Ezrin和E－cadherin在宫颈癌中的表达及其相关性探讨

吕红梅，魏双梅

（1.黑龙江中医药大学佳木斯学院，黑龙江佳木斯154002；2.佳木斯市妇幼保健院）

Ezrin和E－cadherin在宫颈癌中的表达及其相关性探讨

吕红梅1，魏双梅2

（1.黑龙江中医药大学佳木斯学院，黑龙江佳木斯154002；2.佳木斯市妇幼保健院）

目的 探讨Ezrin和E－cadherin在宫颈癌中的表达情况及其相关性。方法 随机选择的50例宫颈癌组织作为宫颈癌组（A组）、50例宫颈上皮内瘤变（CIN）组织作为CIN组（B组）以及50例正常宫颈组织作为对照组（C组），用免疫组织化学法（S－P法）进行Ezrin和E－cadherin的表达情况检测。并将表达情况与临床资料进行统计分析。结果 Ezrin和E－cadherin在A、B、C三组中的阳性表达率分别为74.0%、36.0%、18.0%和32.0%、64.0%、90.0%，组间比较具有统计学差异（P＜0.05）；Erzin和E－cadherin在宫颈癌组织中的阳性表达与组织分化程度和淋巴结转移具有显著相关性（P＜0.05）；Erzin和E－cadherin在宫颈癌中的表达呈负相关（r＝－0.393，P＜0.05）。结论 Ezrin及E－cadherin的异常表达共同促进了肿瘤细胞的浸润及转移，可以作为初步预测宫颈癌预后的指标。

宫颈癌；Ezrin；E－cadherin；免疫组织化学法

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0937）

肿瘤的发生、发展是一个错综复杂的过程，其中肿瘤细胞对人体的侵袭及转移则是导致病情恶化的主要原因［1］。埃兹蛋白（Ezrin）作为一种膜－细胞骨架连接蛋白，可以同上皮钙粘蛋白（E－cadherin）相互作用，参与肿瘤的侵袭及转移［2］。本次研究探讨Ezrin和E－cadherin在宫颈癌中的表达情况，以及二者与临床病理各参数之间的规律。现将研究结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料 随机选取2013年1月至12月，佳木斯妇幼保健院收治的，经病理检查确诊为宫颈癌的患者50例作为A组，年龄范围26－62岁，平均年龄（52.3±5.7）岁，其中≥45岁者34例，＜45岁者16例，鳞状细胞癌40例，腺癌10例；高、中分化者31例，低分化者19例；伴有淋巴结转移者24例，无淋巴结转移者26例；Ⅰ－Ⅱa期22例，Ⅱb－Ⅳ期28例，分期标准采用2009年国际妇产科联盟（FIGO）制定的宫颈癌临床分期标准。另选同时段宫颈上皮内瘤变（CIN）患者50例作为B组，年龄范围24－60岁，平均年龄（54.1±4.4）岁，因非肿瘤原因行子宫切除术的患者50例作为C组，年龄范围25－64岁，平均年龄（53.8±5.2）岁。三组患者在一般临床资料上不存在显著差异（P＞0.05）。A组患者均为首次诊断有且只有宫颈癌，之前未接受过其它任何方式的治疗。

1.2 研究方法 将采集到的标本切成厚3μm的切片，每例标本3张。采用免疫组织化学法（S－P法）对宫颈癌组织、CIN组织和正常宫颈组织中Ezrin和E－cadherin的表达情况进行检测。一抗采用兔抗人的Ezrin单克隆抗体和鼠抗人的E－cadherin单克隆抗体，C组切片采用磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗。SP试剂盒和DAB显色液均购自江苏安惠生物科技有限公司。所有操作均严格按照说明书上进行。

1.3 染色结果判定 Ezrin和E－cadherin蛋白主要在细胞质内表达，少数在细胞膜上表达，以细胞质或细胞膜上出现棕黄色颗粒为阳性表达。判断标准为：每张切片随机选择4个互不重叠的400倍视野，每个视野计数100个细胞中染色细胞数目，每例标本计算3张切片共12个视野的平均染色细胞数：按染色细胞百分率分：阳性细胞数≤10%为0分；10%－25%为1分；25%－50%为2分；＞50%为3分。再按照阳性细胞染色强度，0分：为染色；1分：淡黄色；2分：棕黄色或黄褐色。将每个标本的切片上述两项评分相乘，结果分为4个等级［3］：阴性（－）：0分；弱阳性（＋）：1－2分；中等阳性（＋＋）：3－4分；强阳性（＋＋＋）：5－6分。阳性率＝阳性标本数／该组标本总数×100%。

1.4 统计学方法 采用SPSS 21.0软件对所有实验所得数据进行处理，对计数资料用χ2检验，对计量资料用t检验，组间比较采用F检验，相关性分析采用Spearman相关性检验，P＜0.05有显著差异。

2 结果

2.1 Ezrin和E－cadherin在各组中的表达情况Ezrin在A、B、C三组中的阳性表达率分别为74.0%（37／50）、36.0%（18／50）和18.0%（9／50），组间比较具有统计学差异（P＜0.05），而E－cadherin在A、B、C三组中的阳性表达率分别为32.0%（16／50）、64.0%（32／50）和90.0%（45／50），组间比较具有统计学差异（P＜0.05）。见表1。

