血清中结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测在肺结核诊断中的应用价值

辛茶香，陈超

(江西省胸科医院检验科，江西 南 昌330006)

结核病是一种由结核分枝杆菌感染，严重危害人类健康的慢性传染病。对肺结核做出快速准确的诊断一直是临床工作中的一个难点。目前细菌学检查仍是肺结核病诊断的金标准，但传统的涂片抗酸染色敏感性低，分枝杆菌培养时间长(需6~8周)，基因诊断技术的PCR，由于实验条件限制在很多基层单位不适合开展。因此寻找敏感、特异、快速、简便的诊断方法十分重要[1-4]。本文利用胶体金法对活动性肺结核和非结核性肺部疾病患者血清中的结核分枝杆菌IgG/IgM抗体进行了检测，并以临床诊断作为金标准评价该方法的敏感性和特异性。

1 材料与方法

1.1 一般资料 120例活动性肺结核病人均是

2015年1月至2015年4月在我院结核内科住院的患者，其中男86例、女34例，年龄21~73岁，平均39岁，结核病的诊断标准参照文献[5]；40例非结核性肺部疾病患者均是2015年3月在我院肿瘤科和呼吸科住院的患者 (13例肺癌患者、16例COPD、11例急性支气管炎患者)其中男31例，女9例；年龄34~80岁，平均47岁。全部病例的诊断依据为细菌学、病理学、细胞学、胸部X线、生化等指标来确诊。30例健康献血员由江西省血液中心提供。入选病例均留取晨痰和血清标本；健康献血员只留取血清标本。本研究经我院伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。

1.2 试剂 胶体金法检测结核分枝杆菌IgG/IgM抗体试剂由北京健乃喜生物技术有限公司提供，批号：F0211L4G。改良罗氏培养基由我院检验科自配。

1.3 血清结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测 (1)在使用前，将试剂盒和待检样本取出平衡至室温；(2)当准备好测试时，打开密封的铝箔袋取出检测卡平放于水平桌面上；(3)在检测卡上标上患者的样本号；(4)用滴管或加样器从样本管中取2~3滴或60~90μl血清的样本滴加于检测卡上的样本孔内，滴加一滴样本稀释液，并保证操作过程中没有气泡产生；(5)加入样本后10min内判读结果；(6)结果判读：在质控线C出现的前提下，如果只有T1反应线出现，说明抗结核IgM抗体阳性，如果只有T2反应线出现，说明抗结核IgG抗体阳性，如果T1和T2反应线都出现，说明抗结核IgG/IgM抗体都为阳性。如果仅出现一条质控线C，说明没有检测到结核抗体，结果为阴性。

1.4 痰涂片抗酸染色，分枝杆菌培养 操作方法参见《结核病诊断实验室检验规程》[6]。

1.5 统计学处理 对试验计数资料用χ进行分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 120例活动性肺结核病患者中菌阳 (涂阳或培阳)54例，菌阴66例。血清结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测菌阳肺结核的敏感性为79.6%(43/54)，菌阴肺结核的敏感性为69.7%(46/66)；诊断活动性肺结核的总敏感性为74.2%(89/120)，特异性为91.4%(64/70)。120例活动性肺结核病患者中血清结核分枝杆菌IgG/IgM抗体共检出89例阳性，其中IgG抗体84例阳性，IgM抗体5例阳性，未见IgG和IgM抗体同时阳性。见表1。

表1 结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测结果分析

2.2 结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测与细菌学检测结果比较 在120例活动性肺结核患者中，结核分枝杆菌IgG/IgM抗体阳性检出率为74.2%(89/120)，远高于细菌学阳性检出率45.0%(54/120)，χ2=21.2，P<0.005，具有统计学意义。

3 讨论

结核抗体检测从方法可以分为ELISA法、免疫色谱法(DIG-FA)和免疫胶体层析法，而检测的效果主要在于抗原表位的选择及纯化水平。目前结核抗体IgG主要选择使用纯化的结核菌细胞壁多糖，最常用的是结核菌LAM；基因工程表达的结核分枝杆菌特异性抗原、38KDa和16KDa蛋白等[7-11]。本实验用胶体金免疫层析法，检测条中含有胶体金标记的结核抗原和提取自新西兰白兔的IgG，小鼠抗人IgM抗体，所用的结核抗原由重组DNA方法在大肠杆菌表达获得，因此同时可检测血清中结核分枝杆菌IgG/IgM抗体。

本实验活动性肺结核血清中结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测的敏感性为74.2%，特异性为91.4%。其敏感性低于古翠姣等人报道的96.88%[12]。对菌阴活动性肺结核患者结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测的敏感性为69.7%，具有较高的辅助诊断价值。

结核病的发生、发展及转归与机体免疫功能密切相关。结核分枝杆菌再次刺激机体时，机体的浆细胞产生B淋巴细胞，由B淋巴细胞产生免疫球蛋白IgG、IgM抗体[13]，通常的结核抗体只对IgG进行检测，本实验对IgG检测的同时增加了IgM的检测，在实验中120例活动性肺结核血清中结核分枝杆菌IgG抗体84例阳性，IgM抗体5例阳性，因此同时检测患者IgG/IgM抗体可以提高阳性检出率。

40例非结核呼吸疾病患者结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测阳性率为10%(4/40)，30例健康献血员结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测阳性率为6.6%(2/30)，其主要原因是：(1)血清中可能存在抗原抗体复合物，或机体发生混合感染等，造成结核抗体检测的交叉反应；(2)全国有近半的人口感染了结核杆菌[14，15]，不排除受试者感染结核杆菌引起血液中结核抗体存在的可能。

综上所述，利用胶体金法检测结核分枝杆菌IgG/IgM抗体对肺结核的诊断具有快速、方便、简单，较好的敏感性和特异性等特点。

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