海南香大蕉丛枝菌根真菌研究

李岚岚 李增平

摘 要 对海南省香大蕉根际土样中的AMF资源进行调查，从14个县（市）采集的43份土样中分离鉴定出9个属共45种AMF。其中无梗囊霉属（Acaulospora）16种、球囊霉属（Glomus）10种、环孢囊霉属（Kuklospora）1种、巨孢囊霉属（Gigaspora）7种、盾巨孢囊霉属（Scutellospora）2种、Dentiscutata 4种、Racocetra 3种、Quatunica 1种、Cetraspora 1种。无梗囊霉属（Acaulospora）为海南香大蕉根际AMF的常见属，双网无梗囊霉（A. bireticulata）、疣状无梗囊霉（A. tuberculata）为常见种。不同香大蕉根际土样中的AMF种类不尽相同。

关键词 海南；香大蕉；丛枝菌根真菌；多样性

中图分类号 S668.1；S154.3 文献标识码 A

Species Diversity of Arbuscular Mycorrhizal Fungus Associated

with Musa spp. in Hainan Province

LI Lanlan， LI Zengping*

College of Environment and Plant Protection， Hainan University， Haikou， Hainan 570228， China

Abstract The species diversity of AMF in the rhizosphere of Musa spp.， Hainan， was investigated. Forty-five species belonging to nine genera were isolated and identified from 43 rhizosphere soil samples of 14 counties，including 16 species of Acaulospora， 10 species of Glomus， 7 species of Gigaspora， 4 species of Dentiscutata， 3 species of Racocetra， 2 species of Scutellospora， 1 species of Kuklospora， 1 species of Quatunica and 1 species of Cetraspora. Acaulospora was the common genera， otherwise， A. bireticulata and A. bireticulatain were the common species in the rhizosphere of Musa spp.

Key words Hainan； Musa spp.； Arbuscular mycorrhizal fungus（AMF）； Species diversity

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2015.09.014

香大蕉[1]为芭蕉科（Musaceae）芭蕉属（Musa）的一类热带水果，包括香蕉（Musa nana Lour.，AAA Group Cavendish）、大蕉（M. paradisiaca Linn.，ABB Group Dajao）、粉蕉（M. sapientum L. AAB Group Fenjao）等，是仅次于水稻、小麦、玉米的世界第四大粮食作物[2]，也是仅次于柑橘的第二大水果， 更是世界水果贸易量最大的鲜果[2-3]。丛枝菌根（Arbuscualr mycorrhiza fungus，AMF）属于菌物界、球囊菌门，是一类古老的能与绝大多数植物根系建立互利共生关系的专性活体营养型真菌，对植物的进化、分布、生长发育及增强植物的抗病性、抗逆性等方面发挥着重要作用[4]，目前，国内对于香大蕉丛枝菌根真菌的研究较少，且比较简单，仅有张科立等[5]对海南儋州、乐东、云龙、感城、兴隆5个香蕉主栽区的香蕉丛枝菌根真菌进行过简单的种类调查，分离到Glomus、Paraglomus和Gigaspora的菌根真菌；国外Joyce Mnyazi Jefwa等[6-7]于2012年报道了从肯尼亚50个农场采集香蕉根际土壤分离鉴定到Acaulospora、Archaespora、Glomus、Scutellospora、Gigaspora的AMF，其中以Acaulospora孢子密度最大。

2000年李敏等[8]用Gigaspora rosea、Glomus mossea和Glomus versiforme接种盆栽西瓜，能显著减轻Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum引起的枯萎病的发病率并促进西瓜生长。王倡宪等[9]2012年用Glomus versiforme与Glomus intraradices接种“津绿3号”黄瓜，不仅能促进黄瓜幼苗生长，还能降低Fusarium oxysporum f.sp.niveum引起的枯萎病的发病率。香大蕉是海南省产量最大的热带水果，是农民收入的支柱产业之一，在全省国民经济中占有重要的位置[10-17]，然而近年来越来越严重的香蕉枯萎病极大地限制了海南香大蕉产业的健康发展。笔者对海南省香大蕉种植区香蕉、芭蕉、粉蕉、皇帝蕉、野芭蕉根际土壤中的AMF物种多样性进行了较为全面的调查，以便进一步摸清海南香大蕉根际的AMF种类，为将来筛选抗香蕉枯萎病的有益AMF提供参考。

