探析不同炮制方法对麻黄主要功效影响的机理

廖 芳，张 丹，兰明辉，李春林

1成都市新都区中医医院，四川 成都 610500；2泸州医学院药学院

探析不同炮制方法对麻黄主要功效影响的机理

廖 芳1，张 丹2△，兰明辉1，李春林1

1成都市新都区中医医院，四川 成都 610500；2泸州医学院药学院

目的：探索不同炮制方法对麻黄发汗与平喘药效的影响。方法：制备生麻黄、清炒麻黄及蜜炙麻黄供试液，并制备生物碱、挥发油、醇溶性及水溶性部位。以大鼠为研究对象进行足跖汗液分泌着色实验，比较炮制对麻黄发汗作用的影响，以豚鼠为研究对象进行喷雾致喘实验，比较炮制对麻黄平喘作用的影响。结果：生麻黄、清炒麻黄、蜜炙麻黄的发汗作用由强至弱；挥发油部位、醇提部位、水提部位、生物碱部位的发汗作用由强至弱；生麻黄的挥发油部位的发汗作用最强。蜜炙麻黄、生麻黄和清炒麻黄的平喘作用由强至弱；生物碱部位、挥发油部位、醇提部位、水提部位的平喘作用由强至弱，蜜炙麻黄的生物碱部位的平喘作用最强。结论：炮制降低了麻黄的发汗作用，增强了平喘的效果，还应深入探讨麻黄发汗及平喘的量效关系及作用机制。

炮制方法；麻黄；发汗；平喘；药效研究

麻黄是一味常用中草药，多分布于亚、美、北非、东南欧洲等地处干旱和荒漠区域[1-2]，为草麻黄(Ephedra sinica Stapf)、中麻黄(Ephedra intermedia Schrenk et C.A.Mey.)或木贼麻黄(Ephedra equisetina Bge.)的干燥草质茎，辛、微苦，温。具有发汗散寒，宣肺平喘，利水消肿的功效[3]。在我国，麻黄主要分布于内蒙古、吉林、辽宁等地，其成分丰富，包括鞣质、黄烷、黄酮、多糖、生物碱、有机酸、挥发油等，药理作用也比较广泛，临床对其用药的研究较多。现代应用的麻黄炮制品有生麻黄、蜜麻黄、炒麻黄等，已有报道证实麻黄蜜炙后可促进平喘效果和缓和发汗作用[2-4]，但对其作用机制目的研究较少。现拟通过动物实验探索麻黄发汗与平喘药效经清炒、蜜炙后变化的影响机理。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 药材 麻黄（购于四川新荷花中药饮片有限公司）；生麻黄、清炒麻黄、蜜炙麻黄(实验室自制。生麻黄、清炒麻黄、蜜炙麻黄均分别配制用于发汗试验的含生物药0.4 g/mL的溶液及用于平喘试验的含生物药0.3 g/mL的溶液；取其提取部位分别配制用于发汗试验的含生物药0.7 g/mL的溶液及用于平喘试验的含生物药0.6 g/mL的溶液，如遇不溶于水的提取部位，则以吐温80助溶[5]。

1.1.2 动物 S D大鼠(体质量180～200 g，清洁级，雌雄各半)；豚鼠(体质量180～200 g，雌雄各半)，以上动物均由泸州医学院动物科提供，许可证号：川实动管质第17号。

1.1.3 仪器 旋转蒸发仪(R205B，上海豫康)；超声雾化器(型号C Z1YY A，珠海市南粤佳华公司提供)；循环水式真空泵(SH B-III，上海豫康)；红外测温仪(型号I M P AC IGA 740，德国)。

1.1.4 试剂 吐温80；氢氧化钠、氯仿、无水乙醇、95%乙醇、盐酸(分析纯)；氯化乙酰胆碱(赛默默飞世尔科技（中国）有限公司)；磷酸组织胺(上海金穗生物科技有限公司)；和田-高垣氏试剂A、B液。

1.2 方法

1.2.1 制备炮制品 1）生麻黄：麻黄原材料除去杂质，切段备用。2）清炒麻黄：生麻黄段置锅内文火炒制10分钟，直至色泽加深可闻及香气飘出后，取出晾凉备用。3）蜜炙麻黄：炼蜜与开水混合均匀，再加入生麻黄搅拌均匀，闷润，置锅内文火炒制10分钟，至颜色加深、触摸不粘手后，取出，晾凉备用。

1.2.2 制备供试液 生麻黄、清炒麻黄、蜜炙麻黄分别加入10倍的水量浸泡半小时，回流提取，30分钟后进行过滤，滤渣再次加入8倍的水量，回流提取，约20分钟左右过滤。将2次滤液混合均匀并进行浓缩处理，形成含生药1g/mL的溶液，再以生理盐水配置成待测试剂。

