新布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征的危险因素分析

尤爱国，杨建华，唐晓燕，许汴利，康 锴，杜燕华，黄学勇

新布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征的危险因素分析

尤爱国1，杨建华2，唐晓燕1，许汴利1，康 锴1，杜燕华1，黄学勇1

目的 探讨新布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征发病的危险因素。方法 采用1∶2配对的病例-对照研究，对40例病例和80例对照进行问卷调查，同时采集患者血清标本，应用荧光RT-PCR和IgM、IgG抗体试剂盒检测新布尼亚病毒核酸及抗体。采用条件Logistic回归分析发病的危险因素。结果 病例组农民占90.00%(36/40)，显著高于对照组62.50%(50/80)(P<0.01)。病例组暴露于养狗、养猫、养牛、家禽养殖、生活区周围有蜱、病前1月被蜱叮咬、从事田间作业、工作区及住宅周围有杂草灌木的风险显著高于对照组(OR值均大于1，P值均小于0.05)。多因素分析表明，在调整了性别、年龄、民族和职业因素后，生活区周围有蜱(OR=5.44,P<0.01)是新布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征发病的危险因素。结论 不同形式的蜱暴露为新布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征的危险因素。

发热伴血小板减少综合征；新布尼亚病毒；危险因素；病例-对照研究

CenterforDiseaseControlandPrevention,Zhengzhou450016,China;2.DepartmentofImmunization,ChengdongluCommunityHealthServiceCenter,Zhengzhou450004,China)

2007年以来，河南省采取主动搜索和通过专项监测系统在信阳、南阳地区发现一些以发热伴血小板、白细胞减少为特征的不明原因病例，继之湖北、山东、江苏等毗邻省份亦发现有类似病例，后命名为发热伴血小板减少综合征(也称发热伴血小板、白细胞减少综合征)。经实验室检测确认，少数病例发现有无形体感染的证据，多数病例标本发现一种新的病毒—新布尼亚病毒[1-2]。该病病死率高，严重威胁人民的健康和生命，受到群众与媒体的广泛关注。目前，已初步描述了该病的临床与流行病学分布特征[1,3]。为了解新布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征的传播途径及发病危险因素，特于2011年4-10月在信阳市开展了调查，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 调查对象 病例和对照均来自信阳市有代表性的3家县级以上综合医院。该研究已获得河南省疾病预防控制中心伦理委员会批准和研究对象的知情同意。病例诊断标准参照《发热伴血小板减少综合征防治指南》[4]。对照选择标准为与病例同性别、年龄相差不超过5岁，且与病例在同一病区，血清学IgG检测阴性的对象。按照1∶2比例选择对照。

1.2 方法与内容 采用《发热伴血小板减少综合征危险因素调查表》，由经过培训的调查员通过面对面询问方式收集相关信息，同时采集患者血液标本进行实验室检测。调查内容包括研究对象的一般情况(年龄、性别、民族、住址、职业、联系方式等)、家庭居住环境(家庭居住位置、环境、家禽及家畜饲养情况等)、暴露史(发病前1月内劳动、旅行史、蜱叮咬史、与类似病例接触情况等)、宿主媒介调查(病例居住地和生产活动周围环境的动物种类、媒介等)。

1.3 实验室检测

1.3.1 荧光RT-PCR进行核酸检测 无菌操作采取病人急性期静脉血于无抗凝剂采血管内，室温或4 ℃静置使血凝固，离心后，取140 μL血清，应用RNA提取试剂盒(QIAamp Viral RNA Mini Kit，QIAGEN 52904)提取RNA。使用本实验室设计的新型布尼亚病毒特异性引物和探针，以及一步法荧光PCR试剂盒(QIAGEN QuantiTectTM Probe RT-PCR Kit catalog #204443)进行扩增，反应条件50 ℃ 30 min 1 cycle；95 ℃15 min 1 cycle；95 ℃ 15 s，60 ℃ 45 s* 40 cycles(*为荧光信号采集步骤)。检测结果Ct值<35为阳性，>40为阴性，在35～40之间为可疑样品，需重复检测。

1.3.2 IgM、IgG抗体检测 应用北京万泰生物药业股份有限公司(京药监械生产许20040097号)生产的HB29-IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫法)，HB29-IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)和新布尼亚病毒抗原片(本实验室制备)检测病例和对照血液中相应的抗体。样品A值≥临界值者为抗体反应阳性，<临界值者为抗体反应阴性。

1.4 质量控制 对调查员进行培训，培训合格方可进行问卷调查。调查结束后，及时对问卷进行审核，填写漏缺项。调查资料经双录入，并进行一致性检验。

2 结 果

2.1 研究对象的基本特征 本次共调查40例病例和80例对照。病例组与对照组在民族构成方面差异无统计学意义，两者在职业构成方面差异有统计学意义(P<0.05)。研究对象的基本特征详见表1。

表1 研究对象的基本特征

2.2 单因素分析 病例组在养狗、养猫、养牛、家禽养殖、生活区周围有蜱、病前1月被蜱叮咬、从事田间作业、工作区及住宅周围有杂草灌木方面的比例显著高于对照组，差异有统计学意义。不同组别危险因素暴露情况见表2。

表2 不同组别危险因素暴露情况比较

表2(续)

注：# 为连续性校正卡方

Note: # means continuity corrected chi-square.

