地胆草水提物抗炎镇痛作用的动物实验研究

温先敏，杨缅南，胡田魁

(云南名扬药业有限公司，云南 昆明 650200)

地胆草水提物抗炎镇痛作用的动物实验研究

温先敏，杨缅南，胡田魁

(云南名扬药业有限公司，云南 昆明 650200)

目的 观察地胆草(ElephantopusSaber Linn)水提物的抗炎镇痛药理作用。方法 采用大鼠足趾肿胀实验、大鼠毛细血管通透实验、热板法及小鼠冰醋酸扭体法。结果 地胆草水提物抗炎实验表明，中、高剂量地胆草水提物能抑制由角叉菜胶溶液引起的大鼠足趾肿胀(P<0.05)和显著减少二甲苯致小鼠腹部皮肤毛细血管通透性(P<0.05，P<0.01)，显示出良好的抗炎作用；地胆草水提物镇痛实验表明，高剂量地胆草水提物能显著增加热板法试验小鼠的痛阈值(P<0.05)和减轻醋酸所致小鼠扭体次数(P<0.05，，P<0.01)，显示出较强的镇痛作用。结论 地胆草水提物具有较强的抗炎镇痛作用。

地胆草；抗炎；镇痛

目前，临床上对急、慢性疼痛多采取以西药治疗为主，这类镇痛药虽然镇痛效果肯定，但长期应用会产生诸如中枢神经系统等消化系统、造血系统方面的不良反应，特别是存在严重成瘾性及药物依赖性等问题。因此，西药镇痛药在临床应用上受到严格限制。本公司在中药民族药开发筛选中，发现单株植物地胆草具有极好的止痛作用，民间临床应用未见毒副作用和成瘾性，现将其抗炎镇痛的动物实验报道如下。

1 材料与方法

1.1 药物及试剂 地胆草水提物(地胆草药材加8倍量自来水，煎煮2次，每次煎煮1.5 h，过滤，滤液合并，浓缩至稠膏，放入烘箱中于65℃干燥即得。)，批号130501，由云南名扬药业有限公司提供；阳性对照药罗通定片，规格60 mg/片，20120723，由广州市香雪制药股份有限公司生产；组胺，中科院上海生化所东风生化技术公司；角叉菜胶，美国Sigma公司生产；伊文思蓝，德国Serva公司生产。

1.2 动物 昆明种小鼠100只，SPF级，雌雄兼用，体重(20±2.0)g；SD大鼠100只，雄性，体重(190±10.0)g。上述2种动物均购自昆明医科大学实验动物中心。

1.3 仪器 BP110S分析天平(德国sartorius)；YLS-6B足趾容积测量仪(淮北正华生物仪器设备有限公司)；HH-600电热恒温水浴锅(金坛市大地自动化仪器厂)；TDL-40B离心机(上海安亭科学仪器厂)；UV-4802S紫外可见分光光度计(上海尤尼科仪器有限公司)；YLS-6B智能热板仪(济南益延科技公司)；

2 地胆草水提物的抗炎作用

2.1 角叉菜胶足趾肿胀实验 取SD大鼠50只，随机分为5组，每组10只，空白对照组给予理盐水，阳性对照组给予罗通定片(0.06 g/kg)，试验组给予地胆草水提物(0.45，1.36，4.08 g/kg)，每天灌胃给药1次，连续3 d，最后1次给药后1h，分别于大鼠右后足趾腱膜下注射角叉菜胶0.1ml/只致炎，于注射后1、2、3 h分别测定各鼠右后足趾容积，比较各组大鼠给药后不同时间右后足趾肿胀度及抑制率。足趾肿胀度(mL)=致炎后足容积-致炎前足容积；足趾肿胀抑制率(%)=(空白对照组肿胀度-给药组肿胀度)/空白对照组肿胀度×100%。

2.2 大鼠毛细血管通透性实验[1]分组及给药同试验同“2.1”。给药倒数第2 d将大鼠腹部毛除尽，末次给药1h后，于大鼠腹部皮下注射1 mg/mL组胺0.2 mL，立即在尾静脉注射1%伊文思蓝4 mL/kg体重，20 min后断头处死动物，将着色皮肤剥离，剪下蓝斑，剪碎，放入5 mL丙酮与生理盐水(7︰3)混合液中浸泡2 h，放置于65℃电热恒温水浴锅中孵育36 h，直至皮肤蓝色完全消失，再用离心机离心10 min，取上清液，于610 nm处测定吸光度(OD值)。

3 地胆草水提物的镇痛作用

3.1 醋酸扭体实验[2-3]取健康昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，空白对照组给予理盐水，阳性对照组给予罗通定片(0.06 g/kg)，试验组给予地胆草水提物(0.45，1.36，4.08 g/kg)，每天灌胃给药1次，连续3 d，末次给药后1 h，腹腔注射0.5%冰醋酸(10 mL/kg)(醋酸溶液临用前配制)，观察10 min内各组小鼠出现扭体反应的次数。扭体：腹部内凹，后肢伸展、臀部抬高。

