晚期乳腺癌患者Survivin的表达情况及与放疗敏感性的关系

艾秀清，张银华，司马义力·买买提尼亚孜，木妮热·木沙江

（新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺放疗科，新疆乌鲁木齐830011）

晚期乳腺癌患者Survivin的表达情况及与放疗敏感性的关系

艾秀清，张银华，司马义力·买买提尼亚孜，木妮热·木沙江＊

（新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺放疗科，新疆乌鲁木齐830011）

目的 对晚期乳腺癌患者Survivin的表达情况及对放疗敏感性的分析。方法 选取首诊并确诊为晚期乳腺癌（局部T4期）并丧失手术治疗机会的30例女性患者作为研究对象。对入组患者行TAC方案全身化疗及放疗，根据放疗敏感性进行分组，分为放疗敏感组和放疗不敏感组，比较2组放疗前后Survivin表达情况。结果 ①Survivin蛋白在晚期乳腺癌患者放疗敏感组和放疗不敏感组组的高表达率分别为40%（8／20）和80.0%（8／10），两组差异具有统计学意义（P＜0.05）。②放疗敏感组中Survivin表达平均值为（29.10±14.68），显著低于放疗不敏感组（46.71±15.54）（P＜0.05）。③放疗敏感组和放疗不敏感组组的凋亡指数分别是（15.39±3.15）和（8.17±1.96），两组间差异显著（P＜0.05）。Survivin高表达组和Survivin低表达组的凋亡指数分别是（10.23±2.33）、（14.78± 1.69），两组间差异显著（P＜0.05）。④放疗后，放疗敏感组Survivin表达为（20.33±7.89），与放疗前相比，差异显著（P＜0.05）。放疗不敏感组为（42.48±13.87），与放疗前相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 Survivin表达水平与放疗敏感性之间存在密切关系，可以作为预测乳腺癌放疗敏感性、疗效评价及预后的指标。

乳腺癌；Survivin；乳腺癌放疗；敏感性；疗效

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0912）

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。生存素（Survivin）是新近发现的最强的凋亡抑制基因［1］，具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的双功能蛋白［2］。放射治疗主要是通过直接物理作用（DNA双链断裂）和诱导细胞内相关基因表达介导凋亡来促使肿瘤细胞死亡。肿瘤细胞对凋亡的敏感性和对辐射的敏感性是一致的。本研究拟对放疗前后癌组织中Survivin在表达情况进行分析，对Survivin表达与放疗敏感性的关系进行探讨，为使用Survivin预测乳腺癌放疗敏感性及判断疗效评价、预后提供理论依据，现将结果报道如下。

1 对象与方法

1.1 一般资料

选取2013年4月至2014年4月期间就诊于我院，首诊并确诊为晚期乳腺癌（局部T4期）并丧失手术治疗机会的30例女性患者作为研究对象，患者年龄35－67岁，平均（53.6±6.3）岁。

纳入标准：①局部T4期，首诊已丧失手术治疗机会的晚期女性乳腺癌患者；②所有入组患者均行病理学诊断，首次病理确诊为乳腺浸润性导管癌并有实体肿瘤存在；③入组前未行任何乳腺肿瘤的治疗；④全身情况好可耐受放化疗且放化疗后临床评估可行局部姑息手术治疗；⑤中途放弃治疗者退出；⑥所有患者临床资料和随访记录完整。

根据放疗敏感性对患者进行分组，分为放疗敏感组和放疗不敏感组。对完全缓解（CR）和部分缓解（PR）评价为放疗敏感；对稳定（NC）和进展（PD）评价为放疗不敏感。CR 14例，PR 6例，NC 9例，PD 1例。即放疗敏感20例，放疗不敏感10例。

两组患者在年龄、病程等方面比较，差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 治疗方法及观察指标

对入组患者行TAC方案全身化疗，疗程为6个周期。化疗结束行乳腺局部行放疗，放疗使用美国瓦里安clinac23EX高能电子直线加速器进行晚期乳腺癌患者三维调强放射治疗。

