99mTc-DTPA-DG显像对非小细胞肺癌化疗疗效的评价*

张春银，陈跃，黄占文，何凌

·核医学专栏·

99mTc-DTPA-DG显像对非小细胞肺癌化疗疗效的评价*

张春银，陈跃，黄占文，1何凌

（四川医科大学附属第一医院核医学科，四川泸州646000；1四川大学华西药学院）

目的：探讨99mTc-DTPA-脱氧葡萄糖（DG）对非小细胞肺癌荷瘤裸鼠化疗疗效的评价。方法：建模成功后的A549肺癌裸鼠分为2组：A组为对照组（NS）；B组为顺铂组（DDP）。裸鼠化疗疗程完成后分别于次日和第7、14、21、28 d注射99mTc-DTPA-DG 3.7 MBq/只，0.5 h后显像，勾画感兴趣区（ROI），计算肿瘤/健侧对应部位放射性（T/TN）比值，并测量肿瘤体积。第28 d完成显像后处死裸鼠，测量肿瘤/血液及肿瘤/肌肉放射性比值，计算抑瘤率，并剥离瘤组织，测量质量。结果：肿瘤组织吸收99mTc-DTPA-DG较多，肿瘤/血液放射性比值对照组为3.95，高于顺铂组（0.89，t=3.282，P＜0.05）。肿瘤/肌肉放射性比值对照组为6.73，高于顺铂组（0.81，t=4.096，P＜0.05）。99mTc-DTPA-DG可使肿瘤组织清晰显像，第28 d顺铂组与对照组肿瘤体积分别为388.64mm3、1052.41mm3，差异有统计学意义（t=4.053，P＜0.05）。结论：顺铂对非小细胞肺癌化疗后，99mTc-DTPADG显像示肿瘤体积缩小，瘤体内放射性分布降低，99mTc-DTPA-DG显像可用于非小细胞肺癌化疗疗效的评估。

99mTc-DTPA-脱氧葡萄糖；非小细胞肺癌；裸鼠；化疗；放射性核素显像

肺癌是致死率极高的恶性肿瘤，非小细胞肺癌约占全部肺癌的80%，且就诊时多数患者已近晚期，治疗上不得不采用化疗手段，而化疗后的疗效评价在整个诊疗过程中至关重要[1]。目前临床上可用CT、PET/CT扫描进行化疗后评价，但是前者是解剖形态显像，不能早期预测，而后者主要应用的显像剂为18F-脱氧葡萄糖（FDG），特异性不高，且价格又显昂贵。有研究[2]报道，99mTc-DTPA-DG显像可以用于乳腺癌化疗疗效的指导。本研究旨在团队前期的工作基础上进一步探讨99mTc-DTPA-DG对非小细胞肺癌荷瘤裸鼠显像的可行性及对化疗疗效的评价。

1 材料与方法

1.1 主要仪器和试剂

99Mo-99mTc发生器（中国原子能科学研究所和中国核动力研究院）；美国Siemens SPECT/CT仪，Symbia T16；SN-695B型智能放射免疫γ测量仪（中国科学院上海应用物理研究所日环光电仪器有限公司）；BALB/c裸鼠20只（18～24 g，雄性，四川大学华西医院实验室提供）；细胞血管内皮生长因子高表达非小细胞肺癌细胞系A549购于麦莎生物科技有限公司；DTPA-DG由四川大学华西药学院提供；顺铂购于山东齐鲁制药有限公司；MTT美国sigma公司产品；二甲基亚砜（DMSO），购于成都格雷西亚化学技术有限公司，分析纯；RPMI1640培养液和胎牛血清美国GIBCO公司产品；99mTc-DTPA-DG本实验合成。

1.2 方法

1.2.1 建模分组

①99mTc-DTPA-DG合成[3]，放化纯＞97%。②A549细胞RPMI1640培养液培养，调整细胞数至107/mL，0.2 mL/只右腋部皮下接种。待肿瘤长至直径约5 mm后将小鼠随机分为2组，每组10只，共20只。A组：对照组（生理盐水NS,1 mg/kg）、B组：顺铂组（顺铂DDP，2 mg/kg）。各组每日腹腔注射给药1次，连续给药10 d。

1.2.2 肿瘤的生长情况

裸鼠化疗疗程完成后分别于次日和第7、14、21、28 d测量肿瘤大小（裸鼠全身显像前），按公式计算肿瘤体积[4]：体积（mm3）=0.5×长(mm)×[宽(mm)]2。第28 d完成显像后处死裸鼠，测量肿瘤/血液及肿瘤/肌肉放射性比值，计算抑瘤率，并剥离瘤组织，测量质量。抑瘤率=(1-治疗组肿瘤体积/对照组肿瘤体积)×100%[5]。