1 材料与方法

1.1 样品采集

2013年1月至2014年11月间，多次在海南省海口市、临高县、澄迈县、琼海市、儋州市、昌江县、东方市、乐东县、五指山市、琼中县、保亭县、三亚市、万宁市、白沙县等14个市县共采集土样43份，采用五点取样法，在20 m×20 m的面积内随机选择5株生长壮旺的香大蕉植株，从其根际采取土样，首先去除地表面的杂草、枯枝落叶等覆盖物（1～3 cm），后挖取0～15 cm深的土壤（约2.5 kg）装入布袋中。样品采回后倒出放在阴凉通风处自然晾干，去除碎石、枯枝等杂物后凉干保存备用。采集土样时一同采集香大蕉根样，用清水洗净，放入FAA固定液中低温保存，带回室内进行菌根染色观察。

1.2 菌根染色观察

将采集回来的根样从FAA固定液中取出，剪成1 cm长的小段，用5%的KOH溶液浸泡，放入90 ℃恒温水浴锅中加热约1 h（根据根的老幼程度、粗细和硬度，适当延长或缩短水浴加热时间；若根样保存在FAA固定液中超过2 h，适当延长水浴加热时间）；水浴加热约1 h后，取出根样洗净，移入2%HCl溶液中酸化5 min，用清水洗净；再用0.01%的品红染液常温浸泡染色24 h，或经90 ℃水浴加热1 h，取出根样用清水洗净，经乳酸脱色，最后排列在载玻片上，盖上盖玻片进行压片镜检。

1.3 AMF的分离与鉴定

1.3.1 AMF的分离 取风干的土样50 g，放入大烧杯中加水浸泡约30 min，根据土质的不同，适当延长浸泡时间，浸泡一段时间后过双层分样筛（上层筛孔径1 mm，下层筛400目），反复洗刷土样，收集下层筛中的残留物于大号离心管中，在离心机中以3 000 r/min的速度离心3 min，去掉上清液后加入45%的蔗糖溶液，搅拌均匀后迅速放入离心机，以1 500 r/min的速度离心1 min，取出将上清液倒入400目筛中，收集残留物于培养皿中，在解剖镜下收集并计数所分离得到的孢子。

1.3.2 AMF的鉴定 将分离得到的孢子用水作为浮载剂进行观察，然后加入Melzer's、PVLG染液制片，于光学显微镜下观察孢子的形状、颜色、孢壁颜色、孢壁结构、组成孢子内含物等，测量孢子大小、孢壁厚度。再于OLYMPUS BX51TRF生物摄影显微镜下拍照。参考最新分类系统[18]和国际丛枝菌根真菌菌种保藏中心（INVAM，http：//invam.caf.wvu.edu）提供的AMF各个种的描述和图片，王幼珊著[19]《中国丛枝菌根真菌资源与种植资源》中AMF种的描述及国内相关文献进行种类鉴定。

2 结果与分析

2.1 菌根染色观察

对野外采集的香大蕉根系进行菌根染色后，在粉蕉、香蕉、芭蕉根内均观察到明显的AMF菌丝、近球形和长椭圆形的泡囊，结果表明海南香大蕉根系与AMF建立了良好的共生关系（图1）。

2.2 AMF的种类及分布

2.2.1 各土样中AMF种类情况 对43份土样进行AMF的分离鉴定，初步确定有9个属共45种，其中Acaulospora 16种、Glomus 10种、Kuklospora 1种、Gigaspora 7种、Scutellospora 2种、Dentiscutata 4种、Racocetra 3种、Quatunica 1种、Cetraspora 1种（表1）。

从表1可以看出，海南香大蕉根际土壤中的AMF种类非常丰富。海南不同香大蕉根际土壤中的AMF种类有一定差别，所采集回来的土样中，以粉蕉中筛到的AMF种类最多，共35种，其次是芭蕉和野芭蕉各20种，香蕉最少，仅11种，在所筛到的菌根真菌中，以Acaulospora较为常见。

2.2.2 同一地区不同香大蕉根际土样中AMF的种类情况 同一地点不同蕉类植物，筛到的AMF数量和种类都有一定的差别，在海口海甸校区采集的香蕉、粉蕉、芭蕉根际土样中，筛到的AMF孢子种类和数量都有不同，以芭蕉根际土样中所含的孢子种类最多，有7个种，并且都属于Gigasporales，该属的各个种孢子数量都比较少；香蕉根际土样中筛到2种，以A. tuberculata为常见种（本文中指在该土样中筛到的频率较高、数目相对比较多的种）；粉蕉根际土样中筛到4个种，各个种所含孢子数量都比较少。临高加来采集的香蕉土样中筛到2种，以G. tenebrosum为常见种；粉蕉土样中筛到3个种，以A. mellea为常见种。万宁石梅采集的芭蕉土样中筛到11种类型的孢子，以A. tuberculata、A.bireticulata为常见种；粉蕉土样中筛到9种类型的孢子，以A. tuberculata、A. bireticulata、G. tenebrosum为常见种。琼海塔洋采集回来的香蕉土样中没有筛到孢子；粉蕉土样中仅筛到A. bireticulata。儋州采集的野芭蕉土样中筛到的AMF孢子种类和数量最多。澄迈白莲采集回来的芭蕉土样中筛到2个种，以A. bireticulata为常见种；粉蕉土样中筛到3个种，以A. bireticulata为常见种。白沙邦溪采集回来的香蕉土样和粉蕉土样中筛到的AMF种类数量相差不大，但是所含的孢子类型却不完全相同（表2）。

