significantly(P<0.05)，the CD3+,CD4+，CD4+/CD8+and NK in combined group increased significantly，the CD8+indexes in combined group decreased significantly,the contents and expression levels of TNF-α，IL-6 and IL-8 proteins and mRNA in combined group decreased significantly,there were significant differences (P<0.05).Compared with APS group，the CD3+and NK in combined group increased significantly，the contents and expression levels of TNF-α and IL-12 proteins and mRNA in combined group decreased significantly.Conclusion APS combined with psychological nursing can not only regulate the immuniological function,but also reduce the expression levels of inflammatory cytokines in serum of rectal cancer patients，so as to improve the immunity of patients.

Astragalus polysaccharide；Psychological nursing；Rectal cancer;Cytokines

2014-10-12

中国医科大学附属盛京医院a.第十普通外科，b.第三泌尿外科，沈阳 110004

沈阳市科学技术项目计划(F13-318-1-69)

10.14053/j.cnki.ppcr.201504014

*通信作者