1.2.3 荷瘤裸鼠全身显像

裸鼠化疗疗程完成后分别于次日和第7、14、21、28 d进行显像。显像前小鼠均禁食12 h，尾静脉注射99mTc-DTPA-DG 3.7 MBq/只，0.5 h后显像。采用美国Siemens Symbia T16 SPECT/CT仪。在肿瘤（T）/健侧对应部位（NT）勾画3像素×3像素的感兴趣区（ROI），计算T/TN比值，并比较两组间T/TN的比值。

1.3 统计学处理

采用SPSS17.0统计软件进行分析，计量资料采用x±s表示。数据在确认符合正态分布后，分组数据比较采用配对t检验，各时间点的数据比较采用独立样本t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 荷瘤裸鼠肿瘤生长变化

化疗完成后随着时间的推移，对照组肿瘤体积逐渐增大；顺铂组肿瘤体积变化缓慢，明显小于同时期对照组肿瘤体积，各时间点分组数据配对t检验可知差异有统计学意义（P＜0.05）。第28 d：对照组肿瘤体积最大（1052.41 mm3），质量为0.82 g；顺铂组肿瘤体积为388.64 mm3，质量为0.37 g，抑瘤率为63.07%，二者差异有统计学意义（P＜0.05，表1、图1）。

图1 荷瘤裸鼠肿瘤生长变化曲线

表1 化疗后各时间点荷瘤裸鼠肿瘤体积（x±s）（V/mm3）

2.2 荷瘤裸鼠肿瘤/血液、肿瘤/肌肉放射性比值的比较

①肿瘤/血液放射性比值对照组为3.95，高于顺铂组0.89，二者差异有统计学意义（t=3.282，P＜ 0.05）。②肿瘤/肌肉放射性比值对照组为6.73，高于顺铂组0.81，二者差异有统计学意义（t=4.096，P＜0.05，表2）。

表2 第28 d肿瘤体积、肿瘤质量、抑瘤率、肿瘤/血液、肿瘤/肌肉放射性比值

2.399mTc-DTPA-DG显像结果

禁食12 h的小鼠尾静脉注射99mTc-DTPA-DG 3.7 MBq/只，0.5 h后显像所得图像质量良好。肿瘤组织影清晰可见，肾脏影可见，膀胱显像剂逐渐增浓，其它部位未见显像剂明显分布。随着化疗时间的增加，对照组T/TN值逐渐增大，顺铂组T/TN值逐渐降低，各时间点分组数据配对t检验可知差异有统计学意义（P＜0.05，表3、图2、图3）。

图2 化疗后各时间点荷瘤裸鼠T/TN值柱状图

3 讨论

近年来，非小细胞肺癌的发病率逐年增高，手术切除原发灶是首选，而相当大一部分患者还必须接受化疗，如手术后的化疗或者疾病晚期患者直接化疗[6]。随着分子生物学的迅速发展，从分子水平上对肿瘤化疗疗效进行评估已成为可能[7]。笔者利用99mTc-DTPA-DG对非小细胞肺癌荷瘤裸鼠化疗后显像，探讨了该显像在肿瘤化疗上的疗效评价，为99mTc-DTPA-DG显像用于临床肿瘤化疗疗效评估提供实验依据。

本研究结果显示，荷瘤裸鼠尾静脉注射99Tcm-DTPA-DG显像剂，0.5 h后显像，裸鼠全身图像清晰，局部肿瘤显示良好。非小细胞肺癌荷瘤裸鼠化疗后，随着时间的增加，顺铂组T/TN值逐渐降低，对照组T/TN值逐渐增大，说明顺铂抑制了肿瘤的倍增。顺铂组中肿瘤/血液放射性比值、肿瘤/肌肉放射性比值均比对照组肿瘤/血液放射性比值、肿瘤/肌肉放射性比值低，说明了肿瘤化疗有效。顺铂组肿瘤显像体积较对照组肿瘤体积缩小，说明化疗有效的肿瘤对99mTc-DTPA-DG显像剂浓聚程度低，未化疗的肿瘤对99mTc-DTPA-DG显像剂浓聚程度高。本团队前期研究[8]表明，99mTc-DTPA-DG可能与18F-FDG结构类似，肿瘤越活跃，增值越快，所需葡萄糖越多，故摄取99mTc-DTPA-DG也越多；反之，肿瘤接受化疗抑制后，增值被抑制，所需葡萄糖降低，故摄取99mTc-DTPA-DG也减少，这也与本研究结果相吻合，所以应用99mTc-DTPA-DG作为显像剂对肿瘤进行显像，并对化疗的疗效做评价是可行、可靠的。99mTc-DTPADG是一种有潜力的分子代谢显像剂，可逐步向临床转化。