3.2 热板法[2-3]取雌性小鼠，放入(55 ± 0.5)℃热板测痛仪中，每次放1只在热板上，检测痛阈，5s内出现舔足者、30s不出现舔足者或跳跃者弃之不用。重复测1次，将两次痛阈的平均值作为该鼠给药前的痛阈值。选取在5～30s有痛域反应的合格小鼠50只，随机分为5组，空白对照组给予理盐水，阳性对照组给予罗通定片(0.06 g/kg)，试验组给予地胆草水提物(0.45，1.36，4.08 g/kg)，每天灌胃给药1次，连续3 d，末次给药后30、60、90 min分别测定痛阈值。如60 sec无反应，将小鼠取出，以免烫伤，其痛阈值以60 sec计算。

4 统计方法

5 实验结果

5.1 地胆草水提物对角叉菜胶足趾肿胀的影响 地胆草水提物中、高剂量组、阳性对照组(罗通定片)均能明显抑制大鼠角叉菜胶所引起的足趾肿胀程度，与空白对照组比较均有显著性统计学差异(P<0.05)。结果表明地胆草水提物具有一定程度的抗炎活性。见表1。

表1 地胆草水提物对角叉菜胶足趾肿胀的影响±s,n=10)

注：与空白组比较，*P<0.05

5.2 地胆草水提物对大鼠毛细血管通透性的影响 地胆草水提物中、高剂量组和阳性对照组(罗通定片)能显著降低大鼠毛细血管通透性(P<0.05)，具有明显的抗炎作用。见表2。

表2 地胆草水提物对大鼠毛细血管通透性的影响±s,n=10)

注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.05

5.3 地胆草水提物对小鼠醋酸扭体反应的影响 地胆草水提物中、高剂量组和阳性对照组(罗通定片)可明显减少醋酸所致小鼠扭体次数，与空白对照组比较有统计学差异(P<0.05)。结果表明地胆草水提物对醋酸腹腔注射所致的小鼠内脏疼痛有抑制作用。见表3。

表3 地胆草水提物对醋酸致小鼠疼痛(扭体)的影响±s,n=10)

注：与空白组比较*P<0.05

5.4 地胆草水提物对小鼠热板镇痛的影响 地胆草水提物高剂量组及阳性对照组(罗通定片)能明显延迟小鼠舔后足时间，提高小鼠痛域值，与空白对照组比较有统计学差异(P<0.05)；地胆草水提物中、低剂量组无显著性差异。结果表明地胆草水提物对热致痛具有镇痛作用。见表4。

表4 地胆草水提物对小鼠热板镇痛的影响±s,n=10)

注：与同时间点空白组比较，*P<0.05，**P<0.05

6 讨论

地胆草(Elephantopusscaber Linn)为菊科地胆草属植物，产于浙江、福建、云南、贵州等地，云南省地胆草主产区为文山州[4]。该属约有30余种，多集中分布于新热带地区，我国仅有2种，即地胆草和白花地胆草[5]。地胆草又名地胆头、苦地胆，全株可入药，民间认为地胆草具有清热、凉血、利尿的功效，主治感冒、鼻衄、黄疸、肠胃炎、咽喉炎、肾、湿疹、疔疮、蛇虫咬伤。本公司科研小组对地胆草水提物的镇痛抗炎作用进行了动物实验研究，实验结果显示其具有良好的镇痛抗炎作用，为地胆草的进一步开发和临床应用提供了一定的药理学依据。地胆草现用的为水提物，其它如醇提物等是否有效或更有效值得进一步研究。

地胆草主要化学成分为倍半萜内酯类、三萜类，还含有有机酸、黄酮、炔烯类等化合物。其镇痛作用可能是通过调节中枢神经系统功能而实现的，但具体机制有待进一步深入研究。通过对其水溶性及脂溶性成份的研究，发现水溶性组份具有较好的镇痛效果。初步掌握了具有镇痛作用的组份和化学物，为新药的研发奠定了基础。

[1]陈奇，沈映君，刘青云，等.中药药理学试验[M].上海：上海科学技术出版社，2001：24.

[2]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，2006：366-367.

[3]李才.人类疾病动物模型的复制[M].北京：人民卫生出版社，2008：418-420.

[4]云南省药物研究所.《云南主要天然药物》光盘.

[5]陈艺林.中国植物志[M].北京：科学出版社，1985：43-47.

温先敏(1958-),男,山西人，博士，研究方向：天然药物的研究。

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1007-2349(2015)12-0071-02

2015-09-14)