患者放疗结束后一个月使用近期疗效评价标准对放疗疗效进行评价。可以通过临床查体实体、B超、MRI结合评价。疗效评估后可行姑息性手术治疗。

采用链酶菌抗生物素蛋白过氧化物酶（SP）法，对放疗前后癌组织Survivin的表达进行检测。一抗：鼠抗人Survivin单克隆抗体工作液，二抗及相应SP染色试剂盒购自北京中山生物技术公司。Survivin以细胞核和（或）细胞质出现棕黄颗粒为阳性细胞。由病理科专家在未知患者资料的情况下进行结果读取，选择5个高倍视野（×400），每个视野计数100个细胞。Survivin阳性结果判定参照Lgaws等方法：胞质或胞核呈黄色至棕黄色者为阳性表达细胞。将阳性细胞数按其数量及显色强度分为3级：表达弱阳性（＋），即阳性细胞数＜10%，表达强阳性（＋＋＋），即阳性细胞数＞60%，多数细胞呈黄色至棕黄色；表达中度阳性（＋＋），即阳性细胞数在10%－60%。

1.3 统计学处理

使用SPSS17.0统计学软件包，计数资料的比较采用χ2检验，计量资料的比较采用t检验，以P＜0.05具有统计学意义。

2 结果

2.1 Survivin蛋白在晚期乳腺癌患者中的表达情况

30例病例标本中，高表达率为53.3%，Survivin蛋白在晚期乳腺癌患者放疗敏感组和放疗不敏感组的高表达率分别为40.0%（8／20）和80.0%（8／10），两组比较有统计学差异（χ2＝4.28，P＜0.05）。提示Survivin蛋白在放疗不敏感组中的表达水平要显著高于放疗敏感组，这说明Survivin蛋白表达与晚期乳腺癌的放疗敏感性呈显著负相关，即Survivin蛋白低表达的晚期乳腺癌患者对放射治疗更加敏感。（见表1）

表1 Survivin蛋白在晚期乳腺癌患者中的表达情况

2.2 晚期乳腺癌患者的Survivin表达情况及细胞凋亡指数

放疗敏感组中Survivin表达与放疗不敏感组两组比较，差异有统计学差异（P＜0.05）。提示Survivin表达水平与晚期乳腺癌患者的放疗敏感性呈显著负相关，即Survivin低表达的晚期乳腺癌患者对放射治疗更加敏感。（见表2）

随机选取5个髙倍视野计数1000个肿瘤细胞中凋亡细胞所占百分比，计算凋亡指数（apoptotic index，AI）：AI（%）＝凋亡细胞数／观察细胞总数× 100%。放疗敏感组与放疗不敏感组的凋亡指数之间比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。提示细胞凋亡与放疗敏感性呈正相关。Survivin高表达组和Survivin低表达组的凋亡指数两组之间比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；提示Survivin表达与放疗敏感性呈负相关。（见表2、表3）

表2 晚期乳腺癌患者的Survivin表达情况及细胞凋亡指数

表3 Survivin表达与细胞凋亡的关系

2.3 放疗前后Survivin表达情况的变化

放疗前或放疗后2组患者Survivin表达之间均有显著性差异（P＜0.05或0.001）。放疗后2组患者Survivin表达均有所下调，放疗敏感组与放疗前相比差异具有统计学意义（P＞0.05）；放疗不敏感组与放疗前相比，差异未见统计学意义（P＜0.05）。（表4）