表1 Ezrin和E－cadherin在各组中的表达情况（n）

表2 Erzin和E－cadherin的表达与临床资料的关系

2.2 Erzin和E－cadherin的表达与临床资料的关系Erzin蛋白和E－cadherin蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达与组织分化程度，以及是否有淋巴结的远处转移具有显著相关性（P＜0.05），而与年龄、组织学类型和临床分期不存在显著相关性（P＞0.05）。见表2。

2.3 Erzin和E－cadherin在宫颈癌组织中表达的相关性 利用Spearman相关性检验对Erzin和E－cadherin在宫颈癌组织中表达的相关性进行检验，结果发现两者在宫颈癌中的表达呈负相关（r＝－0.393，P＜0.05）。

3 讨论

Ezrin蛋白在细胞中起到连接细胞膜和微丝、微管和中间纤维的作用［4］。Auvinen在研究中发现，Erzin蛋白只有在活性状态下，才能发挥其生物学功能——即连接功能［5］。当某些内、外源性信号使其C端的一个保守的苏氨酸残基磷酸化后，便可通过肌动蛋白与细胞膜相连，而与细胞膜结合在一起的N端则与细胞表面膜蛋白连接在一起，共同调节细胞与基质、细胞与细胞分子之间的黏附性，影响恶性肿瘤细胞侵袭性的生物学行为［6］。E－cadherin蛋白是Cadherin蛋白家族中的一员，是一种跨膜糖蛋白。陆洪军在研究中发现，E－cadherin蛋白可以将同种细胞相互连接起来，起到一个粘附作用［7］。当E－cadherin表达减少，这种作用就会减弱，当其发生在肿瘤组织中时，会导致肿瘤细胞发生远处转移更加容易。Daniele等发现，在高侵袭性肿瘤细胞中E－cadherin出现表达的减弱或消失［8］。由E－cadherin介导的同种细胞间的黏附功能的异常可由它自身功能的异常引起，也可由与它相连的Ezrin蛋白引起。

本次研究结果显示：Ezrin在三组间的阳性表达率分别为74.0%、36.0%和18.0%，组间比较具有统计学差异（P＜0.05），E－cadherin在三组间的阳性表达率分别为32.0%、64.0%和90.0%，组间比较具有统计学差异（P＜0.05）。二者表达的异常贯穿于整个宫颈疾病发生发展的过程。在对两种蛋白的阳性表达与临床资料的相关性的分析中发现，两种蛋白均与组织分化程度和是否存在淋巴结远处转移有显著的相关性（P＜0.05）。肿瘤组织分化程度越高，Ezrin阳性率越低，E－cadherin阳性率越高，而当肿瘤出现淋巴结远处转移时，Ezrin的阳性表达显著升高，而E－cadherin的阳性表达却显著降低，这与El Hamdani的研究结果一致［9］。经Spearman等级相关分析证实，二者的表达呈负相关（r＝－0.393，P＜0.05），充分提示激活后的Ezrin蛋白可以使E－cadherin蛋白从细胞膜转移到细胞内，造成胞内蓄积，导致同种细胞间黏附能力下降，共同促进肿瘤细胞的侵润及转移，促进宫颈癌的发生及发展［10］。提示Ezrin及E－cadherin在肿瘤细胞侵袭发展中具有着一定的作用，二者的异常表达可能提示着患者的预后不良。

综上，Ezrin及E－cadherin的异常表达共同促进了肿瘤细胞的浸润及转移，可以作为初步预测宫颈癌预后的指标。

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To investigate the expression and correlation of Ezrin and E－cadherin in cervical cancer

LÜHong－mei1，WEI Shuangmei2.（1.Heilongjiang University of Chinese Medicine Jiamusi College，Jiamusi 154002，China；2.Jiamusi Maternal and Child Health Hospital Jiamusi）

Objective To investigate Ezrin and E－cadherin expression in cervical carcinoma and their correlation.Methods 50patients of cervical carcinoma were randomly selected as cervical carcinoma group（A group），50patients of cervical intraepithelial neoplasia（CIN）were selected as CIN group（B group）and 50patients of normal cervical tissues were selected as control group（group C）.Using immunohistochemical method（S－P method）to test the Ezrin and E－cadherin’s expression and the expression with the clinical data for statistical analysis.Results The positive expression of Ezrin and E－cadherin in A，B，C groups were respectively 74%，36%，18%and 32%，64%，90%，comparison between groups with statistical difference（P＜0.05）；Erzin and E－cadherin expression in cervical cancer tissues and tissue differentiation and lymph node metastasis was significantly associated with（P＜0.05）；negatively correlated with expression of Erzin and E－cadherin in cervical cancer（R＝0.393，P＜0.05）.Conclusion The abnormal expression of Ezrin and E－cadherin can promote the invasion and metastasis of tumor cells，can be used as a preliminary prediction index of prognosis of cervical cancer.

Cervical cancer；Ezrin；E－cadherin；Immunohistochemical method

R737.33

A

吕红梅（1974－），女，主治医师，医学硕士，主要研究方向：肿瘤病理。

2014－08－09）

1007－4287（2015）06－0937－03