尿PCA3评分在前列腺癌的诊断意义分析

王亮 周明伟

尿PCA3评分在前列腺癌的诊断意义分析

王亮 周明伟

目的 探讨尿前列腺癌基因3(PCA3)评分在前列腺癌的诊断意义。方法 选取前列腺直肠指诊异常的受检者82例作为观察组, 另选取30例同期健康查体者作为对照组。检测两组尿液中前列腺特异抗原(PSA)和PCA3 mRNA的表达并计算尿PCA3评分, 观察组均行超声引导下穿刺检查确定前列腺癌发生情况, 并采用ROC曲线分析尿PCA3评分诊断前列腺癌的准确性。结果 观察组的尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分分别为(490.12±373.42)、(62.52±54.16)和(159.85±118.78)分,高于对照组的(352.42±326.62)、(4.21±4.03)和(11.95±6.25)分, 差异有统计学意义(P＜0.05)。观察组确诊为良性前列腺增生、前列腺癌的患者比例分别为43.90%和56.10%, 前列腺癌患者尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3, 差异有统计学意义(P＜0.05), 而良性前列腺增生患者和对照组尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分比较, 差异均无统计学意义(P＞0.05)。尿PCA3评分经ROC曲线分析, 其ROC-AUC=0.893［95%CI(0.834, 0.942)］, 本研究中以截断值65为前列腺癌诊断的临界值时截断值以上有41例前列腺癌患者, 敏感性为89.13%, 截断值以下63例良性前列腺增生患者和健康人群, 特异性为95.45%, 阳性预测值和阴性预测值分别为93.18%和92.65%, 尿PCA3评分诊断前列腺癌发生的价值良好。结论 尿PCA3评分在前列腺癌患者中的水平较高且其截断值为65时诊断前列腺癌可获得较高的诊断价值, 因此尿PCA3评分可能作为前列腺癌诊断的参考指标之一。

尿前列腺癌基因3评分；前列腺癌；诊断

近年来随着生活方式的改变和人口老龄化的加剧, 各类癌症的发生率逐渐上升。作为老年男性常见肿瘤疾病, 前列腺癌指的是在前列腺发生的上皮性恶性肿瘤, 患者早期常无临床症状, 前列腺癌肿瘤逐渐增大可导致排尿困难、血尿、阳痿等症状的出现, 临床常采取直肠指诊、血清PSA、经直肠前列腺超声和盆腔MRI检查等, 但其早期检出率低, 患者长常无法得到早期诊治［1］。且直肠指诊、血清PSA、经直肠前列腺超声和盆腔MRI等检查对于前列腺癌均非特异性, 前列腺增生等均可出现四种检查结果的异常。超声引导下穿刺活检作为前列腺癌检查的金标准, 虽可较准确地检出前列腺癌, 但其侵入性给患者带来的创伤和痛楚较大。寻找无创有效的前列腺癌诊断方法对前列腺癌的早期诊治和预后改善均具有重要意义。PCA3是近年来发现的特异地表达于前列腺癌细胞的基因, 且其表达水平可随患者前列腺癌的发展而变化［2］。然而目前国内外关于尿PCA3 mRNA水平和PCA3评分在前列腺癌诊断中的研究报道甚少。本研究分析前列腺癌患者、良性前列腺增生患者和健康人群PSA mRNA、PCA3 mRNA水平和PCA3评分的水平及其PCA3评分对前列腺癌的诊断价值, 为前列腺癌的早期诊断和治疗提供依据, 结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年1月～2013年1月本院前列腺直肠指诊异常的患者82例作为观察组。纳入标准：患者均为前列腺直肠指诊异常患者且知情同意；排除标准：排除合并心肝肺肾等器官功能障碍患者和因各类原因无法配合实验检查完成的患者。另选取30例同期健康查体者作为对照组。实验经医院伦理委员会审核批准且入选者均已签署知情同意书。观察组年龄35～81岁, 平均年龄(69.54±6.88)岁, 体质量指数(BMI)19.4～33.8 kg/m2, 平均BMI(23.62±2.78)kg/m2。对照组年龄33～85岁, 平均年龄(70.28±67.59)岁, BMI 18.9～33.2 kg/m2, 平均BMI(23.16±3.24)kg/m2。两组研究对象年龄、BMI等一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。