2.3 香大蕉根际部分AMF种类记述

从香大蕉根际土样中鉴别出的9个属AMF，以Acaulospora种类最多，其次是Glomus，Gagisporales 各个属种类相对较少（见图2）。

2.3.1 无梗囊霉属Acaulospora （1）双网无梗囊霉[21-23]Acaulospora bireticulata Rothwell& Trappe.（见图2-1）

孢子球形至椭球形，（120～150）μm×（150～180）μm，幼嫩孢子透明，成熟孢子淡黄色，易碎；孢子表面被有明显的双层网纹，网纹格呈多边形。孢子壁有2层壁或不易区分的多层壁；Melzer's试剂染色反应不明显。

标本号：20130430-WNDSL-YBJ-16、20130430-WNDSL-YBJ-17、20130430-WNDSL-YBJ-20、20130430-WNDSL-YBJ-64、20130430-WNDSL-YBJ-05、20131012-WNSMGSLK-FJ-15、20131012-WNSMGSLK-BJ-09、20131012-WNSMGSLK-BJ-23、20131013-BTYND-FJ-01、20131013-SY-FJ-01、20140622-DZLYSTD-FJ-03、20140623-DZLYBQ-FJ-03、20140907-CJDD-FJ-02、20140621-DZLYDDD-XJ-02、20141115-DFBSLGL-FJ-01、20141115-DFBSLGL-XJ-02、20141116-LDHLBB-FJ-03等。

（2）詹氏无梗囊霉[22-23，25]Acaulospora gerdemannii Blaszk（见图2-2）。

孢子近球形，浅黄色至黄棕色，（150～200）μm×（150～250）μm，孢子外轮廓不整齐，表面不光滑、不规则。孢子壁：L1具有脑纹状旋绕，破口边缘不整齐；L2呈层叠鳞片状，不规则多角形。

标本号：20130109-LGGSLK-FJ-08、20130109-LGGSLK-FJ-30、20131012-WNSMGSLK-FJ-38、20131012-WNSMGSLK-BJ-04、20131012-WNSMGSLK-BJ-21、20131013-SY-FJ-12。

宿主：粉蕉、芭蕉。

（3）蜜色无梗囊霉[23，28]Acaulospora mellea Spain & Schenck（见图2-3）。

孢子球形、近球形或椭圆形，浅黄色至黄棕色，大小（100～120）μm×（110～150）μm。孢子壁：三层，L1于Melzer's试剂中呈浅黄色；L2于Melzer's 试剂中无明显变化；L3于Melzer's试剂中呈现紫红色。

标本号：20130430-WNDSL-YBJ-34、20130430-WNDSL-YBJ-43、20131012-WNSMGSLK-BJ-02、20130626-LGJL-FJ-04、20140623-DZLYBQ-BJ-01、20140623-DZLYBQ-FJ-02、20140624-DZGC-BJ-01、20141115-DFBSLGL-FJ-08等

宿主：粉蕉、野芭蕉、芭蕉。

（4）瑞氏无梗囊霉[23，30]Acaulospora rehmii Sieverding & Toro.（见图2-4）。

孢子浅黄色至淡棕色，球形，直径90～175μm。孢子壁：L1黄色至红棕色，外表具迷宫似的纹饰；L2为透明的均一壁或膜状壁；L3、L4均透明。

标本号：20131012-QHBSL-FJ-06、20131012-QHBSL-FJ-09、20130626-LGJL-FJ-03、20131013-SY-FJ-01、20131013-SY-FJ-04、20131013-SY-FJ-11、20131013-SY-FJ-22、20131013-SY-FJ-26、20140624-DZGC-BJ-04、20140907-BSBX-XJ-02、20141115-DFBSLGL-XJ-03等。

