糖尿病肾病动物模型建立的体会

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【摘要】目的：建立糖尿病肾病（DN）大鼠模型。方法：取Wistar大鼠24只，随机分为空白对照组（12只）和模型组（12只）。模型组采用单纯腹腔注射1%链脲佐菌素（STZ）悬液，复制Wistar大鼠糖尿病肾病动物模型。结果：单纯腹腔注射1%链脲佐菌素悬液4周可成功复制糖尿病肾病大鼠动物模型。结论：采用单纯腹腔注射链脲佐菌素方法复制糖尿病肾病大鼠模型，该方法具有简便、容易掌握，短期内可诱导出大量满意的动物模型。

【关键词】链脲佐菌素悬液；糖尿病肾病；动物模型

【中图分类号】R5872【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2015）01-0113-02

1仪器与药物

11仪器SPS401F 型电子天平（北京西杰公司）；GT10-2 台式高速离心机（北京时代北利仪离心机仪器有限公司）；PRONTO-E全自动生化分析仪（意大利奔腾）；强生血糖仪（美国强生公司）；强生血糖试纸（美国强生公司）；HY-612 半自动尿液化学分析仪（深圳市汇研科创生物科技有限公司）；HMIAS-2000彩色病理图文分析系统（北京杰伟世视音频设备有限公司）；KD-BM生物组织包埋机（浙江省华市科迪仪器设备有限公司）；KD-3358电脑超薄切片机（浙江金华科迪仪器设备有限公司）。

12试剂链脲佐菌素（streptozotocin C8H15N3O7，美国Sigma公司） ；柠檬酸（北京东方博爱生物科技有限公司）；柠檬酸钠（北京东方博爱生物科技有限公司）；肌酐（批号：A70333，上海抚生生物科技有限公司）；尿素试剂盒（批号：A64247，上海抚生生物科技有限公司）；其余试剂均为分析纯。

13STZ悬液的配制柠檬酸缓冲液母液的配法：柠檬酸19214g加入二蒸水100ml配成A液，柠檬酸钠29410g加入二蒸水100ml配成B液。1%链脲佐菌素缓冲液的配制：将A、B液按比例（1∶132）均匀混合，其pH值为419～422，将此缓冲液配成1%链尿佐菌素悬液。

14试验动物Wistar大鼠，由吉林大学白求恩基础医学院实验动物中心提供，卫生许可生产号：SCXK-（吉）2007-0003。

2方法

21造模方法及分组[1-2]选雄性Wistar大鼠24只，体重250～280g，随机分为空白对照组（12只）和模型组（12只）。将模型组禁食12h后，用01mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液将链脲佐菌素配成1%的悬液，按56mg/kg体重单次腹腔注射1%链脲佐菌素悬液复制糖尿病肾病模型。腹腔注射66h后开始禁食，不禁水，由尾静脉取血测定血糖，血糖≥168mmol/L者，为糖尿病造模型成功。

22观察与检测指标观察情况：每天观察大鼠的一般精神状态、毛色、进食、饮水及尿量等，模型建立成功后，每两周测定一次大鼠的体重，并加以记录。空腹血糖：模型建立成功后，分别在第二、第四周末断尾取血，采用血糖仪测定一次血糖。尿糖：模型建立成功后，分别在第二、第四周末，将大鼠放入洗净的代谢笼内，收集尿液，用自动尿液分析仪测定。第四周末（腹主动脉血）采用生化分析仪检测。

23统计方法采用Excel软件进行数据处理，数据用均数±标准差（x[TX-*3]±s）表示，采用t检验，P<005表示差异有统计学意义。

4讨论

慢性肾功能衰竭（CRF）是严重危害人类健康的多发病之一，其发病率呈逐年上升的趋势，是世界性难题之一[2]。现代医学领域中有很多糖尿病肾病动物模型的方法，如手术切除胰腺法、药物破坏胰岛素β细胞法及药物与手术（5/6肾脏切除）联合制作法等，其中笔者选用单次大量腹腔注射1%链脲佐菌素缓冲液诱导速发型糖尿病模型[2]。本次试验结果证明，单纯腹腔注射链脲佐菌素溶液后4周时可成功的造成糖尿病肾病大鼠模型。该方法简便、容易掌握，短期内可诱导出大量满意的动物模型。

参考文献

[1] 中华医学会糖尿病学分会.2007年版中国2型糖尿病防治指南[J].中华流行病学杂志，2008，24（2）：22-23.

[2] 王春艳.链脲佐菌素诱导大鼠2型糖尿病模型的建立[J].吉林医药学院学报，2010，2（1）：22.

（收稿日期：20140922）