表4 放疗前后Survivin表达情况的变化

3 讨论

细胞凋亡受一系列凋亡促进因子和凋亡抑制因子的共同调节［3］。现有研究表明肿瘤的发生、发展和消退不仅是细胞增殖失控、分化异常的结果，而且与细胞凋亡失衡有关。细胞过度增殖和（或）凋亡抑制，进而造成细胞无限生长，从而形成肿瘤。肿瘤组织在无外界因素如辐射、药物等干预时，也会发生细胞凋亡，被称为自发性细胞凋亡（spontaneous apoptosis）。大量的研究发现，细胞凋亡及放射诱导细胞凋亡可能与肿瘤的放射敏感性有关，肿瘤细胞对凋亡的敏感性和对辐射的敏感性是一致的。如果能从凋亡相关基因中找到与放射敏感性有关的特异性指标，通过诱导或抑制其表达来提高患者对放射治疗的敏感性，进而提高肿瘤治疗的效率［4］。

生存素（Survivin）是新近发现的最强的凋亡抑制基因，几乎在所有的癌组织中均有表达［5］。不仅与肿瘤的发生、发展有关，而且其表达往往与肿瘤的恶性程度、预后不良呈正向关系，是一个潜在价值的肿瘤标志，是预测肿瘤预后及评价临床治疗效果的重要指标可作为肿瘤治疗的新靶点［6，7］。Survivin基因具有调节细胞凋亡和细胞周期的双重作用，大量研究揭示了它与肿瘤细胞凋亡、细胞周期调控和放射敏感性之间的密切关系［8，9］。

有学者［10］报道随着Survivin表达强度增强，放疗疗效不断下降，且Survivin与放射敏感性存在负向线性相关；研究认为Survivin表达水平可预测肿瘤患者对放疗的敏感性。这与以往［11，12］研究结果一致。本研究发现，Survivin蛋白在放疗不敏感组中的表达水平要显著高于放疗敏感组，这说明Survivin蛋白表达与晚期乳腺癌的放疗敏感性呈显著负相关，即Survivin蛋白低表达的晚期乳腺癌患者对放射治疗更加敏感。研究对放疗敏感与凋亡指数的关系进行分析发现，细胞凋亡与放疗敏感性呈正相关，Survivin表达与放疗敏感性呈负相关。对放疗前后Survivin表达情况进行分析发现，放疗后Survivin表达有所下调，以敏感组最为显著。提示Survivin可能参与了癌症的发生与发展；放疗后其表达下调，这与放疗后肿瘤细胞增殖受到抑制及促进肿瘤细胞凋亡有关，提示放疗能有效地逆转癌组织局部肿瘤细胞Survivin的表达，Survivin的表达可以作为观察放疗疗效的客观指标［13，14］。

综上所述，Survivin表达水平与放疗敏感性之间存在密切关系。研究Survivin在晚期乳腺癌首次确诊病理癌组织中及放疗前后癌组织中的表达水平，同时与患者放射治疗后的近期临床疗效评价相结合，可使Survivin作为预测乳腺癌放疗敏感性、疗效评价及预后的指标。

［1］Nagata Y，Araki N，Kimura H，et al.Neoadjuvant chemotherapy by transcatheter Arterial infusion method for uterine cervical cancer［J］.J Vascerv Radiol，2000，11（3）：313.

［2］Kobierski J，Mielcarek P，Brzoska B，et al.Neoadjuvant chemotherapy in the treatment of advanced cervical cancer［J］.Ginekol Pol，2002，73（9）：807.

［3］古力娜.库尔班，钟 薇.细胞凋亡、Fas、Cox－2在宫颈癌放疗敏感性中的研究进展［J］.新疆医科大学学报，2008，31（6）：648.

［4］Sardi JE，Boixadera MA，Sardi JJ，et al.Neoadjuvant chemotherapy in cervical cancer［J］.a new trend Curr Obstct Gynecol，2005，17（1）：43.

［5］Xiang Yan－qun，Yao He－rui，Wang Shu－sen，et al.Prognostic value of Survivin and Livin in nasopharyngeal carcinoma［J］.Laryngoscope，2006，116（1）：126.