宿主：粉蕉、香蕉、芭蕉。

（5）疣状无梗囊霉[20，22，31]Acaulospora tuberculata D.P.Janos & J.M.Trappe（见图2-5）。

孢子黄棕色至红棕色，球形或近球形，直径150～250 μm，孢子表面光滑。孢子壁三层（Ll、L2、L3）：Ll易逝壁，无色，常紧贴于L2，与Melzer's试剂无反应；L2层状，黄棕色，至红棕色，表面布满瘤状突起，在Melzer's试剂中不反应；L3黄色至黄棕色，与Melzer's试剂无反应。

标本号：20130430-WNDSL-YBJ-19、20130430-WNDSL-YBJ-23、20130430-WNDSL-YBJ-29、20130430-WNDSL-YBJ-45、20130430-WNDSL-YBJ-47、20130430-WNDSL-YBJ-03、20130430-WNDSL-YBJ-04、20131012-WNSMGSLK-FJ-20、20131012-WNSMGSLK-BJ-13、20131014-WZS-YBJ-21、20140517-WNSM-FJ-02、20140907-CJ-FJ（HB）-01、20141115-DFBSLGL-FJ-02、20141115-DFBSLGL-FJ-04等。

宿主：粉蕉、野芭蕉、芭蕉。

2.3.2 环孢囊霉属，刺环孢囊霉[32] Kuklospora spinosa B.P. Cai， Jun Y. Chen， Q.X. Zhang & L.D. Guo.（见图2-6）。

孢子淡橙棕色，球形或近球形，直径100～150 μm。孢子壁三组（Sw、Mw、Iw）。Sw三层：Swl易逝壁，无色，成熟孢子中脱落；Sw2层状，浅黄色，厚3～5 μm，表面密布刺状突起。Mw两层：膜状，无色。Iw两层（Iwl、Iw2）：Iwl膜状，无色，表面布满珠状纹饰；Iw2膜状，无色。

标本号：20130109-LGGSLK-FJ-06、20130109-LGGSLK-FJ-26、20140418-HDXQJD-XJ-04。

宿主：粉蕉、香蕉。

2.3.3 球囊霉属Glomus （1）象牙白球囊霉[33]Glomus eburneum L.J.Kennedy.（见图2-7）。

孢子球形，直径100～130μm，透明至淡黄白色。孢子壁：两层（L1、L2），L1无色透明；L2透明至浅黄色，孢子压碎易皱缩，厚2～3 μm。

标本号：20131012-QHBSL-FJ-01、20131012-QHBSL-FJ-08、20131013-BTYND-FJ-06。

宿主：粉蕉。

（2）荫性球囊霉[34]Glomus tenebrosum S.M.Berch & J.A.Fortin（见图2-8）。

孢子球形或近球形，200～250 μm。黄棕、红棕或深棕色。孢子壁：两层。L1无色，常缺失；L2较厚，断层处常呈黄色或深棕色。连孢菌丝1根，在孢子基部加宽，随菌丝的延伸由深棕色、黄色渐变至黄色、无色。连点开放。

标本号：20130109-LGGSLK-FJ-10、20130109-LGGSLK-FJ-14、20130109-LGGSLK-FJ-17、20130109-LGGSLK-FJ-21、20130109-LGGSLK-FJ-27、20130626-LGJL-XJ-03、20130625-DZJYJD-YBJ-07、20130109-LGGSLK-FJ-35、20130625-DZJYJD-YBJ-11、20130625-DZJYJD-YBJ-23、20131012-WNSMGSLK-FJ-25、20131014-WZS-YBJ-13。

宿主：粉蕉、香蕉、野芭蕉。

2.3.4 巨孢囊霉属Gigaspora （1）Gigaspora aldia[35]N.C.Sehenck&G.S.Smith（见图2-9）。

孢子透明至浅黄色；球形至近球形，大小200～260 μm。孢壁三层：L1为表面光滑；L2于Melzer's染液中呈红棕色至暗紫红色。产孢细胞浅黄色，与孢子间连点封闭。

标本号：20130625-DZJYJD-YBJ-02、20130625-DZJYJD-YBJ-08、20130625-DZJYJD-YBJ-10、20131014-WZS-YBJ-05、20131014-WZS-YBJ-18、20140907-BSBX-FJ-04、20140907-BSBX-FJ-05、20130625-DZJYJD-YBJ-25、20130625-DZJYJD-YBJ-26。

宿主：粉蕉、香蕉、野芭蕉。

（2）微白巨孢囊霉[36]Gigaspora albida N.C.Sehenck & G.S.Smith.（见图2-10）。

孢子无色透明至淡黄色，球形、近球形，大小240～250 μm，表面光滑。孢子壁：L2在Melezr's试剂中变成深红色。产孢细胞透明，于Melzer's试剂中变成淡黄色。