1.2 检测方法 采用PCR定量分析法检测观察组和对照组尿PSA mRNA、PCA3 mRNA表达水平并计算PCA3评分。具体如下：受检者均采用传统指诊, 触及前列腺后从左右两侧向中央用力按摩3次, 再从前列腺顶部向中央按摩3次,嘱患者排尿时收集尿液约50 ml并置于冰水中冷却。将尿液标本以3500 r/min离心约10 min后取尿沉渣保存待测。根据TaKaRa一步法提取RNA后采用微量分光光度计测定其RNA的浓度及纯度后用于定量PCR反应。根据TaKaRa ExScript TM RT-PCR Kit说明书进行逆转录并制备cDNA、PCA3、PSA和内参β-actin的荧光定量PCR标准曲线。采用扩增仪进行反应并制作溶解曲线和确定增产的特异性。扩增采用20 µl反应体系并于预冷的RNase free 反应管中添加cDNA 2 µl、primer-F 1 µl、2 µM primer-R 1 µl、2×Easy-Taq PCR SuperMix 10 µl、10×SR Green 10.5 µl及ddH2O 1.3 µl, 扩张反应具体如下：于95℃环境中预变性10 min, 95℃环境中变性15 s, 60℃环境中退火30 s, 72℃环境中延伸15 s, 如此循环40次后于72℃环境中延伸10 min并将PCR产物于-20℃恒温箱中保存待查。分析溶解曲线并通过检测的Ct值表示各基因的mRNA表达量。此外观察组均行超声引导下穿刺检查确定前列腺癌发生情况。

1.3 治疗方法 确诊为前列腺癌患者均接受相应的抗癌治疗, 确诊为良性前列腺增生患者亦接受相应的治疗。

1.4 评价方法 PCA3评分：PCA3评分=(PCA3 mRNA/PSA mRNA)×1000。

1.5 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验；多组计量资料比较采用方差分析, 进一步两两比较采用q检验；尿PCA3评分在前列腺癌诊断中的应用价值分析采用受试者操作特性曲线(ROC)。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分比较 与对照组比较, 观察组尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分均升高, 差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

2.2 不同超声引导下穿刺检查结果的患者及对照组尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分比较 82例受检者超声引导下穿刺检查结果显示良性前列腺增生、前列腺癌的患者例数分别为36例和46例, 分别作为良性前列腺增生组、前列腺癌组。良性前列腺增生、前列腺癌的患者比例分别为43.90%(36/82)和56.10%(46/82)。前列腺癌患者尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分均高于良性前列腺增生患者和对照组, 差异有统计学意义(P＜0.05), 而良性前列腺增生患者和对照组尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)。见表2, 图1。

表1 两组尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分比较( x-±s)

表2 不同超声引导下穿刺检查结果患者及对照组尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分比较( x-±s)

2.3 PCA3评分在前列腺癌诊断中的应用价值的ROC曲线分析 ROC曲线分析结果显示, PCA3评分截断值65为前列腺癌诊断的临界值时预测甲状腺癌的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值均较高, 尿PCA3评分截断值65时诊断前列腺癌发生的价值良好且优于传统中截断值为35时诊断前列腺癌发生的价值。见表3, 图1。

