紫外-可见分光光度法测定肝速康片中齐墩果酸含量
2015-04-26马春梅
马春梅,王 娟
(徐州生物工程职业技术学院,江苏 徐州 221006)
紫外-可见分光光度法测定肝速康片中齐墩果酸含量
马春梅,王 娟
(徐州生物工程职业技术学院,江苏 徐州 221006)
目的:建立肝速康片中齐墩果酸含量的测定方法。方法:以齐墩果酸为标准品,采用紫外-可见分光光度法,检测波长为548nm,测定肝速康片中齐墩果酸的含量。结果:齐墩果酸的标准曲线方程为y=0.045 1x+0.013 6,线性相关系数r=0.999 7,结果表明齐墩果酸在3.36~16.8μg·mL-1浓度范围内与其吸收值呈良好的线性关系;该测定方法的平均回收率和RSD分别为98.04%和1.37%。结论:该方法精密度、重现性、稳定性均良好,可满足肝速康片质量控制的要求,可用于齐墩果酸含量的测定。
紫外-可见分光光度法;齐墩果酸;肝速康片
肝速康片由齐墩果酸和云芝多糖组成,其味涩、微苦,齐墩果酸为其主要有效成分,临床主要用于急慢性、迁延性肝炎的治疗[1]。齐墩果酸为五环三萜类化合物,主要从青叶胆、女贞子等天然药物中提取而来。药理学研究表明,其具有护肝、抗炎、强心、利尿、抗肿瘤、促进肝细胞再生、抑制肝纤维增生、降低谷丙转氨酶活性等作用[2]。由于齐墩果酸是肝速康片的主要有效成分,其含量多少决定着肝速康片是否符合质量标准。本研究采用紫外-分光光度法测定肝速康片中齐墩果酸的含量,现报道如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器
紫外-可见分光光度计(北京普析UV-T6)。
1.2 试药
齐墩果酸(中国食品药品检定研究院,批号:201206);肝速康片(本校实验室自制); 香草醛(分析级)、冰醋酸(分析级)、氯仿(分析级),水为重蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 标准曲线制备
于105℃下对齐墩果酸对照品进行充分干燥,精密称定10.1mg,用少量甲醇溶液溶解后转移至10mL容量瓶中,再用甲醇稀释至刻度,摇匀使其完全溶解,配制成浓度为1.01mg/mL的对照品溶液备用。
分别精密量取浓度为1.01mg/mL的齐墩果酸对照品溶液0、80、160、240、320、400μL,置于干燥洁净的试管中,放置室温下完全挥尽溶剂后,于每支试管中加入高氯酸溶液3.2mL、 5%香草醛-冰醋酸溶液,置于70℃水浴上加热15min,自然放冷后,加入冰醋酸20mL,摇匀。参照《中国药典》(2010)附录中的分光光度法试验要求,于548nm波长处测定不同浓度对照品溶液的吸光度,并进行空白试验。以齐墩果酸的不同浓度为横坐标,吸收度A为纵坐标,绘制其标准曲线。得到标准曲线方程为y=0.045 1x+0.013 6,相关系数为r=0.999 7,表明齐墩果酸在3.36~16.8μg·mL-1浓度范围内与吸收值呈良好的线性关系。
2.2 含量测定方法[3]
取3批肝速康片,每批20片,研成细粉后,精密称取相当于10mg齐墩果酸的细粉约0.13g,加入20mL氯仿充分溶解后超声15min,室温放置冷却后,用滤纸滤过,收集残渣,再用10mL氯仿洗涤3次。将滤液与洗涤液混合均匀后置于水浴上蒸干,加入5mL甲醇溶液,于水浴上加热并充分溶解,室温放冷后转移至10mL容量瓶中,再加入甲醇溶液至刻度,混匀。精密吸取上述溶液60μL,按照对照品溶液配制方法,自“置于干燥洁净的试管”起同法测定其吸收度,记录实验结果,计算齐墩果酸含量。结果见表1。
表1 样品齐墩果酸含量测定结果
2.3 精密度试验
取肝速康片粉末约0.13g,精密称定,按照“2.2”项下方法制备供试品溶液,在相同条件下连续测定5次,记录实验结果。计算得到RSD为0.36%,表明该方法精密度良好。结果见表2。
表2 精密度试验结果
2.4 重复性试验
取肝速康片细粉6份,精密称定,按照“2.2”项下方法制备供试品溶液,在相同条件下采用紫外-分光光度法测定吸收度,并计算齐墩果酸含量,结果表明肝速康片中齐墩果酸平均含量为18.214mg/片,RSD为0.48%,表明该方法重复性良好。结果见表3。
表3 重复性试验结果
2.5 回收率试验
根据加样回收率测定法的要求,精密称定同批样品6份,测定其中齐墩果酸含量,依次精密加入齐墩果酸对照品适量,采用紫外-分光光度法测定齐墩果酸含量,计算加样回收率[4]。经测定,齐墩果酸的平均回收率为98.04%,RSD为1.37%,结果表明该方法回收率符合含量测定方法要求。结果见表4。
表4 加样回收率试验结果
2.6 稳定性试验
取供试品溶液适量,分别于放置0、1、3、6、12、24h后各测定1次,吸光度依次为0.495、0.492、0.492、0.494、0.491、0.493,RSD为0.29%。结果表明该供试品溶液的吸光性能在24h内保持稳定。
3 讨论
《中国药典》中肝速康胶囊质量标准项下采用的是回流提取法,本研究在预实验处理供试品时,比较了超声提取法和回流提取法的提取效率,结果表明,二者提取效果相当。由于超声提取法简便易行,且有机试剂用量少,故以其为提取方法。
本研究采用紫外-可见分光光度法测定肝速康片中齐墩果酸的含量,精密度、重复性、稳定性、回收率均符合药典中含量测定的相关要求,为肝速康片的质量控制提供了科学依据。
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].第1部.北京:北京化学工业出版社,2010.
[2] 中华人民共和国卫生部.中药成方制剂[S].第13册.WS3-B-2527-97.
[3] 邢波,杨林,杜英俊.肝速康胶囊质量标准的研究[J].黑龙江医学,2003,16(4):253-254.
[4] 张桥,沈娟,柳于介,等.HPLC法测定凌霄花中麦角甾醇、齐墩果酸和熊果酸的含量[J].中国中药杂志,2011,36(8):1043-1045.
(责任编辑:尹晨茹)
2015-04-02
马春梅(1976-),女,江苏省徐州生物工程职业技术学院讲师,研究方向为医药教学。
R284.1
A
1673-2197(2015)16-0040-02
10.11954/ytctyy.201516018