标本号：20131012-WNSMGSLK-FJ-03、20131012-WNSMGSLK-FJ-34、20140517-WNSM-FJ-09、20130625-DZJYJD-YBJ-36、20130625-DZJYJD-YBJ-37、20131012-WNSMGSLK-BJ-27、20140622-DZLYSTD-FJ-02、20140623-DZLYBQ-FJ-05等。

宿主：粉蕉、芭蕉、野芭蕉。

（3）珠状巨孢囊霉[35]Gigaspora margarita W. N. Becker & I. R. Hall， 1976.（见图2-11）。

孢子多呈白色或乳白色；孢子球形至近球形，大小260～400 μm。孢壁三层：L1表面光滑无纹饰；L2于Melzer's染液中呈暗红棕色至暗紫红色；L3内表面分布疣状突起，芽管多从突起处萌发。产孢细胞浅黄色。

标本号：20140508-HDXQJD-BJ-02、20140508-HDXQJD-BJ-04、20130625-DZJYJD-YBJ-18、20140508-HDXQJD-BJ-05、20140508-HDXQJD-BJ-06。

宿主：芭蕉、野芭蕉。

2.3.5 盾巨孢囊霉属Scutellospora （1）美丽盾巨孢囊霉[23，40]Scutellospora calospora（T.H.Nicolson & Gerd.）C. Walker & F. E. Sanders.（见图2-12）。

孢子透明，球形至长椭圆形，大小120～220 μm。孢壁三组：第一组壁于PVLG染液中呈暗红紫色；第二组壁于PVLG染液中不被染色；第三组壁于PVLG染液中呈淡粉色。发芽盾室浅黄色。产孢细胞透明至浅黄色；与孢子连接处封闭。

标本号：20130611-QSLQLW-FJ-04、20130611-QSLQLW-FJ-09、20130611-QSLQLW-FJ-18、20131014-WZS-YBJ-17、20131012-WNSMGSLK-FJ-14。

宿主：粉蕉、野芭蕉。

（2）双紫盾巨孢囊霉[35]Scutellospora dipurpurescens J.B.Morton & R.E.Koske（见图2-13）。

孢子浅黄色；孢子球形至椭圆形，大小150～200 μm。孢壁三组：Ow三层，Mw于Melzer's染液中呈粉红色。Iw于Melzer's染液中呈淡粉红色。发芽盾室浅黄色。产孢细胞透明至浅黄色；与孢子连接处封闭。

标本号：20131013-SY-FJ-10。

宿主：粉蕉。

2.3.6 Dentiscutata （1）Dentiscutata nigra[22-23，35]（J.F.Redhead）Sieverd，F.A.Souza & Oehl=Scutellospora nigra J.F.Redhead.（见图2-14）。

孢子黑色；球形，大小300～520 μm。孢壁三组，孢壁具有明显的网格状纹饰：Ow三层，Ow-L2具有网格状纹饰，网格内分布细小的突起。Mw两层，无染色反应。Iw两层，发芽盾室成熟前不明显。产孢细胞棕色至红棕色，与孢子连接处封闭。

标本号：20140624-DZGC-XJ-01、20140624-DZGC-BJ-03、20140907-CJDD-FJ-05、20140907-BSBX-FJ-06。

宿主：粉蕉、香蕉、芭蕉。

（2）Dentiscutata reticulata[35]（Koske， D.D.Mill & C.Walker）Sieverd， F.A.Souza & Oehl=Scutellospora reticulate Koske， Miller&Walker.（见图2-15）

孢子暗棕色；球形，大小（350～450）μm×（250～340）μm。孢壁三组，孢子表面具有显著的网格状纹饰：表面具有凸起的笔直或弯曲的嵴状结构，且互相连通，形成网格状纹饰；网格呈4至8边形；嵴间密布满突起。发芽盾室环形至肾形。产孢细胞上有钩状枝。

标本号：20131012-WNSMGSLK-BJ-24、20140517-WNSM-FJ-01、20140517-WNSM-FJ-07、20140517-WNSM-FJ-13、20140624-DZGC-BJ-02、20140907-CJDD-FJ-07、20140907-BSBX-FJ-06等。

宿主：粉蕉、芭蕉。

2.3.7 Racocetra （1）Racocetra fulgida[35]（Koske & C. Walker）Oehl， F.A.Souza& Sieverd=Scutellospora fulgida Koske & C.Walker.（见图2-16）。