表3 不同PCA3评分截断值在前列腺癌诊断中的应用价值比较

图1 PCA3评分和PSA在前列腺癌诊断中的应用价值比较

3 讨论

前列腺 癌是老年男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤疾病之一, 其发病率较高, 约占男性恶性肿瘤的1/4, 且其病死率约占男性恶性肿瘤的1/10。近年来随着我国老龄化的加快及饮食结构和生活方式的改变, 前列腺癌在我国男性中的发病率逐渐上升。前列腺癌发病早期无特异性的临床症状, 部分患者甚至无任何临床表现, 而部分患者出现临床表现并确诊时可能已发生局部浸润或骨骼、淋巴结等远处转移, 患者往往预后不良。因此对前列腺癌的早期诊治具有重要意义。传统影像学检查、血清学检查及穿刺活检等前列腺癌辅助诊断方法存在准确性较低、特异性偏低或创伤较大等不足, 在前列腺癌早期诊断中的应用效果不佳。寻找有效且无创的前列腺癌辅助诊断方法对前列腺癌的早期诊治具有重要意义。PCA3作为新发现的前列腺癌特异性标记物,可在人类前列腺癌细胞中特异性表达, 因此可能用于前列腺癌的诊断中［3］。目前关于PCA3基因的表达研究报道发现其在前列腺癌中表达水平较高, 正常前列腺中的表达水平较低, 而在其他组织或肿瘤标本中不表达［4］。然而目前国内外关于前列腺癌患者尿中PCA3基因的表达和PCA3评分及其在前列腺癌诊断中的应用研究报道较少, 明确尿PCA3评分在前列腺癌诊断中的应用价值可为前列腺癌的早期无创诊断提供依据。

本研究结果显示, 尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分在肛门指诊出现前列腺肿块患者中的水平均较高且均高于正常健康人群。而出现前列腺癌患者的尿PSA mRNA、PCA3 mRNA及PCA3评分明显高于良性前列腺增生患者和健康人群, 这与PCA3基因在前列腺癌中高表达和在非前列腺癌患者和健康人群中表达水平较低的理论一致。超声引导下穿刺检查结果发现直肠指诊出现前列腺肿块的男性前列腺癌的发病率较高, ＞50%的直肠指诊出现前列腺肿块患者为前列腺癌, 因此老年男性应定期行前列腺检查以及早发现前列腺肿块的发生, 并及时进一步确定前列腺癌症的发生以达到前列腺癌早发现和早治疗的目的。前列腺癌患者尿PCA3 mRNA特异性表达提示PCA3相关指标可能用于前列腺癌的预测。尿PCA3评分可通过尿PCA3和PSA在尿中的基因表达水平的比值反映患者前列腺发病情况, ROC曲线分析结果显示, 不同尿PCA3评分截断值诊断前列腺癌的灵敏度和特异度等不一, 其中以65为尿PCA3评分截断值时可取得同时取得较高的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值, 对前列腺癌诊断的价值最优, 优于传统以35为PCA3评分截断值对前列腺癌诊断的价值。因此尿PCA3评分可能用于前列腺癌的辅助诊断, 而出现尿PCA3评分的老年男性需进一步确诊其前列腺癌的发生情况以早期干预并改善患者预后。由于本研究样本量偏小且尿PSA、PCA3评分等亦可受患者前列腺良性病变等的影响, 因此明确尿PCA3评分诊断前列腺腺癌的价值需更大样本量的全面深入研究。

综上所述, 前列腺癌患者尿PCA3评分较高且对前列腺癌诊断具有一定价值, 当其截断值为65时诊断前列腺癌可获得较高的诊断价值, 因此尿PCA3评分可能作为前列腺癌诊断的参考指标之一。

［1］ 李世杰, 王鑫坤, 王佳, 等.高b值DWI对前列腺癌和前列腺炎的鉴别诊断价值.中国医学影像学杂志, 2012(12):887-889.

［2］ 高建军, 韩瑞发.尿液前列腺癌基因3检测诊断前列腺癌的Meta分析.中国全科医学, 2013, 16(5):483-486.

［3］ Kovács GL. New challenges and earlier approved methods in the laboratory diagnosis of prostate cancer. Magy Onkol, 2014, 58(4): 301-309.

［4］ 曹达龙, 叶定伟, 张世林, 等.前列腺癌特异抗原3对前列腺癌LNCaP细胞增殖的影响.中国癌症杂志, 2012, 22(2):135-138.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.23.053

2015-04-23］

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