［6］郝 辉，李 娟，李亚辉，等.Survivin和Caspase－3蛋白表达与食管鳞癌放疗疗效的关系［J］.河北医药，2012，34（15）：2248.

［7］Li F，Ackmnann EJ，Bennett CF，et al.Heiotrspiceel divistim defects and apoptesis induced by interference with Survivin function［J］.Nat Cell，1999，1（8）：461.

［8］华 晔，陈德玉，戴春华，等.直肠腺癌放疗前后survivin的表达及其与放疗敏感性的关系［J］.山东医药，2011，51（1）：61.

［9］高碧燕，张 明，杨 毅，等.survivin与宫颈鳞癌新辅助化疗和放疗敏感性的相关性研究［J］.实用癌症杂志，2010，25（5）：133.

［10］魏晓丽，张玉，刘敏丽，等.乳腺癌组织中Survivin、Ki67的表达变化及意义［J］.山东医药，2013，53（3）：12.

［11］王大勇.乳腺癌患者手术治疗前后Survivin的表达及临床意义［J］.河北医药，2013，（18）：2749.

［12］魏杨辉，张宗明，杨莉涛，等.survivin、galectin－3、Ki－67在乳腺癌组织中的表达及其意义［J］.山东医药，2013，53（36）：14.

［13］王蕴众.Survivin和Cox－2在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及临床意义［J］.现代肿瘤医学，2013，21（11）：2448.

［14］宫惠琳，张锁平，张冠军，等.Survivin、MMP－2在乳腺癌中的表达及其相关性研究［J］.重庆医科大学学报，2012，37（2）：106.

Expression of Survivin in advanced breast cancer patients and the analysis of its radiation sensitivity

AI Xiu－qing，ZHANG Ying－hua，Simayili Maiaitiniyazi，et al.（Department of Radiation Oncology，Cancer Hosptial of Xinjiang Medical University，UrumQi 830011，China）

Objective To expression of Survivin in patients with advanced breast cancer and analysis its radiotherapy sensitivity.Methods 30female patients with advanced breast cancer（T4stage）who lost the chance of operation treatment were chosen for the study.all underwent TAC chemotherapy and radiotherapy，the patients were divided into non sensitive group and sensitive group according to the sensitivity to radiotherapy，comparing with the expression of Survivin in 2groups before and after radiotherapy.Results ①Survivin protein high expression rates were 40%in patients with advanced breast cancer radiotherapy group and radiotherapy is not sensitive group（8／20）and 80%（8／10），with significant difference between two groups（P＜0.05）.②The radiation sensitive groups in the Survivin expression of mRNA average value was（29.10±14.68），was significantly lower than the radiation resistant group（46.71±15.54）（P＜0.05）.③The radiation sensitive group and radiation insensitive group apoptosis index was（15.39±3.15）and（8.17±1.96），the difference between the two groups was significant（P＜0.05）.High expression of Survivin group and Survivin group of low expression of apoptosis index were（10.23±2.33），（14.78±1.69），the difference between the two groups was significant（P＜0.05）.④After radiotherapy，radiotherapy group Survivin expression was（20.33± 7.89），compared with before radiotherapy，significant difference（P＜0.05）.Not sensitive to radiotherapy group（42.48 ±13.87），compared with before treatment，no significant difference（P＞0.05）.Conclusion To study the relationship between Survivin expression and radiation sensitivity，can be used as a prediction of breast cancer radiotherapy sensitivity，curative effect evaluation and prognosis.

Survivin；breast cancer；radiotherapy；sensitivity；curative effect

R737.9

A

艾秀清（1975－），女，主治医师，硕士，研究方向：乳腺肿瘤放射治疗。

2014－06－15）

1007－4287（2015）06－0912－04

新疆医科大学科研创新基金（XJC201380）课题名称：Survivin在晚期乳腺癌组织中的表达与放疗敏感性的相关性研究

＊通讯作者