1 332株葡萄球菌的标本分布及耐药性分析

叶鸿雁，谢红意，葛婷婷，乐旭波，张丹丹，乐群燕

·药敏分析·

1 332株葡萄球菌的标本分布及耐药性分析

叶鸿雁*，谢红意，葛婷婷，乐旭波，张丹丹，乐群燕

目的 了解我院葡萄球菌的临床分布及对常用药物的耐药性，为临床控制感染及经验用药提供有力依据。方法 收集2011-2013年我院分离的葡萄球菌，采用西门子MicroScan WalkAway40SI全自动细菌鉴定药敏分析系统进行鉴定和药敏试验，结果按CLSI M100-S23进行判断，采用WHONET 5.6软件进行统计分析。结果 3年中共检出葡萄球菌1 332株，MRSA和MRCoNS的发生率分别为51.7% (372/720)和80.4% (492/612)，未发现对万古霉素、利奈唑胺和达托霉素耐药的葡萄球菌。结论 我院相关结果与全国耐药监测数据比较，有地区性差异，只有不断提高监测水平，合理选用抗菌药物，才能减少耐药菌的发生。

细菌耐药；抗菌药物；葡萄球菌

0 引言

近年来，随着临床介入性治疗操作的增多和抗菌药物的广泛使用，葡萄球菌感染呈增多趋势，目前，葡萄球菌感染在我院革兰阳性菌感染中占首位，特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistantStaphylococcusaureus，MRSA)，其高发病率和高死亡率备受关注[1]。笔者对我院2011-2013年葡萄球菌的耐药监测结果进行统计分析，为临床合理用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 我院临床2011-2013年分离的1 332株非重复葡萄球菌。

1.1.2 仪器与试剂 采用西门子MicroScan WalkAway40SI全自动细菌鉴定药敏分析系统进行鉴定与药敏试验，所用板条为POS Combo Type 33复合板。

1.2 方法 菌株配置成0.5麦氏浓度的菌液，吸取100 μL菌液加入到含有PLURONIC表面活性剂的接种液，用RENOK接种器对POS Combo Type 33复合板进行再水化，用MicroScan WalkAway40SI自动测试系统孵育和读取药敏。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC29213和粪肠球菌ATCC29212。

1.3 结果判断 根据美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)2013年版M100-S23进行判读[2]。

1.4 分析 采用WHONET 5.6软件进行统计分析。

2 结果

2.1 细菌分布

2.1.1 细菌种类及数量 1 332株葡萄球菌中，最多为金黄色葡萄球菌54.0% (720/1 332)，其次为表皮葡萄球菌20.0% (267/1 332)和人葡萄球菌11.5% (153/1 332)，见表1。

2.1.2 标本来源分布 金黄色葡萄球菌主要分离自呼吸道标本(占57.4%)，其次为伤口和脓液标本(占25.6%)；所有凝固酶阴性葡萄球菌(Coagulase-negativeStaphylococci，CONS)均来自住院和门急诊患者的无菌部位，以血液标本为主(占52.5%)，其次为伤口和脓液标本(占20.4%)。见表2。

表1 1 332株葡萄球菌种类及数量统计

表2 1 332株葡萄球菌标本来源分布

2.2 葡萄球菌属对抗菌药物的耐药性

2.2.1 金黄色葡萄球菌对抗菌药物的耐药性 720株金黄色葡萄球菌中，MRSA发生率为51.7% (372/720)，其中ICU患者的MRSA发生率为74.5% (114/153)，非ICU住院患者的MRSA发生率为47.8% (258/540)，见表3。

表3 MRSA科室和标本来源分布(株，%)

由表3可见，MRSA分布在多个病区，其中以ICU (占39.8%)和神经内科(占14.5%)居多；呼吸道标本所占比例最高，为81.2% (302/372)，其次为伤口和脓液标本，占12.9% (48/372)。

金黄色葡萄球菌对氯霉素的耐药率约为12%，对利福平、复方新诺明、奎奴普丁/达福普汀的耐药率均在10%以下。MRSA万古霉素MIC范围为0.25～2 mg/L，未发现万古霉素中介和耐药的金黄色葡萄球菌，未发现对利奈唑胺和达托霉素耐药的金黄色葡萄球菌。

2.2.2 凝固酶阴性葡萄球菌对抗菌药物的耐药性 CoNS中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(Methicillin-resistant coagulase-negativeStaphylococci，MRCoNS)的发生率为80.4% (492/612)，血液标本和非血液标本MRCoNS发生率分别为81.5% (318/390)和78.4% (174/222)。未发现对万古霉素、利奈唑胺、达托霉素、奎奴普丁/达福普汀耐药的CoNS，对所测药物的耐药率MRCoNS均高于甲氧西林敏感CONS，见表4。

表4 抗菌药物对葡萄球菌的体外抗菌活性

注：R.耐药，I.中介，S.敏感

3 讨论

目前，金黄色葡萄球菌引起的院内感染已成为患者发病和致死的主要原因[3-4]。从表2可见，我院的金黄色葡萄球菌主要来自呼吸道、伤口和脓，这与陈江华等[5]研究结果相似。马序竹等[6]通过细菌耐药监测，发现凝固酶阴性葡萄球菌为血标本来源最常见细菌，我院存在相同情况，近年来，由于留置血管内导管使用的增加，导管相关性感染呈上升趋势，凝固酶阴性葡萄球菌是重要病原菌，而血液标本来源的CoNS中，MRCoNS发生率高达81.5%。另外，取自内置静脉导管的血标本比静脉穿刺所获得的血培养物的污染率更高[7]。因此，采取有效措施减少导管相关感染的发生，加强血培养标本采集操作培训尤为重要。