孢子白色，偶见乳黄色；近球形，大小120～240 μm。孢壁两组：Ow三层，光滑无纹饰；Ow-L3在Melzer's染液中呈浅棕色；Iw无染色反应。产孢细胞透明至淡黄色。

标本号：20140508-HDXQJD-BJ-09、20140623-DZLYBQ-FJ-01、20140907-BSBX-XJ-03。

宿主：粉蕉、香蕉、芭蕉。

（2）Racocetra gregaria[35]（N. C. Schenck & T. H. Nicolson）Oehl， F.A.Souza & Sieverd=Scutellospora gregaria T. H. Nicolon & N. C. Schenck.（见图2-17）。

孢子球形，暗红棕色；大小400～500 μm。孢壁两组，具有纹饰：Ow三层，Ow-L1表面布满钝圆疣状突起；Ow-L2于Melzer's染液中呈暗红棕色；Iw两层。发芽盾室浅黄色，边缘整齐，褶皱少。产孢细胞浅黄色，与孢子连接处封闭。

标本号：20140508-HDXQJD-BJ-01。

宿主：芭蕉。

2.3.8 Quatunica erythropus[22，35] （Koske & C.Walker） F.A.Souza， Sieverd & Oehl，=Scutellospora erythropus Koske & C.Walker.（见图2-18）。

孢子橙棕色，球形或近球形，大小（170～500）μm×（205～600）μm。孢壁光滑四组：Ow三层，Mw二组四层；Iw两层，Iw-L2于Melzer's染液中呈紫色或深紫色。发芽盾室黄棕色。产孢细胞倒卵圆形至棍棒形，黄棕色，与孢子连接处封闭。

标本号：20140508-HDXQJD-BJ-03、20140508-HDXQJD-BJ-10、20130625-DZJYJD-YBJ-01、20130625-DZJYJD-YBJ-03、20130625-DZJYJD-YBJ-07。

宿主：芭蕉、野芭蕉。

2.3.9 Cetraspora pellucida[22，35] （T.H.Nicolson & N.C.Schenck）Oehl， F.A.Souza & Sieverd=Scutellospora pellucida T.H.Nicolon & N.C.Schenck.（见图2-19）。

孢子透明至黄色；球形或近球形，大小120～240 μm。孢壁三组，产孢细胞透明至浅黄色，与孢子间连点封闭。发芽盾室透明至浅棕黄色，边缘褶皱。

标本号：20140508-HDXQJD-BJ-13。

宿主：芭蕉。

2.3.10 多孢囊霉属Diversispora sp.1（见图2-20）。

孢子直径约为263 μm，橙色，球形，是具有球囊霉型的孢子，孢壁结构为：一层薄的外壁、层状壁和在Melzer's试剂中不会被染色的韧性内壁，无发芽盾室。

标本号：20140517-WNSM-FJ-08。

宿主：粉蕉。

3 讨论与结论

从研究结果来看，海南不同地区香大蕉根际的菌根真菌种类存在明显差异，其中以海口、澄迈、万宁石梅高速路口、临高加来采集土样中的AMF种类差异最为明显。海口采集的芭蕉根际土样中Gigasporales种类最丰富；澄迈采集回来的土样中，以粉蕉根际土样中的AMF种类最丰富，Glomus为常见属；万宁石梅以粉蕉根际土样中的AMF种类最丰，Acaulospora为常见属；临高加来采回的香蕉根际土样仅筛到Acaulospora的真菌；琼海、儋州光村、昌江、东方、乐东等地采集回来的土样筛到的AMF种类和数量相对较少。在所有采集回来的土壤样品中临高加来的香蕉和粉蕉、昌江十月田的香蕉、东方八所的香蕉和乐东东孔的粉蕉属人工种植，样品中筛到的AMF数量和种类相对较少，表明农事耕作对于AMF真菌的定殖和产孢会产生一定影响；在昌江采集患香蕉枯萎病的粉蕉的土样中仅筛到A. tuberculata。海南香大蕉以Acaulospora为常见属，A. bireticulata、A. tuberculata为常见种，AMF种类更丰富，且不同香大蕉根际土壤中的AMF种类也有一定差别，粉蕉的AMF种类最多，共35种，芭蕉和野芭蕉均为20种，香蕉最少，仅11种，前人研究发现在同一地区，菌根真菌的种类会随宿主、环境耕作栽培等的变化而发生一定程度上的改变[41-42]，此结果在本研究中再一次得到验证。