1.2.3 制备提取部位样品 生麻黄、清炒麻黄、蜜炙麻黄共制备四类提取部位样品，分别为生物碱、挥发油、醇溶性及水溶性部位。

1.2.3.1 生物碱部位制备[6-7]生麻黄、清炒麻黄、蜜炙麻黄炮制品加入p H值为1~2的酸性水溶液（取1mo l/L H CL溶液加水配制）8倍量浸泡30分钟后回流提取2小时，然后再进行超声提取1小时，过滤，滤渣再加入6倍量的酸性水溶液，超声提取1小时，过滤；合并滤液，加入浓度5%的N aO H溶液，调滤液p H值至12~13。取2倍体积的三氯甲烷先后行3次萃取处理后，混合萃取液，回收三氯甲烷，残渣为生物碱部位供试品。

1.2.3.2 挥发油部位制备生麻黄、清炒麻黄、蜜炙麻黄炮制品，粉碎，置于挥发油提取器中，加水适量，浸泡1小时，置电子调温电炉上缓缓加热至沸，提取24小时，放置至凉，加入适量乙醚萃取挥发油，待水与乙醚均匀分层后，取出乙醚层，无水硫酸钠干燥，自然挥干乙醚，得具有特殊浓烈香味的深黄色油状物，得麻黄挥发油供试品。

1.2.3.3 醇溶性部位制备经蒸馏法提取后的药渣加入乙醇8倍量，置于80℃水浴回流提取2小时后过滤，药渣再加入乙醇6倍量，回流提取1小时后过滤，合并2次的提出液，得醇溶性部位供试品。

1.2.3.4 水溶性部位制备：经三氯甲烷萃取处理的水层液体和酸水提取液经减压浓缩回收的水合并，p H值调节为中性，倒入药渣内，蒸馏法进行提取24小时后过滤回收，回收的溶液即为水提部位供试品。

1.2.4 大鼠足跖汗液分泌着色实验（生品及炮制品） 取实验S D大鼠16只，雌雄各半，随机分为4组编码，每组4只大鼠。取棉签蘸无水乙醇对实验大鼠足跖部进行清洁去污，I组为空白对照组，给予生理盐水灌胃，Ⅱ组给予生麻黄供试液灌胃，Ⅲ组给予清炒麻黄供试液灌胃，IV组给予蜜炙麻黄供试液灌胃，4组所用试液体积相同。受试大鼠均仰位固定于固定器内，使双后肢充分暴露。待30分钟后，将各受试大鼠足跖部位擦拭干净，取和田-高垣氏试剂A液涂于足跖部皮肤上，干燥，涂和田-高垣氏试剂B液。取放大镜观察大鼠足跖皮肤的着色点颜色变化并计算着色点数量，每间隔10分钟观察并记录1次，连续观察3次。

1.2.5 大鼠足跖汗液分泌着色实验（不同提取部位） 大鼠足跖汗液分泌着色实验与“1.2.4”相同。选取20只S D大鼠，雌雄各半，进行实验，随机分为5组，每组各4只受试大鼠，分别给予不同提取部位药液及生理盐水灌胃，包括Ⅰ组对照组（生理盐水），Ⅱ组（生物碱部位），Ⅲ组（水提部位），Ⅳ组（醇提部位），Ⅴ组（挥发油部位）。观察和记录各组汗点数量。

1.2.6 豚鼠喷雾致喘实验（生品及炮制品） 取16只受试豚鼠随机分为4组，每组4只，分别灌胃给予同等体积的生理盐水、生麻黄供试液、清炒麻黄供试液和蜜炙麻黄供试液。给药后30分钟将豚鼠置于透明玻璃窗口内喷入混合液（浓度0.1%的磷酸组织胺与2%的氯化乙酰胆碱以1∶1比例混合），观察和记录平喘潜伏期。

1.2.7 豚鼠喷雾致喘实验（不同提取部位） 取20只受试豚鼠随机分为5组，每组4只，分别灌胃给予挥发油部位、醇提部位、水提部位及生物碱部位，实验方法和平喘效果检验方法参照“1.2.6”。

2 结果

2.1 生麻黄及炮制品大鼠足跖汗液分泌着色实验结果 生麻黄、清炒麻黄、蜜炙麻黄的发汗作用由强至弱，麻黄及炮制品的发汗点数量与空白对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 生麻黄、清炒麻黄、蜜炙麻黄对大鼠足跖发汗的影响作用比较

2.2 生麻黄不同提取部位大鼠足跖汗液分泌着色实验结果 挥发油部位、醇提部位、水提部位、生物碱部位的发汗作用由强至弱，挥发油部位和醇提部位的发汗点数量与空白对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 生物碱、水提、醇提、挥发油提取部位对大鼠足跖发汗的影响作用比较

2.3 生麻黄及炮制品与不同提取部位的发汗作用交叉比较 生麻黄的挥发油部位的发汗作用最强，发汗点数量较生麻黄的醇提部位、清炒麻黄和蜜炙麻黄的挥发油部位高（P＜0.05）。见表3。