我院MRSA和MRCoNS的发生率分别为51.7%和80.4%，高于郭宇等[8]报道的2012年全国监测数据(43.6%、75.7%)。我院ICU的MRSA发生率为74.5%，高于非ICU病房(47.8%)，表明ICU应加强感染控制干预措施。我院MRSA呼吸道标本占88.2%。上呼吸道病原体的定植是一个普遍规律，而鼻前庭是MRSA定植的常见部位[9]，陈健等[10]研究发现，细胞壁锚定蛋白SasX主要存在于医院环境内致病性的金黄色葡萄球菌中，是金黄色葡萄球菌在医院环境内持续感染毒力因子之一。因此，从感染控制的角度，定植也使金黄色葡萄球菌在医护人员与患者之间得以传播，应采取积极有效的措施加强管理。

万古霉素是临床治疗MRSA感染的首选药。郭宇等[8]在2012年全国10大城市16家教学医院的监测中，发现1株对万古霉素中介的金黄色葡萄球菌(VISA)，MIC值为3 μg/mL。我院金黄色葡萄球菌万古霉素MIC范围为0.25～2 mg/L，虽然未发现VISA，但有MIC为1～2 mg/L的菌株，其中可能存在异质性万古霉素中介的金黄色葡萄球菌(Heterogeneous vancomycin-intermediateStaphylococcusaureus，hVISA)。hVISA是指金黄色葡萄球菌的母代菌株对万古霉素敏感(MIC≤2 mg/L)，而子代却含有少量能够在万古霉素≥4 mg/L的培养基中生长的耐药亚群。有研究证明，hVISA是VISA的前体[11]，与万古霉素治疗失败相关[12]。因此，微生物实验室应加强对hVISA的监测，当糖肽类药物治疗无效时，可考虑使用利奈唑胺和达托霉素。

微生物实验室应对临床常见细菌进行长期动态的耐药监测，同时，临床一线加强预防感染和感染控制措施，职能部门提升合理用药管理水平，才能有效控制耐药菌的发生。

[1] Benfield T,Espersen F,Frimodt-Moller N,et a1.Increasing incidence but decreasing in-hospital mortality of adult Staphylococcus aureusbacteraemia between 1981 and 2000[J].Clin Microbiol Infect,2007,13(3):257-263.

[2] Clinical and Laboratory Standards Institute.M100-S23:Performance Standards for Antimicr-obial Susceptibility Testing;Twenty- third Informational Supplement.Wayne,PA:Clinical and Laboratory Standards Institute,2013.

[3] 徐建国.临床微生物学手册[M].第7版.北京:科学出版社,2005:363.

[4] 赵建平,周秀岚.脓液中金黄色葡萄球菌的耐药性监测[J]中国医药,2013,8(11):1641-1643.

[5] 陈江华,顾向明,邓冲,等.伤口与呼吸道医院感染金黄色葡萄球菌的耐药情况对比研究[J].中国抗生素杂志,2012,37(4):298-300.

[6] 马序竹,吕媛,郑波.卫生部全国细菌耐药监测网2011年血流感染细菌耐药监测[J].中国临床药理学杂志,2012,28(12):927-932.

[7] 曾蓉,王薇,王治国.常规血培养污染监测的质量保证措施[J].现代检验医学,2012,27(6)160-162.

[8] 郭宇,王辉,赵春江,等.2012年中国16家医院革兰阳性球菌耐药监测研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2013,33(6):401-409.

[9] 张静,瞿介明.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌呼吸道定植和感染的临床意义及其对策[J].上海医学,2013,36(1):6-8.

[10]陈健,杜昕,宋燕,等.新的细胞壁锚定蛋白SasX促进金黄色葡萄球菌黏附聚集和定植能力[J].中华微生物学与免疫学杂志,2012,32(6):519-524.

[11]Ariza J,Pujol M,Cabo J,et a1.Vancomycin in surgical infections due to methicillin-resistant Staphylococcus aurous with heterogeneous resistance to vancomycin[J].Lancet,1999,353:1587-1588.

[12]Moore MR,Perdreau-Remington F,Chambers HF.Vancomycin treatment failure associated with heterogeneous vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus in a patient with endocarditis and in the rabbit model of endocarditis[J].Antimierob Agents Chemother,2003,47:1262-1266.

Distribution and drug resistance of 1 332 strains ofStaphylococci

YE Hong-yan*,XIE Hong-yi,GE Ting-ting,LE Xu-bo,ZHANG Dan-dan,LE Qun-yan

(The People’s Hospital of Beilun District,Ningbo 315800,China)

Objective To investigate the distribution and the common drug-resistance inStaphylococcispecies and provide scientific evidences for controlling and treating in clinic.Methods TheStaphylococcispecies were collected from clinical samples in our hospital from 2011 to 2013.The identification and antibiotic testing were carried out using MicroScan WalkAway 40 system,and Clinical and Laboratory Standards Institute M100-S23 as assessment criteria.Date was analyzed using WHONET 5.6 software.Results 1 332 strains ofStaphylococcispecies were detected.The prevalence of methicillin-resistantStaphylococcusaureus(MRSA) and methicillin-resistant coagulase-negativeStaphylococci(MRCoNS) were 51.7% (372/720),80.4% (492/612) respectively.AllStaphylococciisolates were susceptible to vancomycin,linezolid and daptomycin.Conclusion The rates of antimicrobial resistance ofStaphylococcispecies in our hospital are different from national data.To improve the level of bacterial monitoring,using antimicrobial drugs rationally and control nosocomial infections strictly,is important to reduce the incidence of drug resistance.

Antimicrobial resistance;Antimicrobial drugs;Staphylococci

2014-06-04

宁波市北仑区人民医院，浙江 宁波 315800

*通信作者

10.14053/j.cnki.ppcr.201502026