2008年张科立等[5]对海南儋州、乐东、云龙、感城、兴隆5个香蕉主栽区的香蕉AMF研究发现了Glomus、Paraglomus和Gigaspora共4个属，但未确定到种，与他们的研究相比，本研究初步明确了海南香大蕉的AMF共有9属45种，且调查了海南的14个市县，调查地区更多、更全面，并有4种香大蕉，只是未分离到Paraglomus的孢子；2012年Jefwa等[6]报道肯尼亚50个农场香蕉的AMF有5个属的AMF，其中以Acaulospora孢子密度最大，本研究结果与其研究基本相似，只是未发现Archaespora，多发现了Kuklospora、Dentiscutata、Racocetra、Quatunica 4个属，且确定的种更丰富，同时表明了海南独特的气候条件造就了香大蕉丰富的AMF资源。研究香大蕉根际的AMF资源，可为进一步筛选防治香大蕉土传病害生防真菌提供有用的参考。

参考文献

[1] 农业部发展南亚热带作物办公室组. 中国热带南亚热带果树[M]. 北京： 中国农业出版社， 1998： 48-68.

[2] 柯佑鹏， 过建春， 方 佳， 等. 世界香蕉生产及贸易的发展趋势分析[J]. 世界农业， 2008， 4（348）： 38-39， 67.

[3] 袁 媛， 彭冬燕， 陈升东， 等. 世界香蕉产业形势浅析[J]. 云南农业科技， 2006（2）： 59-61.

[4] 王 彬， 张金政， 刘 新， 等. 丛枝菌根真菌诱导植物信号物质研究进展[J]. 微生物学通报， 2010， 37（2）： 263-268.

[5] 张科立， 刘先宝， 蔡吉苗， 等. 海南香蕉VA菌根形态结构初步观察[J]. 热带农业科学， 2008， 28（5）： 32-35.

[6] Jefwa J M， Kahangi E， Losenge T， et al. Arbuscular mycorrhizal fungi in the rhizosphere of banana and plantain and the growth of tissue culture cultivars[J]. Agriculture， Ecosystems and Environment， 2012（157）： 24-31.

[7] Gaidashova S V， Vanastenc P J A， Jefwad J M， et al. Arbuscular mycorrhizal fungi in the East African Highland banana cropping systems as related to edapho-climatic conditions and management practices： case study of Rwanda[J]. Fungal Ecology， 2010（3）： 225-233.

[8] 李 敏. AM真菌对西瓜抗枯萎病的效应及其机制[D]. 北京： 中国农业大学， 2005

[9] 王倡宪， 李晓林， 宋福强， 等. 两种丛枝菌根真菌对黄瓜苗期枯萎病的防效及根系抗病相关酶活性的影响[J]. 中国生态农业学报， 2012， 20（1）： 53-57.

[10] 刘海清， 方 佳. 中国香蕉产业的国际竞争力研究[J]. 农业现代化研究， 2010， 31（5）： 565-569.

[11] 殷晓飞， 殷晓敏， 金志强， 等. 海南香蕉主要病害种类及防治技术[J]. 农业研究与应用， 2013（145）： 78-82.

[12] 林尧俊， 冯子华. 海南香蕉产业化发展的思路与对策[J]. 华南热带农业大学学报， 1999， 5（2）： 35-36， 65.

[13] 冯 磊. 海南香蕉栽培与果实管理中存在的问题及对策[J]. 农技服务， 2008， 25（8）： 110-111.

[14] 陈业光， 何 凡， 何 舒， 等. 关于海南香蕉产业发展的几点建议[J]. 农业科技通讯， 2008， 7： 17-18.

[15] 柯佑鹏， 过建春， 夏勇开. 2012年海南香蕉产销情况调查报告[J]. 中国热带农业， 2013（51）： 37-40.

[16] 柯佑鹏， 过建春， 夏勇开. 2011年海南省香蕉产业损害监测预警分析报告[J]. 中国热带农业， 2012（45）： 20-22.

[17] 杨志斌， 朱湘林. 海南香蕉产业的现状与前景[J]. 热带农业科学， 2002， 22（6）： 37-43.

[18] Oehl F， Sieverding E， Palenzuela J， et al. Advances in Glomeromycota taxonnmy and classification[J]. IMA Fungus， 2011， 2（2）： 191-199.

[19] 王幼珊， 张淑彬， 张美庆. 中国丛枝菌根真菌资源与种质资源[M]. 北京： 中国农业出版社， 2013： 5-25.

[20] 张美庆， 王幼珊， 王克宁， 等. 我国东南沿海地区的VA菌根真菌Ш无梗囊霉属7个我国新纪录种[J]. 菌物研究， 1998， 17（1）： 15-18.