表3 生麻黄及炮制品与不同提取部位的大鼠足跖发汗作用交叉比较

2.4 生麻黄及炮制品豚鼠喷雾致喘实验结果 蜜炙麻黄、生麻黄和清炒麻黄的平喘作用由强至弱，与空白对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

2.5 蜜炙麻黄不同提取部位豚鼠喷雾致喘实验结果 生物碱部位、挥发油部位、醇提部位、水提部位的平喘作用由强至弱，挥发油部位和生物碱部位的平喘作用与空白对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表5。

表4 生麻黄、清炒麻黄、蜜炙麻黄平喘作用比较

表5 生物碱、水提、醇提、挥发油提取部位平喘作用比较

2.6 生麻黄及炮制品与不同提取部位平喘作用交叉比较 蜜炙麻黄的生物碱部位的平喘作用最强，平喘作用较蜜炙麻黄的挥发油部位、麻黄生品和清炒麻黄的生物碱部位高（P＜0.05）。见表6。

表6 生麻黄及炮制品与不同提取部位的平喘作用交叉比较

3 讨论

麻黄在临床应用广泛，近些年来其发汗和平喘功能受到关注。本实验以S D大鼠及豚鼠作为研究对象，分别制备麻黄生品、麻黄炮制品、清炒麻黄及蜜炙麻黄，并利用各原材料提取生物碱、水提、醇提及挥发油部位进行动物实验，对麻黄的发汗及平喘药效进行比较，希望为临床用药提供更好的炮制和提取方案。

大鼠足跖汗液分泌着色实验研究结果表明，麻黄生品及炮制品对大鼠均有明显的发汗作用，三者中以麻黄生品的发汗作用最强，在对不同提取部位的试品研究中显示，挥发油部位对发汗的影响作用最大，其次是醇提部位，交叉研究结果显示麻黄生品的挥发油部位具有最强的发汗作用。豚鼠喷雾致喘实验研究结果表明，麻黄生品及炮制品对豚鼠均有明显的平喘作用，三者中蜜炙麻黄对豚鼠的平喘作用最强，在对不同提取部位的试品研究中显示，生物碱部位对平喘的影响作用最大，其次是挥发油部位，交叉研究结果显示蜜炙麻黄生物碱部位具有最强的平喘作用。

由此可见，对麻黄及炮制品的研究未来应重视麻黄生品挥发油部位的发汗药效及蜜炙麻黄生物碱部位的平喘药效方面，并深入探讨其发汗及平喘的量效关系及细胞学、分子学层次的作用机制。

[1] 甘国珺，安珍，王天河.河西地区常见麻黄种类简介[J].甘肃农业科技，2009（1）：44-45.

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[4] 颜正华.中药学[M].2版.北京：人民卫生出版社，2006：80-83.

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Exploration on Influencing M echanism ofD ifferentProcessing Methods on Main Functionsof MaHuang

LIAO Fang1,ZHANG Dan2△,LAN Minghui1,LIChunlin
1 Xindu District TCM Hospital of Chengdu City,Chengdu 610500,China; 2 Clinical Pharmacy School of Luzhou Medical College

Objective:To survey the influence of different processingmethods on perspiration and relieving asthma of MaHuang(Ephedra sinica Stapf).Methods:Probational liquids of raw MaHuang,fried MaHuang and fried MaHuang w ith honey were prepared,alkaloid,volatile oil,alcohol soluble and water soluble reigonswere established. Ratwas performed w ith plantar sweating secretion tinting experiments to compare the effects of the processingmethodson perspiration ofMaHuang,guinea pigswere studied in spray inducing asthma experiment to compare the effects of processing on relieving asthma of MaHuang.Results:The order of the perspiration was raw MaHuan g＞fried MaHuang＞fried MaHuang w ith honey;the perspiration in the order was volatile oil region＞alcohol extraction region＞water extraction region＞alkaloid region;the perspiration of raw MaHuang volatile oil region showed the strongest.The function of relieving asthma was in the order:fried MaHuang w ith honey＞raw MaHuang＞fried MaHuang;the function of relieving asthmawas in the order:alkaloid region＞volatile oil region＞alcoholextraction region＞waterextraction region,alkaloid region of fried MaHuang w ith honey showed the strongest function of relieving asthma.Conclusion:Processing could decrease the perspiration of MaHuang,increase the effects of relieving asthma, dose-effects relationship of perspiration and relieving asthma of MaHuang and itsmechanism should be further explored.

processingmethods;MaHuang;perspiration;relieving asthma;pharmacodynm ic study

R285.1

A

1004-6852(2015)08-0012-04

2014-10-25

廖芳（1975—）女，硕士学位，副主任中药师。研究方向：中药制剂及工艺、中药制剂质量控制。

△通迅作者：张丹（1975—），女，博士学位，副教授。研究方向：中药新剂型、新工艺。