骨皮质剥离术联合自体骨髓间充质干细胞移植治疗骨不连的实验研究

刘胜平 (广东省韶关市粤北人民医院骨三科，广东 韶关 512026)

骨折不愈合称之为骨不连。一般来说，骨组织有良好的愈合能力，大多数骨折患者的骨折部位在进行治疗后都会愈合。但人与人之间体质、营养等因素的不同会影响骨折的愈合速度。在所有骨折患者中有约6%的患者愈合及其困难，骨折不愈合使患者活动时有剧烈疼痛感，严重影响生活质量。传统的治疗骨不连的方法是骨皮质剥离术。为临床探寻治疗疾病的新技术，本文在实验兔进行骨皮质剥离术联合自体骨髓间充质干细胞移植试验，特选取25 只实验兔作为研究对象，对其分析后，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料:随机选取25 只实验兔子作为研究对象，其中雌性兔子13 只，雄性兔子12 只，年龄2 ～4 个月，平均3 个月。兔子体重2.5 ～3.5 kg，平均3 kg。试验组13 只兔子，其中雌性兔子7 只，雄性兔子6 只，年龄2 ～4 个月，平均(3.27±0.82)个月;体重2.5 ～3.4 kg，平均(3.11±0.97)kg。对照组12 只兔子，其中雌性兔子6 只，雄性兔子6 只，年龄2 ～4 个月，平均(3.26±0.84)个月;体重2.5 ～3.5 kg，平均(3.09±0.96)kg。这些兔子均有我院动物实验室提供，采用相同饲料喂养，所以兔子活动正常，无感染疾病，适合实验，差异无统计学意义(P ＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法:将25 只实验兔子作为研究对象，并建立骨不连模型，经X 线确定为骨不连。对照组兔子采用传统的骨皮质剥离术的治疗方法。试验组兔子采用骨皮质剥离术联合自体骨髓间充质干细胞移植的治疗方法，在传统的骨皮质剥离术的基础上，将兔子麻醉后置于兔子手术台上固定，制作骨不连模型。在无菌条件下应用18 号骨穿针从股骨远端内侧穿刺抽取骨髓间充质干细胞进行培养，然后进行自体骨髓间充质干细胞移植治疗骨不连。治疗后2、6、10 周反复进行X 线检查(仪器为FCR5000 计算机X 线摄影系统，由日本生产)，扫描后在计算机上精密计算治疗前后骨折间隙的平均宽度及骨缺损区骨痂的生成量。然后将兔子处死，并在兔子死前2 周和死后1 周连续3 d 注射四环素(生产厂家武汉博士德生物工程有限公司)，取骨折间隙组织染色观察患者成骨细胞、骨小梁的数量和排列的形成情况。观察并比较两组兔子的临床疗效。

1.3 疗效评定标准:经过治疗10 周，比较两组兔子骨不连间隙宽度变化和骨不连的愈合情况。骨不连愈合标准:固定物取除后，活动骨折部位无任何疼痛感，无任何并发症。

1.4 统计学处理:统计分析时采用SPSS17.0 软件分析，计量资料以均数±标准差表示，用χ2检验计数资料，用t 检验比较组间，以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组兔子骨不连间隙宽度治疗前后变化情况的比较:经对比观察，试验组采用骨皮质剥离术联合自体骨髓间充质干细胞移植的治疗方法兔子骨不连间隙宽度变化情况明显优于对照组，差异有统计学意义(P ＜0.05)。此外，骨缺损区骨痂形成量与骨不连间隙宽度相符合。见表1。

表1 两组兔子骨不连间隙宽度治疗前后变化情况的比较，mm)

表1 两组兔子骨不连间隙宽度治疗前后变化情况的比较，mm)

注:与对照组比较，①P ＜0.05

组别 例数 治疗前 治疗后试验组 13 5.79±1.96① 9.89±2.74①对照组12 5.84±1.97 7.78±2.12

2.2 两组兔子经治疗后的骨不连愈合情况:经对比观察，试验组患者经过治疗后骨不连的愈合率(100%)明显高于对照组骨不连的愈合率(75.00%)，差异有统计学意义(P ＜0.05)。此外，试验组兔子骨细胞和间充质细胞增生良好，骨小梁数目明显增多。见表2。

表2 两组兔子经治疗后的骨不连愈合情况

3 讨论

经对比观察，试验组采用骨皮质剥离术联合自体骨髓间充质干细胞移植的治疗方法兔子骨不连间隙宽度变化情况明显优于对照组，差异有统计学意义(P ＜0.05)。此外，骨缺损区骨痂形成量与骨不连间隙宽度相符合。骨不连即骨折不愈合，一般情况下，在经过适当治疗后骨折均能痊愈，而对于一少部分患者在骨折后骨折难以愈合，每每活动骨折部位都会有疼痛感，这给患者的日常生活带来很大不便，严重影响生活质量。传统的骨皮质剥离术能够治疗患者骨不连的情况，然而在经骨皮质剥离术后患者的恢复时间长达3 ～12 个月之久。本研究对兔子自体进行自体骨髓间充质干细胞移植术实验，实验证明兔子骨缺损区骨痂形成量与骨不连间隙宽度相对于，应用骨皮质剥离术联合自体骨髓间充质干细胞移植的兔子，骨痂形成更多，促进兔子骨不连愈合［1-3］。随着自体骨髓间充质干细胞移植的日臻完善，给骨不连患者带来了福音。

经骨皮质剥离术联合自体骨髓间充质干细胞移植治疗骨不连后，试验组兔子经过治疗后骨不连的愈合率(100%)明显高于对照组骨不连的愈合率(75.00%)，统计学上有意义(P ＜0.05)。本研究显示，对于实验兔子骨折后骨不连情况的治疗上，传统的骨皮质剥离术在治愈兔子的骨不连方面存在一定的缺陷，治愈率较低，在采用骨皮质剥离术联合自体骨髓间充质干细胞移植来治疗骨不连进行治疗后，弥补了传统方法在治疗上的诸多不足［4-6］。临床有资料显示，伴有较大骨缺损的骨不连患者仅采用骨皮质剥离术是难以痊愈的，这时进行骨皮质剥离术联合自体骨髓间充质干细胞移植是及其必要的。

综上所述，骨皮质剥离术联合自体骨髓间充质干细胞移植治疗骨不连，促进骨缺损区骨痂的形成，提高骨不连愈合率，患者骨不连恢复情况明显优于传统方法，应该在临床上大量应用。

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