[21] Goto B T， Moreira M， Tsai S M， et al. Notas sobre Acaulospora bireticulata Rothwell & Trappe e primeiro registro de Acaulospora koskei Blask. para o Brasil[J]. Acta Bot Bras， 2008， 22（2）： 583-587.

[22] 姜 攀. 闽南药用植物丛枝菌根真菌资源及多样性研究[D]. 厦门： 华侨大学， 2012.

[23] 李昕竺. 烟草丛枝菌根真菌（AMF）多样性研究[D]. 雅安： 四川农业大学， 2013.

[24] Zhang Y， Gao Q M， Guo L D. Seven new records of arbuscular mycorrhizal fungi in China[J]. Mycosystema， 2007， 26（2）： 174-178.

[25] Christopher W， Mauritz V， Filiz D， et al. Molecular phylogeny and new taxa in the Archaeosporales（Glomeromycota）： Ambispora fennica gen. sp. nov.， Ambisporaceae fam. nov.， and emendation of Archaeospora and Archaeosporaceae[J]. Mycological ResearchШ， 2007（111）： 137-153.

[26] 侯晓飞. 陕西榆林沙生克隆植物AM真菌生态分布研究[D]. 保定： 河北大学， 2008.

[27] 张美庆， 王幼珊， 黄 磊. 我国北部的八种VA菌根真菌[J]. 菌物研究， 1992， 11（4）： 258-267.

[28] 高秀兵. 海南橡胶树丛枝菌根真菌种类鉴定及其多样性研究[D]. 海口： 海南大学， 2010.

[29] 蔡邦平. 中国梅丛枝菌根真菌多样性研究[D]. 北京： 北京林业大学， 2009.

[30] Dalpe Y， Declerck S. Development of Acaulospora rehmii spore and hyphal swellings under root-organ culture[J]. Mycologia， 2002， 94（5）： 850-855.

[31] Watanarojanaporn N， Boonkerd N， Wongkaew S， et al. Selection of arbuscular mycorrhizal fungi for citrus growth promotion and Phytophthora suppression[J]. Scientia Horticulturae， 2011， 128（4）： 423-433.

[32] Cai B P， Guo L D， Chen J Y， et al. Glomus mume and Kuklospora spinosa： two new species of Glomeromycota from China[J]. Mycotaxon， 2013， 124（1）： 263-268.

[33] Kennedy L J， Stutz J C， Morton J B. Glomus eburneum and G. luteum， two new species of arbuscular mycorrhizal fungi， with emendation of G. spurcum[J]. Mycologia， 1999， 91（6）： 1 083-1 093.

[34] Rodríguez-Morelos V H， Soto-Estrada A， Perez-Moreno J， et al. Arbuscular mycorrhizal fungi associated with the rhizosphere of seedlings and mature trees of Swietenia macrophylla（Magnoliophyta： Meliaceae）in Los Tuxtlas， Veracruz， Mexico[J]. Revista Chilena de Historia Natural， 2014（87）： 9.

[35] 陈 熠. 海南岛常见植物根围巨孢囊霉目（Gagisporales）丛枝菌根真菌物种多样性研究[D]. 海口： 海南大学， 2014.

[36] Diallo A T， Samb P I， Ducousso M. Arbuscular mycorrhizal fungi in the semi-arid areas of Senegal[J]. Eur J Soil Bid， 1999， 35（2）： 65-75.

[37] 王淼焱， 刁志凯， 刘润进. 巨孢囊霉科真菌已知种及其分布特点[J]. 菌物研究， 2004， 2（3）： 6-11.

[38] Neeraj， Mukerji K G， Sharma B C， et al. A new species of Gigaspora from desert soils of Rajasthan， India[J]. World Journal of Microbiology and Biotechnology， 1993， 9： 291-294.

[39] 吴丽莎， 王 玉， 李 敏， 等. 崂山茶区茶树根际丛枝菌根真菌调查[J]. 青岛农业大学学报， 2009， 26（3）： 171-173.

[40] Priyadharsini P， Pandey R R， et al. Arbuscular mycorrhizal and dark septate fungal associations in shallot（Allium cepa L. var. aggregatum）under conventional agriculture[J]. Acta Bot Croat， 2012， 71（1）： 159-175.

[41] 耿晓进. 金银花根围AM真菌遗传多样性季节性变化研究[D]. 保定： 河北大学， 2013.

[42] 张锦娟. 黄棕壤橘园丛枝菌根真菌多样性的研究[D]. 武汉： 华中农业大学， 2010.