表3 化疗后各时间点荷瘤裸鼠T/TN值（x±s）显像剂：99mTc-DTPA-DG

图3 荷瘤裸鼠化疗后第28d99mTc-DTPA-DG显像图

1.Erridge SC,Moller H,Price A,et al.International comparisons of survival from lung cancer:pitfalls and warnings[J].Nature clinical practice Oncology,2007,4 (10):570-577.

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3.陈跃,黄占文,何菱,等.99mTc-DTPA-DG的制备及其荷瘤裸鼠实验研究[J].中华核医学杂志,2005,25(3): 176-178.

4.符慧群,曹培国,罗红,等.白藜芦醇对小鼠Lewis肺癌生长的影响及机制研究[J].肿瘤,2007,27(7):531-534.

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（2015-03-31收稿）

英国牛津大学雷鸣研究员受聘为我校兼职教授

近日，英国牛津大学研究员雷鸣博士被聘为我校兼职教授。

雷鸣研究员现为牛津大学药理系及心血管研究卓越中心高级研究员（永久职位），首席科学家。雷鸣研究员受聘为我校兼职教授后，将主要针对医学电生理学教育部重点实验室的建设和发展，人才培养及高水平论文发表等方面进行技术指导。

据了解，雷鸣研究小组旨在阐明有关离子通道和信号系统的在心脏的功能及和疾病的关系，并在此基础上探索心脏疾病的新的治疗途径。近年他的研究小组建立了完整的光遗传学技术平台，开展心脏细胞特异性光遗传学模型的研究，发表SCI论文80余篇，平均影响因子5.0，总被引用次数1562，H因子20。雷鸣研究员现担任《Prog Biophys Mol Biol》和《Frontier in Physiology》编委、专辑特邀主编，先后获得英国医学研究委员会（Medical Research Council)、英国心脏基金会（British Heart Foundation）、威康信托基金会（Wellcome Trust）英国皇家学会、中国国家自然科学基金等资助项目17项，累计科研经费400万英镑。

Assessment of chemotherapeutic efficacy on non-small cell lung cancer by99mTc-DTPA-DG imaging

Zhang Chunyin，Chen Yue，Huang Zhanwen，1He Lin
Department of nuclear medicine,the first Affiliated Hospital of Sichuan Medical University,1College of Pharniacy of West China,Sichuan University

Objective：To investigate the feasibility of using99mTc-DTPA-DG imaging to assess chemotherapeutic efficacy on non-smallcell lung cancer(NSLC).Methods:Twenty male nude rats inoculated with A549 cell were randomly divided into two groups.The controlgroup was treated with 2 mL/kg ofsaline.The DDP group was treated with 2 mL/kg of Cisplatin.Scintigraphic studies were conducted 1,7,14,21 and 28 d after the treatment.The radioactivity ratios of tumor to non-tumor(T/NT)was calculated with the region of interest(ROI) technique.After the last imaging the rats were sacrificed.The radioactivity ratios of tumor/blood and tumor/ muscle were measured.Tumor volume and thereby the inhibition rate in both groups were calculated.Results：The tumor cells took more99mTc-DTPA-DG than normal tissues.The control group had higher tumor/blood ratio (3.95)and tumor/muscle ratio(6.73)than DDP group(0.89,0.81,t=3.282,t=4.096，P＜0.05).Tumors were clearly visualized on the99mTc-DTPA-DG images.The tumor volume of DDP group and contyol group at the 28th day was 388.64 mm3and,1052.41 mm3respectively,which is statistical significant(t=4.717,P＜0.05). Conclusion：The decrease of tumor volume and radioactivity ratio after the chemotherapy of DDP can be distinctively demonstrated which prores that the99mTc-DTPA-DG images could be used to evaluate the chemotherapeutic efficacy on non-small cell lung cancer.

99mTc-DTPA-deoxyglucose;Non-small cell lung cancer;Nude rat;Chemo therapy;Radionuclide imaging

R817、R734

A

10.3969/j.issn.1000-2669.2015.04.003

*四川省教育厅(09109)，四川省卫生厅(07013)，四川省“甲级医学重点实验室-功能分子影像”资助项目（川卫办发·2013.5.12号文件）

张春银（1970-），男，教授，硕士，E-mail:zhangchunyin345@sina.com