2.3 多因素分析 在单因素分析的基础上进行多因素分析，挑选单因素分析有意义的变量为筛选变量，进行多因素分析。入选与排除标准分别为：sle=0.05，sls=0.05。新布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征的危险因素与赋值情况如下：是否患发热伴血小板减少综合征(1=是，0=否)、性别(1=男，0=女)、年龄(数值变量)、民族(1=汉、0=其他)、职业(1=农民、0=其他)、养狗(1=是，0=否)、养猫(1=是，0=否)、养牛(1=是，0=否)、饲养家禽(1=是，0=否)、生活区周围有无见过蜱(1=有，0=无)、病前1月被蜱叮咬(1=是，0=否)、从事田间作业(1=是，0=否)、工作区周围有无杂草灌木(1=有，0=无)和住宅周围杂草灌木生长(1=有，0=无)。

在调整了性别、年龄、民族和职业因素后，生活区周围有蜱(OR=5.44,95%CI：1.71～17.37)为新布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征的危险因素。多因素分析结果详见表3。

表3 发热伴血小板减少综合征发病危险因素的多因素Logistic回归分析

3 讨 论

发热伴血小板减少综合征是一类新发传染病，其病原有新布尼亚病毒[1]，也不排除其他病原体感染的可能[5]。患者的临床表现相似，急性起病，发热、全身不适、乏力、头痛、肌肉酸痛，以及恶心、呕吐、厌食、腹泻等；重症病例可出现皮肤瘀斑、出血、多脏器损伤、弥漫性血管内凝血等[1, 6]。该病需经实验室检测方可确诊病原，因此在临床上极易被误诊为流行性出血热等疾病[7]。国内一些省份起初是按无形体病感染或疑似无形体感染进行报告的[8-9]。该病多发于夏、秋季，人群普遍易感，在丘陵、山地、森林等地区生活、生产的居民和劳动者以及赴该类地区户外活动的旅游者感染风险较高。

该研究结果显示，病例组在养狗、养猫、养牛及家禽养殖方面的比例显著高于对照组，差异有统计学意义，提示家养动物(如猪、牛、狗及家禽等)可能是该病的贮存宿主。家养动物的喂养方式对病例发病具有一定的影响，放养较圈养具有更高的发病风险[10]。病例组和对照组在家中是否有老鼠、是否捕鼠、是否接触死鼠及野生动物方面构成差异无统计学意义，提示家鼠和野生动物可能不是该病的贮存宿主。

有研究表明，新布尼亚病毒感染所致发热伴血小板减少综合征的急性期病人及尸体血液和血性分泌物具有传染性，直接接触病人血液或血性分泌物可导致感染[11-13]。该研究单因素分析显示，病例组和对照组在亲戚或邻居发病、是否接触发病亲戚或邻居及近1个月外出方面差异无统计学意义，可能是由于样本量太小，未能发现二者之间的差异，尚需进一步研究。

该病传播途径尚不完全明确，发病也可能与蜱叮咬有关。该研究单因素和多因素分析结果均表明，生活区周围有蜱是新布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征的危险因素，与Fan Ding等人研究结果一致[14]，提示蜱很可能为该病的传播媒介，蜱叮咬有可能是该病的另外一种传播途径。

为有效防控新布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征，减少该病的发生，应做好疾病监测工作，防止聚集性病例及暴发疫情发生；在高发区高危人群中开展发热伴血小板减少综合征防病知识宣传，使当地群众掌握该病防治及预防蜱叮咬的知识；大力开展爱国卫生运动，进行环境整治，并采取措施灭蜱，以降低生产、生活环境中的蜱密度。

(本调查得到信阳市疾病预防控制中心、信阳市154医院、商城县疾病预防控制中心、商城县人民医院、平桥区疾病预防控制中心、光山县疾病控制中心和光山县人民医院的大力支持与参与，特此感谢)。

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You Ai-guo, Email: youaiguo11@126.com

Risk factors of severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS) infected by SFTSV

YOU Ai-guo1,YANG Jian-hua2,TANG Xiao-yan1,XU Bian-li1,KANG Kai1,DU Yan-hua1,HUANG Xue-yong1

(1.InstituteforInfectiousDiseaseControlandPrevention,HenanProvincial

To explore the risk factors of severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS) infected by severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus (SFTSV), 1∶2 matched case-control study was used in this study. Questionnaires and serum were collected from 40 cases and 80 controls. SFTSV was tested using fluorescent RT-PCR and antibody reagent kits. The risk factors of SFTS were selected by conditional logistic regression. The proportion of farmers in case group was 90.00% (36/40) and significantly higher than that in control group (50/80),Pvalue was less than 0.05. The risk of exposure to dog, cat, cattle, poultry, living areas surround by ticks, tick bites, engaging in the field work, work and living areas surrounded by weeds and shrubs in case group was higher than that in control group, all odd ratios were more than 1.00 andPvalues were less than 0.05. Multi-factors analysis showed that, after adjusted for gender, age, nations and occupations, presence of ticks in living area (OR=5.44,P<0.01) was the risk factor of SFTS. The exposure to ticks may be the risk factor of SFTS.

severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS); severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus (SFTSV); risk factors; case-control study

10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.08.004

尤爱国，Email: youaiguo11@126.com

河南省疾病预防控制中心，郑州 450016

Funded by the Medical Science Research Projects in Henan Province (No. 201203158)

R373

A

1002-2694(2015)08-0704-05

2014-11-06；

2015-03-23

河南省医学科技攻关项目(No. 201203158)资助